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问
miRNA与靶基因同时过表达,蛋白怎么变?
balalaLy
很少有人这么做的吧,一般都是miRNA和靶基因一正一反分别做。
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问
质粒构建相关问题
Eason老歌迷
无外乎2个关键点:1.载体和片段,载体在进行酶切时要切干净,做对照,单切一定要cip,不然切的好也是白搭;做连接转化时要做自连对照,看下转化子和自连的菌落数大概心里就有个概念连上没连上了;连接片段是酶切得来就可以直接连,把胶回收产物再跑个胶看看,有时候我觉得光测不是特别准,一般片段不会有特别大问题;2.连接体系,个人觉得一次连接那么费时间,可以适当拉开比例做几个连接,然后一起进行转化。
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问
细胞培养瓶出现白点是什么
Eason老歌迷
看你这个像是细胞污染,可能是真菌污染,建议你下次细胞培养一定要注意无菌操作,然后培养基要过滤。
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问
细胞污染
Eason老歌迷
你这个像是细胞传代时候细胞老化死亡的碎片,也可能是细胞污染,你可以用pbs洗洗看。
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问
代谢组问题咨询,谢谢各位老师
Eason老歌迷
同学你好,建议你用1/2ic50浓度处理细胞送代谢组。要看三氧化二砷最小的中毒血药浓度,你可以做一个细胞生长曲线图,或者是做一个MTC。
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问
做elisa的血清稀释液过夜之后还能使用吗
balalaLy
如果是试剂盒里的就按照说明书的建议,不过血清稀释液是可以用生理盐水替代都可以
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问
qPCR点样时需要冰上操作吗?
balalaLy
如果你加样快数量少加完就跑的话可以不用冰,但是时间久的话毕竟里面有酶会失活影响结果,冰上不会有冷凝水
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问
PVDF膜显影总是出现竖纹,可能是什么问题?
balalaLy
胶没有配好或者蛋白样品有杂质,样品从冰箱取出加样之前加热一下
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问
蛋白免疫印记实验结果不稳定,有什么优化方案
麻黄连翘赤小豆
上样量保持一致每次步骤一致用量抗体一致如果实验出现问题,每次更改的步骤必须记录,以便对比室温尽量一致
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问
层析纯化后的腺病毒接毒不病变
Eason老歌迷
你接种病毒病变时改变血清浓度没有,我们养细胞时血清是10%,而稀释接种病毒时血清浓度是2-3%。
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问
基因多态性实验,基因测序结果分析
Eason老歌迷
你可以用gwas,dnastar来分析。然后你的测序结果与参考序列进行比对,当然前提你是知道你的参考序列的突变位置,如果你的参考序列上是A,而测出来的结果是T,那就是一个突变型,还有可能就是杂合突变。
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问
用来提RNA的组织样本可以在-20放多久?
陈皮712
最好1周内用完,或者放到-80冰箱、液氮以便长期保存。如果只有-20冰箱,可以在组织中加入组织保存液(很多公司有生产,不是很贵)。
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问
氧糖剥夺求助
Eason老歌迷
你可以先参考这篇文献,“离体神经干细胞氧糖剥夺模型的建立及改变培养条件对神经干细胞的影响分析”。还有这一篇“ PC12 细胞中持续性氧糖剥夺模型的建立”,讲的都很详细。
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问
基因电路 求助
Eason老歌迷
这些箭头是表示如何连接顺序,还有复制转录。这都是在质粒上构建,然后再转到细菌里,你可以看到最后都是到右下角的细菌里
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问
一种色素的降解产物是否用于另一种色素的合成,除了同位素标记还有什么生理生化的方法呢?
Eason老歌迷
除了使用同位素标记,你还可以使用标签,把降解产物标上标签
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问
大家有用过无血清体系培养iPSC吗?效果怎么样?
Eason老歌迷
我用过,效果还OK。主要是无血清培养基不含血清,提高了实验的重复性、准确性和稳定性。避免了血清所带来的血源性污染等问题,减少血清未知成分对细胞的损伤。无血清培养基的成分和含量相对明确,能提高细胞产品的质量并有利于产物的分离提纯。
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805 围观
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问
原代心肌细胞里面为啥有类似血红蛋白的东西
Eason老歌迷
是不是你在提取原代心肌细胞的时候混进去了。也可能是它并不是血红蛋白,而是形态类似。
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问
96孔板接种C2C12细胞
Eason老歌迷
96孔板的话,贴壁细胞的最小接种量至少为1,000 个/孔 (100 μl 培养基)。
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问
qPCR熔解曲线乱,有主峰,但有杂峰,80°C以下90°C以上都有,为什么
爱吃水稻的小呆瓜
建议定量引物先跑一趟琼脂糖电泳看一下条带,如果条带单一明亮,再去跑定量。如果还有很多峰,可能是引物二聚体,建议更换引物试试
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问
qpcr溶解曲线双峰
爱吃水稻的小呆瓜
可能原因有以下几点:1.样品有gDNA污染2.引物不够特异3.引物二聚体建议先跑琼脂糖电泳,看条带亮度和是否单一,之后再跑定量
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