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问
组织放在4%的多聚甲醛中保存放在-20度保存2个月,还能用吗?
府宅
使用4%的多聚甲醛可以固定标本不能超过48h,固定时间太久组织会变脆如果是在温度4°以下最多可以放一个月,但是肯定会损失抗原的
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问
免疫荧光:视野中细胞与细胞之间存在散在的发光点的原因有哪些?
dxy_gwrp7ndq
PBS 未过滤,未溶解的残渣黏附而导致
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问
组织样本无法及时进行免疫组化实验,怎么保存最好?
whilt-shirt
可以用组织保存液放-80保存。
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问
免疫荧光染色,非特异性染色太高,怎么解决呢?
balalaLy
封闭用好一点的封闭液,设置不加一抗的阴性对照,确保拍照的参数一致
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问
对于多色免疫荧光,是同时孵一抗,然后同时孵二抗,还是分开孵育?
whilt-shirt
一般是分开敷育的,这样效果会好一些
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问
为什么我的细胞提取液中没有目标蛋白?或者提出了很多杂蛋白
冷泉港蛋白
分子量太大了,表达不出来;也有可能同时有细胞毒性。1.你的重组蛋白分子量=27KD+130KD=157KD2.原核蛋白表达的分子量大小一般不能超过100KD(含标签);如果不表达,诱导剂浓度,温度,时间的调整方面,意义不大,不会实现从无到有的质变,只是个量变而已。3.如何解决: A.大蛋白很少使用大标签, B.截断表达 C.更换为真核表达系统 D.做实验之前先预研一下:文献和商业化蛋白的厂
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问
做的流式细胞术结果总是和我们课题组预期的相反,怎么办?
whilt-shirt
是不是试剂有问题,换个试剂试试
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问
免疫荧光用PBS和PBST效果差别大吗?哪一个更好一些
天一湖医者
个人认为PBS还是要好一些,因为PBST里面含有HCL对实验肯能会有一些影响。做免疫荧光的话一般自己实验室配制的PBS就可以,细胞培养级别就是纯度更高一些,你用分析纯的试剂配制PBS完全可以满足实验的需要了!
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问
抗体是永久有效的吗?还是有一个有效期,然后是有有效期的话,那有效期是多久呢?
天一湖医者
抗体是不是永久有效的,每个有效期都不一样,具体要看抗体类型。
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问
那怎么样冻存细胞才能保证细胞能正常复苏,不至于冻存死亡呢?
麻黄连翘赤小豆
在冻存过程中减少冰晶的产生,这样细胞就不会刺破,根据这个目的进行冻存方法的改进。有些细胞是95血清5培养基,还有现成的冻存液都是可以用
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问
免疫荧光实验中,怎么改善荧光易淬灭问题
麻黄连翘赤小豆
可加防荧光淬灭剂,或者你速度快点以及在激光照的时候再拍照,不拍的时候移开玻片
3 回答
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问
细胞提取液有的有沉淀,有的很清亮,为什么呢?
balalaLy
沉淀可能是细胞碎片或者是核酸,离心后注意不要吸到就行
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问
Elisa的细胞上清液样品可以冻存后再用吗
天一湖医者
可以,Elisa的细胞上清液样品可以冻存后再用。
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问
做WesternBlot时,提取蛋白后冻存,条带很弱
麻黄连翘赤小豆
说明你这个蛋白已经降解了,建议重新提蛋白
4 回答
435 围观
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问
请问小鼠眼球取血的量为什么总是很小?
麻黄连翘赤小豆
一般小鼠血量差不多0.5-1ML,眼球摘掉,用力挤压腹部和心脏,还有就是一旦眼球那边凝血,可换另一只眼球,或者用干净镊子把血块弄掉再挤血
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问
前后引物同时加入为什么会P出两条带
n0y0j7
碱基配对不是绝对正确,会有错配的,结合在不同地方,扩增出不同的条带
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问
小鼠脾分离出来的细胞一次可以孵育四种抗体吗?
balalaLy
可以,比如两个鼠抗两个兔抗,但两个同种属的一抗亚型不一样比如一个是IgGa,一个是IgG2a,然后对应的二抗也是不同亚型。
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374 围观
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问
第一次做免疫荧光,镜下观察只有 DAPI 的蓝光,目的荧光几乎没有,这是什么原因?
此用户已注销
出现这种现象很有可能是抗体比例太低,需提高抗体浓度
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问
求助 为什么我1000bp的条带pcr产物跑胶跑到了250的位置,之前跑都是正常的
n0y0j7
和之前肯定有不一样的地方,pcr试剂,引物,模板其中总有弄错的
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问
小鼠精原细胞 53BP1免疫荧光染色。
此用户已注销
这精原细胞染色挺好的,图片也很精美
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