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问
用流式分选目的细胞,打小鼠尾静脉,做动物实验,可行吗。
bamboopiggy
可以啊,但是你要做好预实验,确定流式分选能得到足够的细胞。
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问
western blot试验中如何提高磷酸化抗体的检测质量?
Eason老歌迷
可以在提蛋白时,加磷酸酶抑制剂。然后可以延长封闭时间,调整一抗浓度。
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问
转染有些细胞能转进有些细胞转不进
bamboopiggy
建议你配成mix以后,同时转hela和293看看,是不是因为质粒的原因,还是你在配置mix过程中,有遗漏
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问
多巴染色大概要孵育多久?看文献甚至孵育了十几个小时这样的情况下多巴很容易氧化标变质。
天一湖医者
一般是37度孵育4小时就可以了。
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问
【求助】几个样本都这样,A260/280>2.3,A260/230在1.1左右
bamboopiggy
在 pH7-8.5 下 A260 / A280 的比值应该在 2.0 或 2.5,所以你260/280问题不大,问题是260/230,感觉就是你的乙醇没有晾干,然后你rna 的实际浓度可能和你测出来的有出入,所以你可以试试做一下下一步的实验
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1074 围观
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问
细胞检测TC,TG
Eason老歌迷
可以用移液枪轻轻吹打,然后充分使细胞和裂解液接触。
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问
293t细胞求助!
Eason老歌迷
有点像是真菌感染,也可能是你没有吹散的细胞团。
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问
想问一下细胞染什么菌了
Eason老歌迷
感觉像是真菌感染。先用肉眼观察,把培养瓶或培养皿拿起来,对着光线检查。在低倍镜下,真菌的菌丝体成长棒状,并横穿整个视野,还可以观察到酵母,有时呈小圆球形,有时还有芽。
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问
请问这个细胞是有污染吗
Eason老歌迷
感觉像是细胞老化,产生的细胞碎片。
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问
HemECs和HUVEC培养
Eason老歌迷
我们用的1640,效果不错,长的挺好。
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问
脂多糖诱导上皮细胞建立炎症模型
whilt-shirt
LPS诱导细胞数需要对细胞进行饥饿处理的,如果没有饥饿处理可能会出现相反的结果
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问
关于WB原始数据的问题
秋秋欣欣
现在也没有要求提供整张膜啊,只是需要显影的白光对照,如果整张膜的话可以混合孵育抗体
4 回答
1143 围观
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问
通透是否会影响细胞膜表面蛋白染色?
whilt-shirt
会有点影响,有可能会导致膜蛋白染色效果变差
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问
请问,集落形成实验最后的拍照是怎么拍照,是用手机还是显微镜拍?用手机拍的话怎么保持拍的效果都差不多?
Eason老歌迷
当然是显微镜了!它也是通过一个软件来拍摄数码电子照片,比你手机拍的清晰。
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问
提完蛋白之后跑聚丙烯酰胺凝胶电泳如何看蛋白质量如何
whilt-shirt
可以试试用考马斯亮蓝染一下试试
4 回答
738 围观
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问
pcr如何用NCBI设计引物?
bamboopiggy
ncbi主页右侧有个blast,点进去,然后往下拉,有一个primer blast,点进去,然后按照里面的要求填写就可以了
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问
WB蛋白裂解问题提问
汤姆卜丽波
我们用的也是这种。一般不会补加。可以不加
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1035 围观
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问
细胞敲低过表达问题咨询
bamboopiggy
做转录因子和下游靶基因的关系,应该用chip或者是luciferase实验来验证,不是敲低和过表达来验证的。
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问
rtPCR结果分析
Eason老歌迷
1、如果有标准曲线,按照标准曲线计算;2、一般都是相对量,则用delta delta CT方法来计算;3、引物或探针降解:可通过PAGE电泳检测其完整性;4、模板量不足:对未知浓度的样品应从系列稀释样本的最高浓度做起;5、看CT值是分析荧光定量PCR最直观的一个数据,CT值一般在35左右就失去参考价值了,平时我们实验室用BIODAI-PCR荧光定量法测得的扩增曲线的起跳值基本在30左右。
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2880 围观
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问
DpnI酶切后电转,为什么还会有质粒转进去
bamboopiggy
DpnI 酶切后,最好胶回收纯化一下,再电转
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