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急救,投了一个杂志,初审被退回修改,现在又被退回修改,这次不行就直接退稿了,
Eason老歌迷
直接在文件里修改,然后修改的地方一定要做个标记。
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问
miRNA与靶基因同时过表达,蛋白怎么变?
balalaLy
很少有人这么做的吧,一般都是miRNA和靶基因一正一反分别做。
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问
质粒构建相关问题
Eason老歌迷
无外乎2个关键点:1.载体和片段,载体在进行酶切时要切干净,做对照,单切一定要cip,不然切的好也是白搭;做连接转化时要做自连对照,看下转化子和自连的菌落数大概心里就有个概念连上没连上了;连接片段是酶切得来就可以直接连,把胶回收产物再跑个胶看看,有时候我觉得光测不是特别准,一般片段不会有特别大问题;2.连接体系,个人觉得一次连接那么费时间,可以适当拉开比例做几个连接,然后一起进行转化。
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问
细胞培养瓶出现白点是什么
Eason老歌迷
看你这个像是细胞污染,可能是真菌污染,建议你下次细胞培养一定要注意无菌操作,然后培养基要过滤。
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问
细胞污染
Eason老歌迷
你这个像是细胞传代时候细胞老化死亡的碎片,也可能是细胞污染,你可以用pbs洗洗看。
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问
代谢组问题咨询,谢谢各位老师
Eason老歌迷
同学你好,建议你用1/2ic50浓度处理细胞送代谢组。要看三氧化二砷最小的中毒血药浓度,你可以做一个细胞生长曲线图,或者是做一个MTC。
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问
做elisa的血清稀释液过夜之后还能使用吗
balalaLy
如果是试剂盒里的就按照说明书的建议,不过血清稀释液是可以用生理盐水替代都可以
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问
qPCR点样时需要冰上操作吗?
balalaLy
如果你加样快数量少加完就跑的话可以不用冰,但是时间久的话毕竟里面有酶会失活影响结果,冰上不会有冷凝水
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问
PVDF膜显影总是出现竖纹,可能是什么问题?
balalaLy
胶没有配好或者蛋白样品有杂质,样品从冰箱取出加样之前加热一下
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问
这个生存曲线算是相交吗?结果有意义吗?求助各位大佬
Eason老歌迷
算是相交了。如果你看有没有意义,我建议你看p值,如果小于0.05就挺好
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问
科研论文写作
Eason老歌迷
目前查询某一疾病在全球不同国家或区域的发病率,是不是只能通过一些指南来慢慢搜索查询。近期流行病学数据因为更新可能没有那么快,文献查找比较困难。推荐可以试试who.int/research/en/看看,里面的data and statistics有部分常见疾病近期的发病率
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问
基因多态性实验,基因测序结果分析
Eason老歌迷
你可以用gwas,dnastar来分析。然后你的测序结果与参考序列进行比对,当然前提你是知道你的参考序列的突变位置,如果你的参考序列上是A,而测出来的结果是T,那就是一个突变型,还有可能就是杂合突变。
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问
氧糖剥夺求助
Eason老歌迷
你可以先参考这篇文献,“离体神经干细胞氧糖剥夺模型的建立及改变培养条件对神经干细胞的影响分析”。还有这一篇“ PC12 细胞中持续性氧糖剥夺模型的建立”,讲的都很详细。
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问
基因电路 求助
Eason老歌迷
这些箭头是表示如何连接顺序,还有复制转录。这都是在质粒上构建,然后再转到细菌里,你可以看到最后都是到右下角的细菌里
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问
一种色素的降解产物是否用于另一种色素的合成,除了同位素标记还有什么生理生化的方法呢?
Eason老歌迷
除了使用同位素标记,你还可以使用标签,把降解产物标上标签
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问
肿瘤中sh基因干涉,顺转能干涉下去但是稳转之后没有效果怎么办
Eason老歌迷
如果顺转可以干涉下去,说明还是有作用的,你可以换一种转染试剂,我们实验室之前换了转染试剂,Knockdown效率一下子提高到95%以上。
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问
大家有用过无血清体系培养iPSC吗?效果怎么样?
Eason老歌迷
我用过,效果还OK。主要是无血清培养基不含血清,提高了实验的重复性、准确性和稳定性。避免了血清所带来的血源性污染等问题,减少血清未知成分对细胞的损伤。无血清培养基的成分和含量相对明确,能提高细胞产品的质量并有利于产物的分离提纯。
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问
CTAB法提取真菌DNA,两次跑胶结果如图,请问是什么原因?
Eason老歌迷
感觉你提的不太好。一个是水浴的时候要注意摇晃,10min一次,很关键。还有加氯仿异戊醇后要充分混匀,一般在振荡器上晃30min。你用的异丙醇要提前放在-20的冰箱里。实验中每步都要剪枪头,以免弄断DNA。
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问
原代心肌细胞里面为啥有类似血红蛋白的东西
Eason老歌迷
是不是你在提取原代心肌细胞的时候混进去了。也可能是它并不是血红蛋白,而是形态类似。
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问
96孔板接种C2C12细胞
Eason老歌迷
96孔板的话,贴壁细胞的最小接种量至少为1,000 个/孔 (100 μl 培养基)。
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