Touch Down PCR?

touch down pcr本来就是为了更好的得到实验结果才加的pcr程序，不需要优化，一般你把 touch down的annealing temperature 设置从55-65之间，就可以。如果说你的primer的Tm值太高，也可以适当的把annealing temperature的范围提高一些

退火温度的设定是根据自己的情况可以调整的，比如说，60－50这段温度范围可以设5个温度值，60，58，56，54，52，50。前四个每个温度2个循环，最后一个再20－25个循环。我的温度设定一般是上五度和下五度。