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SDS PAGE电泳时,蛋白样本含有高盐成分会对电泳产生什么影响?
申东熙老伯
高盐会对条带有影响,拖尾或者条带两边宽中间空心。如果是盐浓度过高的话,电泳的时候可以先用10V电压跑十五分钟,让样品里的盐分离开,然后再80V跑。
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gapdh位置到40了
balalaLy
应该是正常的,36跟40的位置很接近了,而且你的条带很粗,看着就像到40了
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问
反转录试剂盒放于室温一天
bamboopiggy
不建议用了,但是你如果不舍得,可以先做个预实验试试,测一个关键基因,加一个内参基因。
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问
细胞传代 消毒剂
麻黄连翘赤小豆
你要是怕酒精损伤细胞就少喷点,在超净台外挥发一会再放进培养箱
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问
细胞培养过程中培养基上层出现丝状和圆形不明物体
bamboopiggy
是污染了,你最好不要用这株细胞了,重新复苏吧。
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细胞状态不好
申东熙老伯
细胞碎片和细胞渣渣可能是传代时候消化时间太久消化过度,缩短消化时间试试。
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问
求助求助,盖玻片太厚会导致在共聚焦显微镜下找不到细胞吗
bamboopiggy
盖玻片没有那么厚,一般都是可以的,你是不是把细胞弄错面了?
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问
冰冻切片
balalaLy
切的时候组织块温度太低太硬就会出现这种情况,或者是刀片用久了不够锋利
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问
求助IPP分析免疫组化图片问题
Dr_劉医生
一般累积光密度IOD(SUM)或者平均光密度Density (mean)/面积area
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问
求经验分享
Dr_劉医生
密度梯度离心其实照着试剂盒操作即可,也不复杂;以下是配制和使用方法:Percoll的原液(未稀释)必须先加入高盐溶液或者高浓度蔗糖溶液,目的是维持最终所得密度介质的生理盐浓度。最快捷简单的方法:一步法直接稀释Percoll。无菌条件下,在离心管中加入1/10总体积的1.5M NaCl或者2.5M的蔗糖溶液(例如制备100mL工作液,则需要加入10mL的高渗溶液,分离细胞时选择NaCl较多,而分离亚
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问
WB AKT
麻黄连翘赤小豆
Akt和磷酸化的都有亚型,你要看说明书上的蛋白能显影几个亚型,有个两个有的三个,一般不会只跑出一个条带的
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问
293T细胞养着养着细胞容易变圆变细长,并且生长速变慢怎样解决
麻黄连翘赤小豆
多给一些营养,比如血清看看能不能长挑选适合的培养基加一些生长因子
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移液器加样问题,怎么样比较准确
bamboopiggy
其实都可以,就是你要给自己养成一个习惯,类似的操作,都要用类似的方法,如果你210 都用1ml的枪加,或者是105加两次,都可以,看你习惯。但是不建议换枪加
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问
pcr实验加样走位问题
麻黄连翘赤小豆
加样看你怎么安排的样本,有几个样本,准备多少复孔合适,没有固定的走位,横着竖着都行,加准就行
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问
PCR八连管可以用记号笔做记号吗
麻黄连翘赤小豆
八连管本来就有标记,避免荧光问题,你可以拍照,或者画图在记录本上进行标记
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问
求助 为什么我的空载质粒涂平板完长出来的菌挑出来去摇床,菌液不混浊,然后再重新涂平板都长不出菌呀(我是取15微升的菌液去涂)
bamboopiggy
最大的可能是你弄错抗生素了。或者是你的平板有问题,长出来的是杂菌。
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免疫组化,热抗原修复操作时容易脱片,什么原因?
balalaLy
抗原修复缓冲液ph不合适也容易脱片
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问
LPS诱导细胞炎症相关信号通路
bamboopiggy
lps诱导炎症,就必然和一些经典的通路有关系。至于抑制剂,有得公司有mapk抑制剂得library,或者你可以看看FHPI,或TAK-715,都是p38的抑制剂
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问
扩增曲线没有到达平台期可以么,会影响分析么,需要一定有平台期么?
凌晨三点Dxy
起始模板浓度太低,或循环数不够,当然循环数一般参照说明书不会有大问题,而且循环数多了会增加非特异性扩增
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问
核酸扩增出现不规则曲线是什么原因?
师医生说
从人,机,料,法,环找下原因:操作流程是否正确,加样孔有无异常,加样中有无气泡干扰,电压是否稳定。该批次重新实验。
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