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问
WB内参很奇怪,用的actin
bamboopiggy
不知道你跑胶的时候,条带齐不齐,如果跑胶的时候齐,感觉还是转膜的时候出来问题,不是加抗体孵育的问题。因为颜色够深。
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问
小鼠脑片 Nav1.6 染色
实验小助理静静
已通过审核,谢谢您的经验分享~
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问
救救孩子的WB
bamboopiggy
不知道你的问题是什么?是问有些条带背景深么?有的时候抗体特异性不是那么好,会出现背景,但是如果不影响你的结果的趋势的话,可以用。
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问
蛋白不进胶
bamboopiggy
是不是你的lysis 坏了,或者是5xSDS的SDS坏了,导致蛋白没有裂解开?
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问
Touch Down PCR?
bamboopiggy
touch down pcr本来就是为了更好的得到实验结果才加的pcr程序,不需要优化,一般你把 touch down的annealing temperature 设置从55-65之间,就可以。如果说你的primer的Tm值太高,也可以适当的把annealing temperature的范围提高一些
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问
粪便DNA提取过程中需要无菌操作吗?比如说提取过程中的枪头需要高压灭菌处理吗?
whilt-shirt
最好还是灭菌的枪头,避免DNA酶的影响
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2534 围观
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问
做定量pcr 的时候,跑出的数据要怎么计算相对值
bamboopiggy
用ΔΔct法,你直接套进去,然后放到excel里面处理就可以。
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问
qPCR重复性和结果处理
bamboopiggy
1、实验性重复,是指每次实验,每个样品,针对每个基因要有最少三个复孔。不用12个,也不用重复三天。2、①这个都可以,看你想怎么处理。②3个复孔取平均值。3、你的实验结果可以,但是太费了,你只要做3个复孔,做一天就可以。
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问
我在做实时荧光定量PCR的时候,我是先设定好样品和目标名称,一共两个目标基因,两个内参。但是我跑完就变成一个内参,其中一个内参
bamboopiggy
可能是你设置的问题,一般的realtime pcr仪都可以在跑完后,设置样品和目标名称的。
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问
原核蛋白pET32a诱导表达
Eason老歌迷
也有可能是分子伴侣。也可以你的目的蛋白有降解了。
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问
等电聚焦电泳
丁香清香
等电 聚焦 电泳的详细讲解:https://www.biomart.cn/experiment/430/465/471/16149.htm https://www.bilibili.com/video/BV15L4y1q7B1?spm_id_from=333.337.search-card.all.click
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问
蛋白互作调控
Eason老歌迷
这个很好理解啊,细胞调控又不是光只有它两个蛋白,还有c还有d,可能c,d影响着a,b之间的这种作用呢
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问
有没有伙伴做短链脂肪酸干预细胞的,怎么配置里面的短链脂肪酸,比例是多少?
Eason老歌迷
短链脂肪酸(SCFA)又被称作挥发性脂肪酸(VFA),评价标准在于碳链中碳原子的数量,我们将碳原子数量在2-6之间的有机酸称为短链脂肪酸,其名称分别为,乙酸、丙酸、异丁酸、丁酸、异戊酸、戊酸、己酸。具体的配制方法,请参考这篇文献方法部分”短链脂肪酸影响B细胞表观遗传修饰以调节抗体应答‘’
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446 围观
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问
请问为什么IP的igg会出现目的条带呢
你好几和户
原因可能是没洗干净,随便再用几种其它抗体,可能也能检测到类似条带。
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问
96孔板和6孔板药物浓度一样,肿瘤细胞抑制率不同
认真搞科研的小王
同样接种密度下,6孔板与96孔板总接种量是否相同?可能是由于6孔板细胞量较96孔板高,低浓度与中浓度剂量达不到抑制效果,应提高剂量
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1837 围观
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问
【求助】取材小鼠大脑杏仁核
bamboopiggy
你可以去视频网站找找看,我取的时候,是从大脑底部,先取丘脑,然后海马和杏仁核
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问
关于中药有效成分提取后药理有没有合适的细胞实验?
认真搞科研的小王
看有效成分主要针对哪种疾病,选择合适细胞。推荐选择肿瘤细胞
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问
原代脂肪干细胞在显微镜下看有很多贴壁的,一换液就没有了。这是因为贴壁的是其他细胞还是贴壁不劳啊?
Eason老歌迷
可以从下面几个方面考虑,1,是不是你的双抗浓度太高了呀,2你的细胞是第几代了,若原代,换液时应轻柔一些,若代数较高,是不是细胞的增值速度慢了呀,3,应考虑一下你的细胞的接种密度。
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问
时间的选择
Eason老歌迷
是的,这么设置是正确的,这个和凋亡的过程有密切关系。凋亡一般是前期由外部(受体介导的)途径涉及受体结合、激活起始caspase酶 ( caspase-8)、caspase-8继而激活caspase-3或者切割Bcl-2家族成员Bid,从而放大caspase-3的激活效应;Bid的切割导致细胞色素C漏出、蛋白复合体(也称作凋亡复合体)的形成,以及caspase-9的激活(3)。内部固有(线粒体介导的
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561 围观
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问
细胞凋亡实验对照组凋亡率非常高
认真搞科研的小王
细胞培养时间是否过长?可调节培养时间接种量是否合适,接种量过大会导致细胞密度过大进而导致细胞凋亡
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