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问
双荧光素酶报告基因实验为什么萤火虫荧光素酶能比海肾素荧光素酶低吗发光信号?
土井挞克树
加量以及荧光保存是否有差别,避光了吗。
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问
蛋白跑出两条带后,统计以哪条为主
bamboopiggy
你别只看条带哪个亮,你要看哪个条带能反应出你实验的差异。就用哪个
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问
提取鼠尾腱胶原蛋白,使用4M的氯化钠进行盐析,一直没有蛋白质析出是什么原因?酸溶过程中出现凝胶状态
土井挞克树
水浴的稳定状态有利于析出蛋白质。
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问
有人研究免疫共沉淀实验吗?rip,pull down实验。
土井挞克树
rna裂解和wb的试剂盒选好一些,对实验很关键。
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问
C57小鼠和昆明小鼠哪个实验比较好呢?
Dr_劉医生
还是建议用C57BL的品系,尤其在你后续可能要做基因动物的时候,毕竟是Jackson实验室。基因差异主要在于一些对比公共数据库编码序列的差异:pde6bcds区(nm_ 008806)相比较存在如下不同;昆明小鼠706位碱基为a,而数据库中序列nm_ 008806第1149位碱基前后者为c。
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问
流式细胞仪细胞凋亡试验,全是活细胞
balalaLy
就算是不处理的细胞也不会全是活细胞,可能是你的染色过程或者检测过程有问题,阳性对照有没有做好?
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问
L-O2形态正常吗?
bamboopiggy
现在公认的这个细胞被Hela细胞污染了,你如果刚开始做建议放弃这个细胞,并且这个细胞应该是成片长的,感觉你的细胞周边有点缩。
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问
实验中,小鼠怎么称重?
灵枢天问
动物房会有体重仪啊,清零直接放上去就可以了,它不会跑的,如果是实验室那就自己搞个小盒子再放小鼠
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问
MDA细胞,细胞边界不明显(拍不出来这种效果),内部颗粒状,平时不影响细胞生长,但是冻存后再复苏活力就很不好,请问这是怎么回事?
养点鱼吃火锅
可能是冻存的有问题,MDA一般复苏后状态都还行,试试再传几代,或者换一批细胞冻存。
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问
半干转转不过marker在胶上
yanlai000
半干转并不是完全干转,电泳液合不合适,胶和膜有没有干,电压/电流是否合适,时间是否太短,一项一项排查
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问
WB实验所有蛋白要跑在一张膜嘛?
土井挞克树
你可以跑在一张上,但是你的蛋白跑在一张上不好区分,建议分开跑。
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问
关于验证NF-kappaB通路的p65和p-p65
bamboopiggy
这个公司的p-p65主带的位置大概在70kd左右,你切膜往上一点
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问
T载体如何构建?直接买试剂盒好不好?怎么操作?可以连4K以上的基因吗?
Dr_劉医生
4K的片段太大了,建议找公司外包帮你构建载体,不然失败风险太高,而且很费时,耽误实验进度
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问
PASS计算样本量
此用户已注销
依次选择【Procedures】→【Proportions】→【Two Independent Proportions】→【Test (Inequality)】→【Tests for Two Proportions】菜单,打开Tests for Two Proportions对话框-Design选项卡,单击【Calculate】按钮,得到主要结果。
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问
Elisa问题
bamboopiggy
取决于你的实验目的,你想看蛋白(酶)的表达还是活性。
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问
两个月后做wb,细胞裂解测浓度加上样缓冲液煮沸保存还是裂解液直接-80℃保存?
锦鲤正在进行时
煮沸之后吧,裂解液的话一周还可以,时间久了蛋白会降解的,wb显影的时候就信号弱或没信号了
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问
在SNP分型中
Dr_劉医生
两个都可以用,都是常用的内参基因,用PCR扩增,做WB什么的都没有任何问题。RNaseP当然更经典,算是最早的管家基因;内参基因B-Actin做蛋白更好
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问
mlst分型相关
Dr_劉医生
可能是你metG基因拼接重组的问题吧,按理用most 扩增分型的话,正反向测序结果应该是一致的。
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问
请问L929用来养原代巨噬细胞可行嘛 效果可以嘛 之前都是用MCSF 求问大佬们
今晚月色真美_
可以,但有可能不是很稳定,需要多观察,建议问一下前辈
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问
单基因泛癌分析TIMER和GEPIA数据库结果不一致
yanlai000
不同数据库使用的测序数据来源不同,不一致很正常,建议用同一个数据库的结果,有条件自己qPCR验证,这样结果才可靠
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