实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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问求助｜如何通过ensembl代码如何查找相应的lncRNA

bamboopiggy

如果技术说他们数据库里没有，估计就是还没有命名的，你就是查也查不到，还不如看看那些有名字的，你有没有能用的。

1 回答309 围观

问EdU的使用

Eason老歌迷

你要是检测核酸产物，建议你还是用qpcr，或者是做电泳。edu是染细胞增殖的。

3 回答539 围观

问脾脏结肠样本流式分析tregth17

Eason老歌迷

最好是别这样!因为流式细胞分析要求细胞分散、单个，活性好，这样才能区分死亡、凋亡和活性细胞。组织在冻存、复温的过程中会有大量的细胞死亡，同时经过这一过程的组织在分离成单个细胞的时候会形成许多细胞碎片，不宜上流式检测了，所以用于流式检测的标本最好是新鲜标本，即取材后立即检测，效果最好。我以前也试图将组织存入-80℃，然后进行流式检测，结果发现后来处理的组织细胞不是粘团就是破碎，根本无法检测。如果你实

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问免疫荧光固定的问题？

Eason老歌迷

如果干了，是需要补加的，因为步骤就是把它放冷丙酮里固定10分钟。

4 回答413 围观

问WB条带很脏，牛奶封闭，洗膜10min×3次，请问怎么解决这个问题？

bamboopiggy

内参都这样子，你有没有考虑你的抗体坏掉了，换新的抗体吧。

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问293T细胞总是出现很多细丝状的不明生物会动!加倍抗生素换血清都试过了都没用求助求助!

balalaLy

这个可能是支原体污染，用抗支药可以缓解，但是需要时间，不如直接换一支细胞。

4 回答1123 围观

问小鼠脾脏、淋巴结和全血在液氮冷冻，-80冻存后还可以做流式吗？

丁香一方

可以做，冷冻需要加保护剂。切解冻迅速。避免细胞液出现冰晶，刺破细胞！

3 回答6875 围观

问求助！这些台盼蓝染色后，一个一个的圈是细胞么？活的么？

bamboopiggy

是细胞，台盼蓝是染死细胞的，你可以看到细胞计数板的条条，基本上上面的小圈圈就是细胞了。

3 回答616 围观

问请问DAP（二氨基庚二酸）缺陷型菌株保菌过程有大佬赐教嘛？

Eason老歌迷

3 回答1317 围观

问培养皿培养的细胞，想做成细胞蜡块，有没有好的方法，需要多少量的细胞

balalaLy

细胞肯定是越多越好，至少要7次方

2 回答511 围观

问有人用间接竞争法做过化学发光酶免疫分析吗?

精准检验每一天

最主要的是要清洗干净，每一步都做好冲洗，才能保证结果的正确性！

3 回答316 围观

问求助！求教！药物计算！

bamboopiggy

《药理实验方法学》附录中有一个表，列出了人和动物间按体表面积折算的等效剂量比值。你可以直接按照这个表换算就可以了人的临床剂量为　X mg/kg 换算成小鼠小鼠的剂量＝X mg/kg×70kg×0.0026/20g＝X mg/kg×70kg×0.0026/0.02kg＝ 9.1X mg/kg.

3 回答466 围观

问请问这个HE染心脏怎么看？

bamboopiggy

看心脏横切面的大小，心肌壁的厚度，以及心腔的大小，然后天狼星红染的是纤维化。

2 回答3945 围观

问CDX-Hep3B，有人做过吗？

bamboopiggy

hep3B是肝癌细胞系，可能这个细胞系促血管生成，所以成的瘤都是血，你需要换个细胞系做了。

1 回答256 围观

问关于毒理学实验每组小鼠的数量的设置问题

bamboopiggy

是太少，一般要求每组最少要五只。

1 回答711 围观

问生信分析中logfc阈值能小于吗？

bamboopiggy

生信中的logFC看你自己的实验目的，可以设置小于1 但是估计会滤掉好些信息

3 回答2873 围观

问怎么验证一个信号通路

bamboopiggy

nfkb 必须要检测p65，IKKa，IKKb，IKBa 还有p50，别的你选着做。

4 回答815 围观

问怎样包毛囊才能更好的切到毛囊的纵切？有什么切组织和包埋的技巧吗？

Dr_劉医生

建议用冰冻切片优先，切片前最好先用蔗糖溶液浸泡，以防止冰晶的产生，而且降温的速度宜快，能使标本的温度与低温箱的温度相同(标本温度过热切片组织易被挤压，组织结构重叠；温度太低时，切片组织易脆裂)。此外，切片时先将样品台上的OCT修出平台，放置毛囊时应注意使毛囊球部朝向刀口，这样才有利于获得纵剖面。速度不能过快，不然容易厚度不均匀，而且毛干和组织鞘分离，破坏结构。

3 回答945 围观

问跑流式如何避免各通道之间的串色，防止串色的规则是什么

bamboopiggy

有的公司给了一张大海报，上面包括了所有抗体和颜色，你避免选择相近的就可以。

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问为什么IHC中用过氧化氢可以失活内源性过氧化氢酶

冷泉港蛋白

1.过量的过氧化氢3%，会氧化酶活中心具有还原性侧链的氨基酸，有半胱氨酸天冬酰胺，还有一个，这样就无法形成中间态了。酶就失活了。而且是不可逆的，形成了共价键。2.DAB显色也用过氧化氢啊？其浓度是0.03%，一百倍的差别。当然也会修饰还原性侧链，概率比较低了。3.3%的过氧化氢会修饰过氧化氢酶，当然也会修饰所要检测的抗原，这种修饰对氨基酸侧链的改变比较小；修饰的还原性侧链不一定是抗体所对的表位。

3 回答1571 围观

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