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蛋白跑胶
bamboopiggy
可能是你蛋白的浓度太高了,或者是蛋白出现降解了。
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问
求助各位大神,帮我看看qpcr扩增曲线太奇怪了,有负的荧光信号,但是溶解曲线是好的,
Eason老歌迷
你这是有溶解曲线,无扩增曲线。可能是反应程序问题,扩增阶段未收集荧光信号。建议你检查程序设置。
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问
谷氨酸棒状杆菌基因整合
Eason老歌迷
不用!不用加终止子,你加完之后他有的基因没表达会有影响的。
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问
HEK293f细胞培养抱团
Eason老歌迷
可能是以下原因导致它抱团。状态不好、老化的细胞,也可能会出现抱团生长的情况(比如换液不及时、长的太满才传代、污染等造成的细胞状态差)。传代时没有吹打均匀,细胞团多,培养时就会是一团一团的。接种不均匀,或者是细胞未消化开。非震荡培养或细菌(胞)量过多的话就会成团。
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问
H9C2细胞用cck8做细胞生长曲线出现的问题
Eason老歌迷
感觉是你的个人操作问题。另外提个建议,做生长曲线为什么用CCK-8?直接对细胞计数多直接可靠?我建议你用细胞计数法,最具有说服力,谁也不会有疑问。平行养多皿细胞,每间隔一段时间收细胞计数,每个时间点3次重复。做个折线图,很方便的。
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问
求助:hek293t 做mtt,加完mtt孵育后吸走原液总是把甲瓒也吸走
Eason老歌迷
你是把死细胞吸走了吧,你可以吸的时候慢一点轻一点。你可以换成cck8法,或者直接做细胞计数也行。
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问
Cck8与六孔板结果相反
Eason老歌迷
不知道你有没有看过一篇文献,药物积聚程度与细胞死亡相关。还有一种可能,我觉得是不是你在6孔板中加药的浓度没有计算好。
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问
取材完来不及做流式的组织如何保存呢?-80可以吗?
bamboopiggy
绝对不能-80,一旦-80.你就没法再用了。流式一般用新鲜的细胞,实在做不完,你放4度保存都比-80好
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问
求助求助
Eason老歌迷
香豆素衍生物可抑制铜绿假单胞菌毒力因子的产生,中国知网和PubMed上都有文献介绍。
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问
乳酸脱氢酶释放实验遇到的问题
Eason老歌迷
我之前也遇到过这种情况。需要注意一下各组细胞接种密度是否均一,生长状态是否一致。一般细胞种板时应不断摇晃细胞悬液使之密度均一,另外注意每组细胞各孔OD值是否相差很大,如果标准差太大,则样本不能很好的代表总体。如果这些都没问题,就应该注意一下药物的配制问题,药物配制的时间(时间过久可能失效)、纯度(纯度不高会影响药效)
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问
请问,这是HCT15细胞,这个给个的团块不会移动,是什么污染吗?好奇怪呀
Eason老歌迷
你的图没有上传上来。可能你这个细胞培养皿里的团块是传代没有传均匀,细胞成团了,并不是污染。
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问
测定C57bl/6J 小鼠的免疫能力,可以测量那些指标
Eason老歌迷
C细胞,T细胞,巨噬细胞,免疫球蛋白A、免疫球蛋白M、免疫球蛋白G、补体C3、补体C4、C反应蛋白、类风湿因子
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问
小鼠骨髓间充质细胞培养
Eason老歌迷
看着还行,状态还行。刚提取出来的时候,用PBS洗涤贴壁细胞(第0代),每3-4天加入新鲜培养基;初始贴壁纺锤形细胞第3天显示为单个细胞; 在4-8天内,培养物变得更加清晰,并在2周内达到65-70%的影响;在这个阶段,培养物通常表现出两个特征:首先,平板可能含有不同大小不同的成纤维细胞集落; 第二种可以包含散布在细胞集落之间或之上的非常少量的造血细胞。
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问
CD3+CD49b是NKT细胞吗
Eason老歌迷
一般将CD3- NK1.1+或者CD3- CD49b+细胞定义为NK细胞。
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问
RAW264.7细胞的M2极化方案
dxywode
变化没有LPS刺激大,前段时间有个做巨噬细胞的老师建议我不要用细胞株做M2型,用骨髓细胞做。
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问
TCID50结果在稀释梯度高的孔忽然出现异常阳性,是污染吗?
Eason老歌迷
可能是研磨裂解不充分,让病毒颗粒没有完全释放出来,聚集导致后面孔有阳性。
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问
乳鼠成纤维细胞培养问题讨论
Eason老歌迷
大部分都是用高糖DMEM,但我最近用低糖培养细胞时,也未发现有明显不同。他们之间就只有糖份的含量不同,其余是完全一样的。
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求细胞生长
Eason老歌迷
一般刚开始做的话你就可以做6纵列,每列5个副孔。96孔板的每个孔上,加入100微升的细胞悬浮液。把它从左边加到洞底。加入一半板材后,与未加入的细胞悬浮液混合,然后继续加入剩余的一半板材。盖上盖子后,用左手轻轻握住木板的左边,然后用右手轻拍木板的右边缘。注意力集中在力量上(通常敲击它三次)。太多或太多次会导致细胞堆积。顺时针转动盘子(逆时针方向不好) ,将剩下的三面逐一拍打,静置5分钟左右,然后放入
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问
【求助】双荧光素酶实验结果和荧光定量结果相反
Eason老歌迷
不应该啊,我觉得可能是你的实验操作有问题。双荧光素酶报告实验还是很准确的,采用萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶组成,实验过程中萤火虫荧光素酶与基因表达的特定实验条件有关,海肾荧光素酶用来做转染的内参,以校正不同样品之间转染的转染效率。
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问
TCR cross-linking,T细胞受体交联什么意思?
Eason老歌迷
TCR由两条多肽链组成(α/β或γ/δ),每条链分为恒定区和可变区,且每条链包含及个高度可变区CDR1(complementarity-determining regions,CDR,互补决定簇1)、CDR2、CDR3。其中CDR3是TCR直接接触抗原肽的区域,对TCR与抗原肽-MHC复合体的互作起到决定性作用,且CDR3是可变程度最高的区域,很大程度上决定了TCR的多样性。受体交联就是抗体可通过
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