实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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问请问奶牛乳腺上皮细胞在有血清培养环境中，细胞培养上清中酪蛋白浓度随时间的增加会如何变化？

bamboopiggy

如果确定能产生酪蛋白的话，随时间的延长，酪蛋白浓度会增加。尤其是细胞翻倍以后，产量会更高。

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问小白想问问各位老师GAPDH分子量为140kDa,检测条带在37kDa是什么意思呢

你好几和户

因为细胞质GAPDH 主要以四聚体形式存在。这种形式由四个相同的 37- kDa亚基组成。

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问免疫组化实验中如何防止脱片?

bamboopiggy

1. 玻片的酸处理使用实验室常用的次强酸清洁液（重铬酸钾120g，浓硫酸200ml，蒸馏水1000ml）浸泡玻片24小时，流水充分冲洗后在用蒸馏水冲洗三遍，置于95%乙醇中浸泡12小时，取出放烘箱中烤干或自然风干。2. 黏附剂的使用目前常用的黏附剂有三种：明胶-硫酸铬钾，APES（3—氨丙基—乙氧基甲硅烷），多聚左旋赖氨酸（poly-1—lysine）（1）明胶-硫酸铬钾，这种方法十分简便实用，不

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问293T细胞传代以后过夜培养基变粉？

Eason老歌迷

有污染了吧，看着像是细胞污染了。

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问免疫荧光目的蛋白不好找，找到了要么拍不出来，或者拍出来曝光时间特别长，特别糊，一直动

此用户已注销

通透剂作用的时间或强度、换用其他抗体，使用正确的抗体。

3 回答422 围观

问EMSA实验同样的探针，为何每次跑出来，下面free probe 亮度不一样

bamboopiggy

只要是人操作，就会有差异的。只要你实验结果能说明问题，不要强求非要一致。

2 回答1224 围观

问HA标签有9个氨基酸构成如果只插入前7个氨基酸能曝出来吗？

bamboopiggy

看HA抗体的都是用九个氨基酸的短肽去免疫动物获得的，你可以申请试用装试试，可能能曝出来。

3 回答359 围观

问DNAMAN进行多序列比对的时候结果怎么看呢？

bamboopiggy

应该看序列是不是都能对应上，对应不上的位置会有黑线

2 回答3552 围观

问flox/flox小鼠与KO小鼠有什么区别啊

bamboopiggy

flox/flox小鼠与特定的cre小鼠交配，就可以得到ko小鼠，分为全身的和tissue-specific的。

4 回答1577 围观

问Sw480细胞传代不贴壁

bamboopiggy

看你第三张图片，感觉是不是你用的培养皿是假货，导致细胞不贴壁，你要么加点促帖壁试剂试试，要么换个别的实验室的皿试试。

3 回答758 围观

问再次求助生信大佬|关于生信实验验证

bamboopiggy

是不是你们没有相应的组织啊？没有组织，怎么做验证？

2 回答475 围观

问测点熔点时，遇到加热过快怎么办？

Eason老歌迷

一般要求缓慢升温，仔细观察。升温速度过快，会导致测定值偏高。升温速度过慢有影响测定效率，延长测定时间。你可以在外面再套个管，管里装上升温慢的溶液。

5 回答1268 围观

问免疫荧光实验中间接标记会放大信号是什么原因？

bamboopiggy

间接检测方法通常有着更高水平的灵敏度，并产生更强烈的信号。信号经过间接方法放大，因为至少有两个标记的二抗与每个一抗结合。不过，二抗的使用需要额外的封闭步骤和对照。

4 回答1017 围观

问有养过EA.hy926的朋友嘛，养的状态不行求助

你好几和户

这个也不是很好养，记得用DMEM+10% FBS，最初传入瓶中的细胞不要过稀，会影响细胞状态的。

2 回答540 围观

问脑组织解剖结构

snow4848

脑干中脑小脑。脑端（及是大脑左右半球）延髓、脑桥

2 回答617 围观

问求助求助

Dr_劉医生

这个检索关键词查文章就行。小白先看中文了解概述，再去找英文。近年的学位论文方法学部分更细致，供参考：王志盛. 黄连素对耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌外排泵MexAB-OprM的作用研究[D].河南中医药大学,2020.DOI:10.27119/d.cnki.ghezc.2020.000050

2 回答197 围观

问【求助】MEK1/2的磷酸化位点

bamboopiggy

应该是不一样的，这两个位点都能查到对应的抗体，所以应该是不一样的。

3 回答889 围观

问钙成像的Area under the curve用Origin2018软件怎么分析呢？

红嘴小花猫

如果你要分析钙成像峰值大小体，可以使用函数来判断，取纵坐标数值。

3 回答584 围观

问请教：B16细胞的传代

dxy_l67kvfd7

消化后直接传代就可以，消化过头或者冻存才需要离心

4 回答340 围观

问求助免疫组化两种洗脱方法的效果？

snow4848

我们比较喜欢抗体洗脱的好，因为常用

3 回答546 围观

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