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        western膜的保存 strip心得 显多个蛋白

        相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

        user-title

        三更QWEX

        最近尝试发现western的条带可以strip两次,显三种不同的蛋白,共过夜了四天。(day1一抗过夜,day2二抗显影当天strip再孵一抗过夜,day3重复显影+strip)前两次效果很好,第三次膜显影就有点背景了,没有继续尝试再显。

        用了碧云天的一二抗去除液

        问题:现在显一次影后需要出远门五天回来继续显其他蛋白,有人说tbst放1-2天可以,时间长了要晾干后保鲜膜-20保存。

        Q1:5天时间不知道哪种保存更好?

        Q2: 上过抗体不要晾干保存是指应该先strip再晾干保存吗?

        还是 没有孵过抗体才能这样保存膜。

        图文无关 跑胶图

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        3 个回答

        user-title

        whilt-shirt

        有帮助

        可以放5%的TBST里泡几天后重新敷抗体

        user-title

        balalaLy

        有帮助

        我自己的习惯是保存在tbst里边,一个星期内是可以的,我课题组有个博后是把条带放吸水纸上弄干然后用保鲜膜封起来,说是以后需要补实验的话可以再拿来用,她博士阶段经常这样做,是可行的

        user-title

        三更QWEXuser-title

        保鲜膜封起来以后常温保存就可以吗?是可以常温放多个月?

        user-title

        麻黄连翘赤小豆

        有帮助
        1. 放TBST保存就行,不让膜干掉,回来再敷一抗
        2. 没听说过要晾干-20度保存这种方式,一般膜不干就可以敷一二抗曝光,曝光效果还是要看蛋白浓度
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