实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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细胞

问有小伙伴知道上传蛋白质质谱数据至公共数据库需要多久时间，卡在检验这里2+小时正常吗？

Eason老歌迷

你可以重新退出重新进，刷新几次试试，因为你可能是网络延迟问题。

1 回答345 围观

问酵母载体克隆表达zeocin抗性表达与amp抗性表达问题。

bamboopiggy

加zeocin，amp是你扩增这个质粒，在大肠杆菌里面的时候用的抗生素，而转入酵母之后，用zeocin进行筛选

1 回答614 围观

问关于RIP求助

Eason老歌迷

是不是你的实验步骤有问题。细胞核分离和裂解物沉淀为避免污染,使用不含 RNA 酶的试剂。染色质剪切应该在液氮中冷冻一份裂解物用于对照 RNA 分离。根据所关注的蛋白质和抗体,加入的抗体量和孵育时间可能需要进行优化处理。

1 回答435 围观

问凝胶电泳结果如图所示该怎么办

Eason老歌迷

你这是有点亮带拖尾。可能是你的引物设计不佳，也可能是PCR中DNA浓度加的太多，也可能是mg2+浓度加的太高。

3 回答456 围观

问求助：请问细胞在无血清高糖培养基环境中合成酪蛋白的时间大约能维持多久？

Eason老歌迷

细胞在无血清高糖培养基环境中合成酪蛋白的时间大约能维持在24h左右。当无血清高糖培养基中无法使细胞合成酪蛋白时，重新换新的无血清高糖培养基能够使细胞重新开始合成酪蛋白。

1 回答405 围观

问请各位老师帮看下这家伙算不算是自噬体谢谢！

Eason老歌迷

是的，应该是自噬体。自噬体是单层膜，内膜部分被水解，部分内膜与外膜融合。

1 回答334 围观

问成骨细胞不贴壁是死了吗

Eason老歌迷

到不一定肯定死了，但是状态肯定是不好的。

2 回答527 围观

问头孢曲松钠小鼠注射用法用量

Eason老歌迷

我记得实验手册上有，100mg/kg剂量注射鼠尾

2 回答2423 围观

问粪便保存问题

bamboopiggy

你可以试一下，但是感觉是被破坏掉了，下次加pbs重悬以后，就别放-20保存，要不就加点甘油再放-20冻存

3 回答1096 围观

问求助|活化的b细胞形态正常吗？

Eason老歌迷

感觉还行，还是有一些活化的细胞存在，但是形态不是太好。

2 回答427 围观

问化合物应该是显弱酸性的，结果测的饱和水溶液的值为8.01，PH计结果三点较正，请教一下大神们可能出现的原因，谢谢。

Eason老歌迷

可能是这个化合物密封保存不佳，和空气接触，发生反应，不然它应该是弱酸性啊。

1 回答395 围观

问请问大家PC12细胞造抑郁模型，有成功的吗分享一下经历，我做了一年了，都没成

whilt-shirt

可以参考这篇文献：谷氨酸和皮质酮诱导的PC12抑郁症细胞模型差异性的1H NMR代谢组学研究

2 回答1571 围观

问孕激素受体亚型B在NCBI上应该输入什么进行搜索找到该基因序列？

whilt-shirt

孕激素受体 B 亚型的英文全称是Progesterone receptor B，检索这个就行

3 回答299 围观

问hela贴壁细胞疑是染菌，求大神帮忙判断一下

Eason老歌迷

你可以先用显微镜观察，它有没有游动，培养基有没有混浊。我觉得可能是黑胶虫污染。

3 回答196 围观

问实验小白求助

Eason老歌迷

文献中出现的动物给药浓度，是根据片剂药物的有效成分计算的，而不是直接根据片剂药物的重量计算的。

3 回答200 围观

问小鼠肝脏HE染色求助

Eason老歌迷

染色不均匀的话，可能有几个主要原因。一是组织取材固定不当，如组织取材过大或过厚，不能将组织完全固定，组织切片染色后出现外周固定好的部分易着色，而中间未固定好的组织，细胞着色模糊，使染色不均。二是切片薄厚不均或有横纹。三是组织脱水，透明和浸蜡处理不当，组织脱水用的各级乙醇未能保证相应浓度使组织脱水不彻底，二甲苯内的时间过长组织易碎也无法切出好片子，浸蜡温度过高，组织变脆也不利切片染色。

3 回答1991 围观

问成肌细胞C2C12分化成功后，是用马血清继续培养呢，还是再换成胎牛血清培养

bamboopiggy

诱导分化成功了，就可以换成胎牛血清了，因为此时已经是肌细胞了。

3 回答717 围观

问请问大神这是什么污染

bamboopiggy

没看出细胞污染来，可能是细胞密度太大，所以有死细胞，如果细胞增殖出现问题，可以检测一下支原体试试

3 回答139 围观

问请教，如何寻找共培养系统中癌细胞所产生小分子的机制？

Eason老歌迷

你是想向上游研究THP-1细胞与癌细胞共培养后产生a的机制，对吧?那么你就可以去string网站，进行蛋白互作预测，然后在kegg找通路，这个玩意肯定要慢慢试，挺麻烦。

2 回答334 围观

问最近在做毕赤酵母蛋白诱导，总是失败?

Eason老歌迷

可能是有几个原因。如果用GS115表达不出蛋白，我们换成KM71H后，大部分克隆能表达。我们尝试过在28度和室温下诱导表达，表达水平可能都不低。ph的话就选择用6.0——6.8，BMMY的pH7.0-7.5比较合适。

2 回答661 围观

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