组织样本Wb内参跑不出来

可能是因为一抗浓度过低吧，可以试试用1:500的一抗浓度，二抗用的1:2000试试看

是不是你的actin已经过期不能使用了或者对应二抗选用不对

你可以先拿丽春红染色看看内参区域有没有条带。一般不会出现这种情况，因为内参都是恒定表达的。有一种可能是actin发强光后在极短的时间内猝灭了（是在做肿瘤方面的课题么，最近我们也在做），你可以尝试下，我们发现有些条带会在发光液孵育完后半分钟内便猝灭消失，原因可能是在极短的时间内发光物质被大量消耗殆尽，同时也可以考虑降低二抗浓度（大约降低一半左右即可。）