实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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细胞

问L谷氨酰胺在细胞培养时会发生降解吗？如果会发生那么降解率是多少？

土井挞克树

一般很少发生降解的，与你培养的细胞相关，如果细胞会分解的话就会降解

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问细胞层面研究目的基因作用后，大家怎么进一步开始研究通路，又有创新性？通过文献？打质谱？从数据库找？

土井挞克树

细胞层面后就研究分子，研究磷酸化，可以为通路提供思路。

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问样本量如何计算

土井挞克树

100例够了，这个主要看你的变量数。

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问求助，想要查询miR-133在那些组织特异性表达去哪里查询呢

土井挞克树

这个可以去ncbi或者基因网站去查询

3 回答294 围观

问血细胞脂质组学求助!

loveliufudan

对于脂质组学分析，使用枸橼酸钠抗凝管收集血样并取下红细胞层冻存后可以进行分析。这种方法常用于大规模的样本收集和处理，以便后续的高通量分析。对于血小板分析，通常需要额外的处理步骤。您可以使用上层的血浆进行离心和MTB处理，然后冻存血浆，或者选择裂解血小板后冻存血小板裂解液进行后续分析。是否需要裂解血小板取决于您的分析方法。一些分析方法可能需要血小板的完整性，而另一些则可能需要血小板的裂解产物。因此，

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问凋亡细胞用凋亡抗体染色无结果

loveliufudan

这个问题涉及到细胞凋亡的分子机制和免疫荧光染色的原理。首先，293T细胞通过使用星形孢菌素诱导凋亡，可能会导致细胞发生细胞膜破裂和细胞质漏出等问题，从而影响免疫荧光染色的结果。因此，您需要确保样本处理和固定过程的质量以及使用适当的抗体和探针。其次，caspase3和PARP1是与凋亡过程密切相关的分子，但是这些蛋白质的表达和分布可能会受到多种因素的影响，例如细胞类型、处理时间、细胞状态等。因此，您

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问悬浮细胞提取蛋白质加多少裂解液？

huarenqiang5

一般加入裂解液0.2-0.3ml或47－141ul/50ml培养瓶。

4 回答1087 围观

问配好的冻存液放在4度冰箱还是-20度冰箱呀？

申东熙老伯

可以分装好，大部分放在-20℃冰箱，剩下的需要频繁使用的放在4℃冰箱。

3 回答544 围观

问MKN45消化时间一般多久，用不用37度消化

huarenqiang5

建议置于37℃培养箱中消化1-2分钟。

3 回答554 围观

问MKN45传了两代之后突然就长不起来了，看了背景很干净，细胞状态也还好就是不长，是什么原因呢

huarenqiang5

可能是你培养液或者是血清的问题。

3 回答228 围观

问原代神经元的OGD条件是什么，按照文献里的都不行！

loveliufudan

OGD处理条件的具体设置可能因实验设计、细胞类型、实验设备和试剂等因素而有所不同。一般来说，OGD处理需要在含有极低氧和无糖的培养基中进行，以模拟缺氧和缺糖状态。以下是一些常用的OGD处理条件：OGD培养基的制备：将培养基中的葡萄糖浓度降至0-1 mM，并使用氮气或其他方式去除培养基中的氧气，使其维持极低氧状态。细胞预处理：可以使用低氧预处理或其他方式，增强细胞对缺氧缺糖的耐受性。OGD处理时间：

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问革兰染色的关键点是什么，脱色时间最佳为多少

sswei

革兰氏染色的关键点是酒精脱色，朊包时间最佳为10一20秒。

3 回答1706 围观

问浙江中医药大学学报投稿2个半月了还没有修改意见，会不会拒啊😭

huarenqiang5

一般拒稿都会给你发信息的，建议耐心等待或发邮件咨询一下。

4 回答574 围观

问wb胶板的配制求助大佬解答

balalaLy

分离胶用水压没有问题，我一直都是用水，那些痕迹可能是玻璃板上的脏东西或者是你配分离胶的时候有漏胶。另外，你的浓缩胶太长了，跑胶效果可能会没那么好。

4 回答868 围观

问免疫荧光标记小胶质细胞为什么会出现这种情况？

申东熙老伯

调一下曝光，把曝光调低点，可能曝光太高了。

5 回答759 围观

问阴性对照IgG

dxyc42u

我们用的武汉的某大厂生产的还不错

4 回答394 围观

问血球计数板用来计数肠道菌群是用100倍镜吗

huarenqiang5

是的，一般血球计数板用来计数肠道菌群都是用的100倍镜。

5 回答608 围观

问求助文章

上山打老虎11111

靠不了大神靠自己，建议可以把自己想做的方向、主题在pubmed和国自然网站已结题的本子中搜索大神们是怎么研究的，研究方案是什么，拟定自己的，做预实验验证。

3 回答328 围观

问新手重组质粒单酶切多条带，求求大神们帮忙解答，感谢感谢

loveliufudan

根据你提供的信息，可能有几种原因导致PCR扩增产物的带状图谱和酶切结果不完全匹配，具体如下：PCR扩增产物的带状图谱中的条带可能来自多个目的基因的不同片段，或者有一些非特异性扩增产物，这可能是PCR反应条件优化不当导致的。可以尝试进行PCR条件优化，如改变退火温度、延长延伸时间、调整引物浓度等，以提高PCR产物的特异性和纯度。酶切反应中，如果消化时间、酶的浓度和活性不足，可能导致目的基因未被完全消

3 回答825 围观

问求助，试验瓶颈，大神给个思路

dxyc42u

可以考虑下实验组基因沉默时候所加试剂对细胞是否有毒性

3 回答518 围观

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