准备跑WB的蛋白煮过以后冻了3个月-20℃，再次拿来跑上样量需要多加吗？蛋白浓度会变化吗？

-20三个月的话蛋白可能会有些降解了，大概20-30ug上样量先跑看看

理论上煮过的蛋白在-20℃只能放1-2个月了，超过2个月考虑蛋白降解了，一般这种情况最好重新提取蛋白

时间有点长啊。你拿出来先跑一次预实验，看看效果，有可能都降解了。