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求助WB内参不齐
whilt-shirt
可以用image j计算灰度值后调整上样量,缺的部分用2x的loding buffer补足
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问
免疫组化:着色部位不对是什么情况?本是胞浆抗原,但实验显示结果却在胞核有着色?
Eason老歌迷
做了几次实验呢?可以多做几次 ,可能是你的染色过程有问题。
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问
显微镜视野中不是细胞的部分也有荧光信号的原因是什么?怎么解决啊?
Eason老歌迷
可以调整一下显微镜的曝光时间,补偿时间等。
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问
免疫共沉淀—磁珠成团啦,咋整?
Eason老歌迷
可以重悬试一试。倘若磁珠形成团聚,导致磁珠的表面没有完全暴露出来。如果该问题出现在早期的生产步骤中,则会导致涂层的不均匀;如果发生在后期,就会导致试剂反应性有较大的差异。
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问
免疫组化:出现切片边缘着色的现象,可能是什么原因导致的?我应该怎么避免呢?
府宅
切片上滴加的试剂未充分覆盖组织,边缘的试剂容易首先变干,浓度较中心组织高而致染色深。试剂要充分覆盖组织,尽量避免选用坏死较多的组织。
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问
做乳腺组织的免疫荧光染色,激光共聚焦显微镜看很好,有阳性信号,但是拿到荧光镜下看,我的阴性对照一片绿,像非特异性染色,哪个是真的
whilt-shirt
有可能是荧光显微镜波长不太对,以共聚焦为准
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问
用抗原诱导机体产生不同用途抗体时,对相应抗原有什么要求?
冷泉港蛋白
一、我想总体的原则应该是:1.抗原(免疫原)应尽可能的与检测对象的构象保持一致!2.纯度当然越高越好了,起码要达到80%二、对抗原的要求(根据抗体用途进行分类):1.wb用途,我们检测的是变性的抗原。免疫原也最好是变性的,很多情况下我们拿不到足够多检测对象去做免疫原,就得考虑基因工程了,当然还涉及到表达系统的问题。最好能沟保持一致2.IHC用途,经过多聚甲醛固定之后的抗原,介于天然与线性之间了。考
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问
请问无血清培养基中本身含有酪蛋白吗?无血清培养成分中的氨基酸能够直接合成酪蛋白供细胞所需还是细胞利用无血清中的氨基酸合成酪蛋白?
Eason老歌迷
无血清培养基中本身不含有酪蛋白。细胞利用无血清中的氨基酸合成酪蛋白。
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问
RNA的检测
Topmicro
你有没有做阴性对照,看看每次的阴性对照一样吗
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问
求助抑郁细胞模型相关问题
Eason老歌迷
如果你选取pc12,可以选低分化的。我之前实验室师姐养的,说挺好养的,你可以去pubmed上查相关文献,找它的方法里有。
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问
bv细胞这个形态是活化了吗
麻黄连翘赤小豆
这个图就是可以看到触角了,就是极化状态,
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问
小鼠骨髓染色体畸变,出问题了,求助啊
大草原的小灰驴
可能是染色体制备后,在滴片步骤时候没有掌握好合适的环境温湿度,采用的冰片还是冰水片或分散仪,滴片后是否过火等操作细节问题。另外再检查一下培养过程的环境等条件控制,试剂和培养基是否失效。
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问
抑菌实验
此用户已注销
最好是需要的、具体的要知道某种菌悬液浓度的方法:首先,取一定量菌悬液,测定其OD值,然后稀释100倍-1000倍,然后培养基培养,数其中的CFU数,换算成相应的浓度。然后根据这些数据来换算1-9×104对应的OD值是多少,下次培养到相应的OD值就行了,具体多久就要根据你的生长曲线来了。
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问
pi染色细菌在荧光显微镜观察问题
Eason老歌迷
用多聚甲醛固定,细胞培养好了,要染色前固定就行。
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问
sw620细胞形态哪一个是正确的
Eason老歌迷
第二张图,我看着第二张图更好些。
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问
只要是荧光抗体就可以⽤于共聚焦显微镜吗?
guofei11227
是的,有荧光抗体就可以用于共聚焦显微镜
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问
免疫组化的问题求助下?
Eason老歌迷
在指标与染料的搭配以及染色顺序上,没有什么特定规律。抗体修复液每一轮修复都要更换。
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问
请问流式检测膜蛋白表达的变化用多克隆抗体出结果的机会大吗?
此用户已注销
抗体只是针对相应抗原的,⾄于是针对胞内还是胞膜对你检测来说并⽆明显影响,你只需要查清楚到底是针对哪⼀个部位的抗原的,应该是可以⽤同⼀种抗体进⾏检测的,在流式操作时只需注意:如果是针对胞内,则需要加破膜剂,让抗体能和相应抗原接触,否则就不需要了。
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问
小鼠外周血进行流式细胞术鉴定细胞分型,为什么线性图看不到分群但是对数图可以?
此用户已注销
细胞分不开的因素有个人认为有以下因素(1)抗体的特异性不好(2)选的单标不合适,若细胞本身抗原就低表达,若还选择弱荧光的FITC那估计确实难以分开(3)前处理有问题,这点我自己感触很深,因为我刚做流式的时候单标抗体也分不开,后来经过好几次摸索才将细胞分开的,细胞一样,抗体也一样,就是前处理不一样。(4)仪器参数的设置,这个一般操作人员的技术比较高应该不会有多大问题,不过我们一般做的时候都会加一个同
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问
免疫组织化学的对照怎么设置
此用户已注销
做相关抗体预测实验,弄清楚抗体浓度,最好同时做抗体阳性和阴性对照
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