实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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问流式分选是否可以用多克隆抗体？

balalaLy

首选单克隆抗体，具有特异性，结果更准确，次选多克隆抗体

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问蛋白质胶总是凝的很慢，凝的不好怎么回事

高山云初

过硫酸铵一定要现用现配,时间久了就会造成不凝.这是最常见的不凝的原因

5 回答1807 围观

问qPCR的Ct值可被接受的区间是多少？是15～30吗？

粥辰辰辰辰

qPCR的Ct值可被接受的区间是15~30

3 回答2075 围观

问如果skyline锁定的所有离子对均不出峰，该怎么锁定目标离子对？

高山云初

在碰到样品没有出峰的情况，首先考虑是否是因进样浓度太小，运行时间不够，仪器和色谱柱故障，样品是否降解变质，检测器（检测波长）的选择是否准确等问题导致的。如果排除上述问题，样品仍未出峰，则很有可能是样品在固定相上保留太强，这样可以先调整流动相的洗脱能力，增强对化合物的洗脱，或者更换更合适的固定相，如反相C18换成碳载量低一些的C18或者短碳链的反相柱如C8等。

3 回答392 围观

问ELISA实验和液质联用法（LC-MS）相比，有何优缺点？

高山云初

缺点：1、重复性不好；2、收自身抗体、嗜异性抗体等干扰，易出现假阳性；3、不论仪器和手工操作，干扰因素较多。影响最大的是温度和时间。

3 回答2230 围观

问高效液相色谱用于分离酶解后的蛋白，还需要纯化吗？

sswei

高效液相色谱用于分离酶解后的蛋白，还需要纯化

3 回答299 围观

问请问对于新上市的多肽类药物，如何在skyline软件上寻找可能性较大的离子对？如何筛选出较少的目标离子对，用质谱MRM通道监测？

dxy_mqg1dtg8

对于新上市的多肽类药物，建议首先进行文献调研，了解该药物的化学结构、氨基酸序列和药代动力学等信息。根据该信息，可以使用Skyline软件构建出该药物的离子对库，包括预测的前体离子和碎片离子。在构建离子对库时，可以考虑以下几个方面：1. 根据氨基酸序列预测可能的碎片离子，包括b离子、y离子、a离子、x离子等。2. 针对药物的特殊结构，预测相关的碎片离子，如磷酸化、甲基化、乙酰化等修饰的碎片离子。3.

3 回答494 围观

问大小分子蛋白各自的电泳胶浓度如何选择？蛋白marker大分子条带降解原因？蛋白样本跑胶时出现笑脸条带什么原因？

高山云初

微笑是因为你灌胶的时候冷却不均匀,中间部分冷却不好,导致凝胶中的分子有不同的迁移率所致

4 回答659 围观

问使用短干扰RNA（siRNA）单独验证了它们对LDLR蛋白水平的影响怎么实现？

dxy_mqg1dtg8

将siRNA转染到细胞中培养一定时间，然后提取细胞总蛋白，WB检测LDLR蛋白的表达，就可以明确siRNA对LDLR蛋白表达水平的影响。

4 回答352 围观

问请问各位这是什么原因呢？转膜后样品孔道也有maker，是加样的时候飘样了吗？

此用户已注销

1、loading buffer的甘油太少，时间放置过长，浓度不对2、电泳液放置时间过长，浓度太高3、胶没配好或者把梳子用力不均匀，上样孔有凝胶

4 回答481 围观

问用多聚甲醛固定组织，会对组织荧光光谱测量有影响吗

此用户已注销

可用1%多聚甲醛预固定保存,但不能长时间使用,否则对细胞FSC、SSC和荧光强度影响大

3 回答1046 围观

问培养细胞用的玻璃瓶去干热高温灭菌是锡箔纸还是铝箔纸？

粥辰辰辰辰

用铝箔纸，铝箔有对水汽、空气、紫外线和细菌等的屏蔽性能，因此玻璃血清瓶以铝箔纸包覆瓶盖轻轻缠绕就行，高温高压的时候盖上没事

4 回答737 围观

问脑片与脑图谱结构如何一一对应

dxy_mqg1dtg8

将脑片和脑图谱上的结构对应起来可以通过以下步骤进行：1.获取脑片和脑图谱的数据：首先，需要获取脑片和脑图谱的数据。脑片可以通过显微镜观察并拍摄图像，获得高分辨率的细胞和结构信息。脑图谱是一种整个脑区域的三维结构模型，可以通过脑部成像技术（如MRI或fMRI）获取。2.对齐脑片和脑图谱：将脑片图像和脑图谱进行对齐，以便在同一坐标系下进行比较和分析。这可以通过计算机图像处理技术来完成，例如使用图像配准

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问C2C12细胞培养增殖和分化培养基都用的马血清吗

sswei

C2C12细胞增殖培养基：高糖DMEM+10％FBS+1％PSC2C12细胞分化培养基：高糖DMEM+2％马血清+1％PS

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问大鼠和小鼠哮喘模型的构建。

周末也要努力呀

可以做老鼠肺功能检测验证一下即可

3 回答609 围观

问热重实验降温阶段对话框显示“外部复位：样品热电偶错误在线”且炉体温度和样品温度异常显示怎么解决？

dxy_mqg1dtg8

出现“外部复位：样品热电偶错误在线”以及炉体温度和样品温度异常显示的情况，可能是由于以下原因导致的：1.样品热电偶连接不良或损坏。2.仪器传感器故障。仪器控制系统故障。解决方法如下：1.检查样品热电偶连接是否牢固，确保连接正确，没有损坏或断裂。如果发现有问题，应更换或修复热电偶。2.检查仪器传感器是否损坏，可以尝试重新校准或更换传感器。如果以上方法都无效，可能是仪器控制系统故障。此时，建议联系仪

2 回答952 围观

问斑马鱼解剖图以及视频有没有啊？

静心观照

成年斑马鱼器官解剖视频，链接如下：https://v.youku.com/v_show/id_XNzk4NDgwNzI0.html

3 回答779 围观

问请问诸位老师，定量蛋白质组学的抗病毒天然免疫通路蛋白泛素化研究，最近有什么新的学科进展？谢谢

huarenqiang5

研究新进展，可以看一下这篇文章《Tankyrases inhibit innate antiviral response by PARylating VISA/MAVS and priming it for RNF146-mediated ubiquitination and degradation》，该研究使用生化纯化方法，首次发现VISA能够被Tankyrase 1 (TNKS1，PARP5a

3 回答330 围观

问大肠杆菌中菌上清液中高效液相色谱测天冬酰胺的含量

sswei

1)．先对流动相进行过滤，根据需要选择不同的滤膜，般为有机系和水系，常用的孔径为0.20um和0.45um。2)．对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。3)．正常情况下，仪器先用甲醇冲洗10-20分钟，然后再进入测试用流动相(如流动相为缓冲试剂，则要次重蒸水冲洗10-20分钟，直至色谱柱中有机相冲净为止) 。4)．般情况下，流动相冲洗20-30分钟后，仪器方可稳定，重要的是仪器基线走

2 回答512 围观

问请问已知代谢途径，比如CNS的完整途径一般有什么权威完整的解说吗？目前做数据分析方面，需要关键基因和蛋白序列

高山云初

上ncbi网站上来查询相关的内容

3 回答320 围观

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