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问
Western blot实验有阳性条带,但条带信号弱的原因是什么?
whilt-shirt
抗体浓度过低或者特异性不强,建议增加抗体浓度和敷育时间试试
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问
小鼠合笼两个月还没有怀孕,怎么处理
whilt-shirt
可以换新的种鼠或者喂养鸡蛋生瓜子增加小鼠营养
3 回答
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问
小鼠肾脏透明病变
whilt-shirt
有可能是肾水肿,建议做个病理切片看看
1 回答
1150 围观
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问
跑磷酸化的蛋白总是杂带很多,该如何避免
whilt-shirt
使用5%BSA封闭,减少一抗敷育时间
3 回答
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问
跑wb的时候条带总是不完美 笑脸😊一样的条带怎么回事
balalaLy
page胶凝的不好,或者是样品中有杂质
2 回答
528 围观
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问
蛋白质实验中选择抗体问题
秋秋欣欣
一抗建议选择兔源的好一些,稳定一些,二抗就根据一抗选就行
3 回答
1814 围观
3 回答
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问
请问,WB中转膜设备是制冰机的冰来进行降温合适还是直接放冰箱冷藏合适,放冰箱会不会温度太高导致转膜效果不好?
秋秋欣欣
用制冰器的冰来降温就可以了,这样温度更低,还可以在转膜器里放冰袋
4 回答
891 围观
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问
如何消除颜色对蛋白浓度结果的影响?
天一湖医者
用三路甲烷或乙醚萃取试试。或者稀释样品后做,去色素,过柱就可以了
3 回答
1196 围观
3 回答
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问
组织样本Wb内参跑不出来
天一湖医者
可能是因为一抗浓度过低吧,可以试试用1:500的一抗浓度,二抗用的1:2000试试看
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1888 围观
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问
想问一下跑出来的GAPDH背景很黑,会不会跟蛋白提取有关?
秋秋欣欣
背景黑的话应该不是跟蛋白提取有关,应该跟封闭或者抗体的问题
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607 围观
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问
准备跑WB的蛋白煮过以后冻了3个月-20℃,再次拿来跑上样量需要多加吗?蛋白浓度会变化吗?
秋秋欣欣
-20三个月的话蛋白可能会有些降解了,大概20-30ug上样量先跑看看
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3304 围观
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问
常规35-200之间的蛋白,应该用0.45还是用0.2um的转膜纸(pvdf)呢
whilt-shirt
0.45um的就可以,如果是小于10kd的蛋白那就要0.22um的
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4411 围观
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问
胶的浓度与已知目的蛋白分子量,怎么确定用什么浓度的胶呢。。我们目前买的是固定比例的啊
太阳阳了
10%最常用,如果你跑的蛋白差距特别特别大的话也可以用梯度胶
3 回答
873 围观
3 回答
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问
加入碧云天5x上缓冲液变性后,上样会漂样怎么办?
笋干CAU
我之前电泳缓冲液忘了稀释直接用的5x 样品就漂起来了
4 回答
542 围观
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问
间充质干细胞与氧化损伤细胞共培养
balalaLy
这个得做预实验,两种方法都试一下,哪种有效挑哪个。
2 回答
682 围观
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问
鸡胚和鸡细胞的引物用的都是chicken源的吗
秋秋欣欣
鸡胚,鸡细胞,鸡的就要用chicken源的引物
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622 围观
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问
怎么查询某个基因座能够编码多少个氨基酸,翻译多少个蛋白质呢?
天一湖医者
第一,上ncbi检测有没有同源序列。第二,构建载体,转入过量表达看效果。第三,据此推测出蛋白序列,人工合成看效果。
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1121 围观
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问
microRNA minics转染失败
Eason老歌迷
最好先用一个荧光标记的阴性对照做一个转染条件的摸索。
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721 围观
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问
原代细胞的转染
Eason老歌迷
还挺好转染的。一般常用的方法都是电穿孔法,磷酸钙共沉淀法,腺病毒转导,脂质体转染等。
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859 围观
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问
酒精性肝损伤
whilt-shirt
一般选用6-8周,20-24g的成年雄性小鼠
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518 围观
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