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求助 我插入的目的片段是1000多的,但是PCR完跑胶条带位置在800-1000左右,而且感觉拖带严重,这是为什么呀
Eason老歌迷
如果你插入的是1000多,但是pcr跑完是800-1000,可能是发生了dna断裂或者是你酶切的不对。而你的电泳缓冲液浓度过高,或者跑胶的电压过大都会导致拖尾现象。
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问
求问大家,这种分子分型的指纹图谱聚类分析图是怎么做出来的 尤其是右边分子量的图,求问。
Eason老歌迷
你可以把文件导入graphpad prism软件进行绘图,或者是networkanalyst在线分析。这种相关性的聚类分析都是一样的操作,analyze下面找到cluster analysis即可。然后要看你做指标还是变量聚类了,也就是R或者Q型。右边的分子量可以添加即可。
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问
非药物临床试验
Eason老歌迷
非药物的临床实验分组还是依靠一些指南里给出的疾病分期来分组的。比如说癌症分期就是是根据癌症发生的程度将癌症分为几个不同的时期。医生会借助X光、实验检查、CT扫描、核磁共振、活组织检查等手段来看癌症发展到了哪一时期,需要考虑的因素包括:肿瘤在身体什么部位,有多大,是否转移,癌细胞类型和异常程度。常见的分期有TNM分期,数字分期就是你说的stage,扩散位置分期。就拿你说stage来说(癌症零期(St
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问
质谱数据处理
Eason老歌迷
如果三组蛋白表达基因的丰度不一样,你肯定是要处理好数据,把丰度差距过大的舍弃。
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问
股骨测定方法求教
Eason老歌迷
打开Image ,点击 Adjust ,点击 Threshold,调节Hue(色度)、Saturation(饱和度)与Brightness(亮度)选中股骨染色,计算其面积。该方法需要手动调节HSB阈值。
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问
BMC cancer投稿求助
Eason老歌迷
没有投过综述,但是投过实验类论文。一般是投稿后审稿3-4月给出回复。
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问
回复编辑/审稿人求助
Eason老歌迷
主要是想让你讨论与被评估疾病相关的体内效应大小。被评估的化合物的效果是否与临床相关?在你使用的实验模型中,临床使用的药物的效果有多大?请查阅文献,讨论这一点
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问
【求助】请教电泳时加样误加到内槽里会不会有影响
Eason老歌迷
对你的其他条带没有啥影响,但是你这个加样孔的结果就不准确了啊,因为要控制每个孔加样体积要一致。
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用AkTA仪器纯化带his标签的蛋白,到洗脱这步仪器起峰了,但是风不好看,这是因为什么
Eason老歌迷
确实是有峰,但是这个封有点奇怪。可能是你纯化没做好,建议你优化一下纯化步骤。
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【求助】pbmc细胞形态
Eason老歌迷
小圆形的是淋巴细胞。稍大一点的是单核。形状不规则的细胞有点像巨噬。第二张图里成簇的是扩增的单核。
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问
H9C2建心肌损伤模型!
Eason老歌迷
有几篇文献,你可以参考一下,讲的很详细。“Irisin对高糖诱导的糖尿病心肌肥大H9c2细胞模型的作用及机制研究”、”血管紧张素Ⅱ诱导H9c2心肌细胞肥大模型的建立及泛素化结蛋白水平的变化 ”、“蛋白质二硫键异构酶在H9c2心肌细胞高糖及缺氧/复氧损伤保护的作用机制研究”
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问
3T3-L1 细胞诱导分化
Eason老歌迷
你要是做3t3l1细胞诱导分化的话,传代时铺板需均匀,不然会导致分化不均匀,分化比例低。从添加诱导剂开始到分化结束,通常需要8天。一般第6天脂滴就出来了,剩下2天就是脂滴积聚的过程。分化效果好的话,第4天脂滴就出来了。3T3-L1细胞添加诱导剂时,手法要特别轻,尽量用枪头贴壁逐滴加入,让液体慢慢流下,这样对细胞的冲击最小,否则极容易造成细胞卷边飘起。细胞代数越多,成脂能力越弱,需要诱导的时间也就越
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问
老鼠怀孕
Eason老歌迷
如果有精子表明有交配行为发生,有阴栓说明雌鼠受到性行为刺激。但是你这个阴道涂片没有精子,可能压根没有发生性行为。一个是老鼠的年龄很重要,要选精壮的。二个是营养对于生育也很重要,雌、雄鼠最好能用繁殖鼠粮饲喂,没条件的可适当喂些熟鸡蛋、生瓜子之类的东西。要提高成功率,最好先确定雌鼠的动情周期,方法园子里有介绍。待发情期将雌雄合笼,这样受孕成功率高。其实还可以雌雄1:1合笼,或是前半夜一只雄鼠,后半夜换
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问
用4-OHT进行体外敲除
Eason老歌迷
我推荐你参看几篇文献,讲的比较全面“4-羟基他莫昔芬对体外培养前列腺平滑肌细胞的作用”、“The Hippo kinases LATS1 and 2 control human breast cell fate via crosstalk withERa”。文章方法里都讲了如何利用4-oht来做体外敲除的
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求助去除肝组织代谢提取物中的甲醇
丁香一方
1.通过蒸馏,将甲醇提取,必要时调整气压蒸馏。2.归根结底是要冻干粉末,可以加入溶液稀释甲醇浓度,调节冰点。3.通过调整气压,来调节肝组织代谢提取物的冰点。
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PCR 琼脂糖凝胶电泳 基因鼠鉴定
Eason老歌迷
胶上有很多划痕?有照片吗?感觉对实验结果影响不大,应该没事。
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信号通路相关(细胞)
Gx41
根据相关文献确定TGF处理细胞最佳时间,处理相应时间后提取蛋白检测你的目标蛋白。
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反向链启动子的萤光素酶质粒构建问题
灵枢天问
启动子肯定要放在上游,只有这样才能一起表达荧光和你的目的基因,目的基因也需要配对反向处理再酶切连接进去
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求问一下大佬,养的293t不贴壁是为啥
dxyc42u
培养皿不合适、培养基不合适(比如没有血清,或者血清错误)等,都可能出现这种情况。
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涂菌12小时后,细菌成一片,原因为何
慈悲为怀医德为镜
有可能是浓度太高了,建议稀释一下试试
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