求助WB出现污渍

有可能是膜污染了，转膜时注意带好手套

原因分析 膜上其他部位与一抗或二抗非特异性结合，配置的封闭液可能没有完全溶解，使不容颗粒附着在膜上从而导致发光时候膜上形成黑点。 抗体与封闭试剂反应。 HRP偶联二抗中有聚集体。 解决方法: 配置封闭液后最好静止一下，封闭牛奶一定要纯，封闭结束之前要清洗三遍之后再加一抗。 使用前过滤封闭试剂。 过滤二抗试剂，去除聚集体。

封闭液没有溶解好或者转膜后用到的各种buffer不干净都会出现这种情况