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二抗4h,洗了5min8次=40min
一抗18h,洗了45min,5min一次
封闭过夜milk
bamboopiggy
不知道你的问题是什么?是问有些条带背景深么?有的时候抗体特异性不是那么好,会出现背景,但是如果不影响你的结果的趋势的话,可以用。
Eason老歌迷
背景脏条带不清晰。现在天气热了,封闭时间可以控制在2h。一抗和二抗孵育时间也要缩短,洗膜时间可以改成洗三次,每次10分钟。
whilt-shirt
背景深有可能是抗体敷育时间过长或者抗体特异性不强导致的