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        两个月后做wb,细胞裂解测浓度加上样缓冲液煮沸保存还是裂解液直接-80℃保存?

        相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

        user-title

        dxy_a2dggj4w

        细胞房预约时间要到了,下个月就不能做啦,但是11月才有时间测wb,这个月制的细胞该怎么保存才好?保存期间蛋白会不会再被酶解,这样加上样缓冲液煮,用的时候就不能再测蛋白浓度了,按这个月的数据上样可能会不准。我更偏向直接保存裂解液,做的时候再测蛋白浓度

        wx-share
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        4 个回答

        user-title

        锦鲤正在进行时

        有帮助

        煮沸之后吧,裂解液的话一周还可以,时间久了蛋白会降解的,wb显影的时候就信号弱或没信号了

        user-title

        bamboopiggy

        有帮助

        建议你将细胞裂解液测完浓度以后分装,一部分直接加上样的buffer ,煮了保存,一部分,直接-80冻存。

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        推荐直接保存,煮沸后,物质理化性质不稳定,容易影响。

        user-title

        dxy_a2dggj4wuser-title

        直接保存是指把细胞刮下来,pbs洗了后,离心,-80保存沉淀嘛?

        user-title

        balalaLy

        有帮助

        当然是煮沸变性之后保存,只裂解后那些蛋白酶抑制剂会失效,蛋白会降解。

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