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        请问大家做免疫荧光是怎么调焦距的啊 以DAPI的为准吗(LSM800)

        相关实验:细胞免疫荧光

        user-title

        keyijfd

        请问大家做免疫荧光是怎么调焦距的啊 以DAPI的为准吗(LSM800)

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        4 个回答

        user-title

        bocardio5927

        有帮助

        习惯目镜下DAPI先找到细胞(核),低倍镜下找到阳性表达区域,固定标本位置,放大倍数dapi定位,转到目标荧光通道,微调,merge后图片没有重影为宜,动作要快。

        user-title

        keyijfduser-title

        请问一下怎么判断merge有没有重影呀~

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        先找到dapi,然后再微调。镜下和屏幕上看到的还是有点差异的

        user-title

        balalaLy

        有帮助

        一般都是看dapi找到细胞调焦距,因为dapi比较明显且稳定,其它荧光照射久了会萃灭,影响定量分析

        user-title

        whilt-shirt

        有帮助

        每个波长的焦距不太一样,先调好DAPI,其他波长然后根据DAPI稍微调整

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