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问
我的细胞提取液有的有沉淀,有的很清亮,为什么呢?
麻黄连翘赤小豆
如果是蛋白提取液的话,有沉淀说明蛋白提取出来了,很清亮说明里面蛋白含量少,都看不见
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问
WB中浓缩胶的量一般是多少,蛋白跑出浓缩胶后没有浓缩成一条线,而是拖的很严重是为什么,该如何解决
府宅
拖尾原因:1.上样量不均,从内参就能看出,建议检测总蛋白浓度后调节至相同用量如50ug;2.可能与蛋白变性、凝胶质量、电泳条件、封闭条件、抗体特异性有关,建议调至相同浓度后变性,可进行80、120v电泳,室温封闭2-3h,降低一抗浓度(增加稀释倍数),可降低所用蛋白总量。
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问
请问如何把ph等于5.5的Tris—HCl调成8.3的?
Topmicro
你这废了,不只是pH不对,浓度也不对,重新配置吧。
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问
为什么石蜡切片切出来的很多皱褶呢?
balalaLy
石蜡块温度偏高就会起褶,继续冷冻一下
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问
做elisa发现大部分样本od值均小于空白孔od值是怎么回事呀,做过两次,换了样本,且步骤是按照说明书做的
whilt-shirt
有可能是样本出问题了,建议重新提取样本
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问
养小鼠血管内皮细胞,种六孔板上,第二天出现很多小白泡,请问什么原因?是感染?碎片
Eason老歌迷
是细胞死亡或正在死亡中裂解后形成的空泡,应该是什么操作或培养条件变化导致细胞状态变差、死亡。
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问
鼠尾胶原配置
Eason老歌迷
121.3℃,时间维持15~30分钟。
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问
求助:无血清培养基中本身含有酪蛋白吗?
你好几和户
一般没有酪蛋白的,可能有如纤连蛋白(FN)、层粘连蛋白(LN)这些。
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问
求问各位大佬,大鼠脾提淋巴细胞进行体外排斥反应模型
Eason老歌迷
还可以加比如说,ifn-gamma啊等等。96孔板铺板细胞数,那要看你实验具体情况,一般我们是1500~5000个每孔(100ul)。
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问
【求助】拟南芥侵染后,种子筛选技巧
Eason老歌迷
我在实验室如果在培养基上点,一般用灭过菌的牙签,将牙签蘸一下培养基,就会有粘性,可以一粒一粒点种子,至于怎么将拟南芥点整齐,一般在培养皿下面垫一张划着直线的滤纸,沿着直线点就可以了。蓝色枪头一般用在将种子直接点在基质上。
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问
皮肤石蜡切片染色组织全碎了
whilt-shirt
这种情况有可能是脱水时间过长导致的
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问
寻求帮助!slot blot
Eason老歌迷
我们是用凝胶成像仪,你可以试一试。
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问
眼球取血的EP管需要灭菌吗?组织存放的冻存管用于wb等实验的需要灭菌吗?
Eason老歌迷
眼球取血的EP管不需要灭菌。组织存放的冻存管用于wb等实验的不需要灭菌。
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问
蛋白提取问题细胞蛋白提取
冷泉港蛋白
正确做法:加入上样缓冲液,煮十分钟,分装,尽早跑WB,暂时不用的放于-80度冰箱。为什么这样做:1.煮的作用:可以破坏蛋白的疏水和氢键,破坏高级结构,使蛋白变性。2.上样缓冲液的作用:含有还原剂和SDS,还原剂破坏了二硫键,SDS破坏疏水,从而实现变性蛋白的目的。3.低温的作用:降低温度是为了减缓分子运动,降低碰撞,减缓目的蛋白的降解,因此温度越低越好!4.负80度,还存在分子运动,所以应该先变性
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问
为什么我的内参跑不出来呢??
是付先生的小可耐
1.提的Rna有问题2.引物设计不对3.加样问题
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问
请问人Tp53和鼠Tp53的同源性如何?
冷泉港蛋白
上图是在线数据库Uniprot的比对结果,小鼠蛋白和人蛋白的序列同源性,本就很高。要看你的实验目的,如果你要用抗体区分两个蛋白,就只能用同源性最低的那段序列了。如何进行氨基酸比对:A.在线数据库,如uniprot,NCBI等。B.序列比对软件 DNAman,bioxm等
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问
PSA-NCAM,A2B5磁珠分别分选的什么细胞
冷泉港蛋白
1.说下PSA-NCAM:分离PSA-NCAM的阳性细胞,即细胞膜有该分子的细胞,比如Neural cells,厂家的阳性对照做的是该细胞厂家说明书(下图),你可以查下:2.如何查询这些信息:A.登陆数据库 UNIPROT 输入 目的蛋白,找到expression.B.查询提供分离磁珠的厂家,说明书会有C.查文献
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问
COIp实验中,如果分子是55kda的话,曝光一直有杂带,怎么办呀
dxy_yrovq1i9
买去重链的二抗。稀释二抗浓度,或者换SDS-PAGE胶的浓度,把重链和IP条带那个位置分的开一些,就能截图了。
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问
PGEX-4T3-GST-HIF1α蛋白纯化没有条带是为什么呢?
dxy_yrovq1i9
蛋白太大了,GST不好表达。把GST标签换成His吧,基本可以一把出。
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问
chip 实验
此用户已注销
图像质量有点差,看不特别清楚。 而且你这个是条带没出来。你有没有做input阳性对照啊。
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