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荧光定量PCR检测LC3-I/II
balalaLy
LC3B相当于LC3-11,一般是检测LC3B的rna水平
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问
pDONR221质粒酶切不完全求助
Eason老歌迷
可能是你的酶切时间有些长,因为定性试验,产物的量不甚准确,建议将酶的量做一个梯度,但不是将酶浓度稀释。或者是镁离子浓度可能有些不适合,建议做一下调整。
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问
各位大佬,请问这个是胰岛细胞吗以及为什么DTZ染色那么浅?
Eason老歌迷
应该是是胰岛细胞。可能是你的细胞数量不够啊,你的dtz是用dmso配的啊,那你可以用dtz溶于无水乙醇试试染色效果怎么样。
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问
关于负向链启动子构建质粒的问题
Dr_劉医生
当然需要,你用的是反向互补链,而且你启动子选的也是对,一般都是上游+2000bp;双荧光素酶就是得把靶基因插在目的基因前面,然后转录基因才会激活启动子,从而表达荧光素酶基因;
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问
In-fusion反应液可以直接PCR验证吗
Eason老歌迷
可以!你要是p不出来,可以加点Cloning Enhancer,消除了PCR反应液中引物二聚体和dNTP等的影响试一试,我是可以p出来的。
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问
有的rct报道的不是均值,而是最小二乘均值,meta时如何合并
Eason老歌迷
有很多种处理方法,比如Cochrane 手册推荐的将数据利用公式合并计算出这三组的一起的均值和标准差,但这只是估计,与真实值肯定有所差别(第一种)。最好的方法是与通讯作者联系看能否请求到数据。这个得看运气有些可能会给,但大部分或者绝大部分都是不会给出的(第二种)。还有一种方法是舍去其中的两个治疗组,比如只保留剂量最大或者剂量最小的组,这不好的地方是最少有三个方面分别是1.存在选择偏倚(可以做个敏感
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问
变化率的多个协变量的协方差分析怎么做呀?
Eason老歌迷
1、点击模型——全模型2、选择好对应的变量3、点击选项,进行设置4、最后确定就可以了,第一步和第二步除了在模型进行不同的设置外,其他进行同样的步骤
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问
知道中位生存时间与生存时间上下限及人数如何计算95CI
Eason老歌迷
如果知道生存时间和人数,可以利用Greenwood公式进行计算,经proc lifetest过程获取各时间点的生存率及标准误,生存率和标准误对应的变量为Survival和StdErr,计算公式为: Survival **exp(±1.9undefined(StdErr/(Survivaundefinedlog(Survival)))) 其中log(Survival)为以e为底的自然对数函数。
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回归分析求助
Eason老歌迷
初发HfH与初发房颤发生率及%VP的关系用Cox比例风险模型进行评估,以事件的时间作为因变量,并以%VP作为时间
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烟草脆裂病毒TRV VIGS求助
Eason老歌迷
感觉是不是你的注射浓度量有点大?刺激到了叶片
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同源重组的引物退火温度该如何计算
Eason老歌迷
退火温度=4×(G+C)+2×(A+T)-(5~知8) 只是粗算,有时不灵,但比道较简便。或者用primer5(or oligo6)计算,引物配对好后,primer5可以显示Tm,我认为这个值就是退火温度,我的经验再加2 or 3度最好。你的合成引物的单回子上也有个Tm,减去5~8也可。
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问
转录因子结合位点具体包括?
Eason老歌迷
不是啊,结合位点有很多,你可以用软件去预测。打开网址:https://jaspar.genereg.net/,在搜索框里输入转录因子NFAT,点击Search。选择一个或多个ID文件,在SCAN序列框中输入FASTA格式文件,得到27条转录因子NFAT与IL17A的结合位点,Strand -没有特殊意义,选择Strand +即可。JASPAR数据库检索出的结合位点来源于已发表的ChIP实验等,主要
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脐静脉内皮细胞 淋巴管内皮细胞
Eason老歌迷
因为淋巴管它不能繁殖。而脐静脉内皮细胞是一种干细胞,能无限次传代,易于实验操作。
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悬浮细胞培养
whilt-shirt
是不是离心的温度高了,一般都是选择4℃离心
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问
轴突测量
balalaLy
可以的,奥林巴斯的显微镜有自带的测量标尺,
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胰腺HE染色
Eason老歌迷
看着像是胰岛,你可以再做几次染色看看。
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实验求助
Eason老歌迷
你可以加碱,这样可以增加中链脂肪酸的水溶性。
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HKC不好养
Eason老歌迷
你是不是细胞传代的时机不对,导致细胞老化死亡,或者是你的消化时间太长了。
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药物干预细胞能否说直接就是模仿某种疾病
balalaLy
打个比方说我做衰老,用过氧化氢处理细胞模拟衰老模型,用细胞模型做各种表型、功能、分子调控,在这个基础上再用衰老的动物模型进一步验证。这是不同水平的实验,细胞水平是最简单的,动物实验做得好,文章可以上一个台阶。
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问
免疫组化,蜡块出现组织收缩凹陷,怎么解决呢?
Eason老歌迷
一个是梯度酒精脱水尽量彻底充分。二是二甲苯透明时间不宜长,1~3h为佳,透明过度会导致组织发硬发脆。三个是浸蜡应选择低熔点的石蜡,浸蜡应充分。
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