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科研学霸天团,48小时有问必答
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问
对于生物医用高分子材料,从哪些方面评估其对细胞的毒性和生物相容性的影响?
huarenqiang5
从血液反应、免疫反应及材料反应进行评估。
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问
尊敬的老师,师兄师姐们好,请问有抗性基因,转染成功的细胞无论在浓度多大的抗生素筛选下都能存活吗?
huarenqiang5
有抗性基因,转染成功的细胞只能在合适浓度的抗生素筛选下才能存活。
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问
牛血清白蛋白(无脂肪酸)水浴锅加热温度可以高于55℃吗,或者最高可以多少度
huarenqiang5
水浴锅加热温度可以高于55℃,但建议<60℃,因为60℃时就可令其变性。
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问
细胞培养过程中,发现培养皿壁上有一些发黄的絮状物,这些是什么,请大神解惑?
huarenqiang5
考虑可能是纤维之类的东西,建议处理一下。
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问
由于时间原因,新鲜的抽脂脂肪组织来不及提原代保存在-80度冰箱该怎么保存?是直接把组织放进冰箱还是加pbs或者培养基泡着?
huarenqiang5
脂肪组织以PBS清洗,之后置于冷冻保存液中,冷冻保存液中含有70%的小牛血清20%基甲基亚芬10%的培养基封装在5ML的冷冻管之中,之后置于零下80°的容器中经过程序性降温后保存在零下196°的液氮中。
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问
在过表达实验中不想让它表达的量太高,如何降低过表达基因的量
huarenqiang5
通过蛋白泛素化修饰或者用siRNA(或shRN A)干涉处理。DNA和染色体水平:基因丢失、基因修饰、基因重排、基因扩增、染色体结构变化。转录水平调控:转录起始、延伸、终止均有影响。原核生物Q借助于操纵子,真核生物Q 通过顺式作用元件Q和反式作用因子相互作用进行调控。转录后水平调控:真核生物原初转录产物经过加工成为成熟的mRNA,包括加帽、加尾、田基化修饰等。
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问
质粒抽提的时候总是拿不到想要的目的片段,设计引物的时候可以设计的长一点吗?
huarenqiang5
引物的长度一般为15-30 bp,常用的是18-27 bp。不应过长。
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问
构建载体过程中,在提取质粒几天后再加RNA酶可以吗?
土井挞克树
可以加,三天之内加还可以,太长时间就不行了
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问
向后COX后,想研究的变量p>0.05,留在模型里
土井挞克树
这个还是以后续的多因素为主,单因素统计学不具有说服力
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问
楼主可以分享下plos one 手稿的投稿格式吗 第一条到底啥意思呀 啥是latexdiff
土井挞克树
这个是更改后的差异,按照步骤修改就行了
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问
中华创伤杂志是不是最近遇到什么问题了
土井挞克树
中华的杂志一般比较严格,成功含金量也高
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问
求助:带神经轴突的DRG神经元胞体钙离子成像
土井挞克树
可以使用,pubmed上有很多成功的例子
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问
请问这是霉菌污染了吗?
loveliufudan
这很可能是细胞培养中发生了霉菌污染。霉菌污染通常会表现为细胞形态改变,细胞生长减缓或停滞,培养基中可能会有白色或棕色的菌落或浮游物。而且,黑雾状的团块也是霉菌污染的一种典型表现。建议立即停止使用受影响的细胞,对培养器具进行彻底清洁和消毒,重新开展细胞培养前,确认消除了污染源,避免细胞培养中再次发生霉菌污染。
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问
coreldraw能画这种图吗
土井挞克树
可以的,这个coreldraw和ps都可以
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问
细菌培养,脆弱拟杆菌
土井挞克树
TSB中可以适量添加乳糖,效果好一些
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问
hplc纯化rna的时间是多少呢
土井挞克树
一般是半个小时之内就可以纯化成功。
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问
RNA保存液储存的临床标本可以用来测转录组学?
huarenqiang5
RNA保存液储存的临床标本可以用来测转录组学。
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问
为什么连接pTT5载体的质粒用293细胞真核表达系统表达不出来,没有终止密码子,怀疑是质粒构建的问题,是不是需要优化密码子?
土井挞克树
需要优化密码子,必要的时候要更换引物
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问
用大鼠腹腔静脉血进行流式检测可以吗
土井挞克树
可以的,建议处理掉混杂细胞,这样筛选准确率高
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问
设计的qpcr引物放在-20℃冰箱半年还能用吗?
土井挞克树
引物的话是可以的,因为引物性质一般比较稳定
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