离心后清洗沉淀3次用无菌水重悬，请问怎么重悬并用血球计数板计数制成浓度为1×107 cfu·mL-1的悬浮液？

重悬时用少量无菌水，然后计数，计数完根据需要的浓度算再加入的无菌水即可

采用的一次性塑料计数板，一般来说一个大皿或者中皿消化离心后的重悬采用的都是1ml培养基，此时可以直接在重悬液中吸10ul打入细胞计数板，在显微镜下数数，采用传统计数方法数上不数下，数左不数右可以直接数出四个格子里的总数，假设为94那么细胞密度就是94除以4再乘以10的4次方即为23.5x10^4个/ml，如需要稀释成17.5x10^4个/ml，那么

设需要加入x ml培养基稀释，根据等式关系：稀释前后的细胞总数量是不变的 列出方程

（1+x）ml x 17.5x10^4=1ml x 23.5x10^4

计算出x=0.343ml

加343ul培养基到原来的1ml悬液中混匀后即可得到指定浓度的细胞悬液

若直接进行计数，视野中细胞数过多那么可以进行稀释后计数，一般取100ul细胞悬液加入900ul培养基稀释成10倍，计算的时候要把稀释倍数加上去

稀释后计数视野中共16个细胞，那么实际上细胞密度为16除以4再乘以10的4次方再乘以10即为4x10^5个/ml 还是要稀释成为17.5x10^4个/ml同样列等式

（1+x）ml x 17.5x10^4=1ml x4x10^5

计算得出x=1.286ml

加1.286ml培养基到原来的1ml悬液中混匀后即可得到指定浓度的细胞悬液

重悬细菌沉淀并制备细菌悬浮液的步骤如下：

1.使用一个无菌移液管，将沉淀沉淀底部的液体除去（这一步可以反复重复，以确保除去所有上清液）。

2.添加一定量的无菌蒸馏水（比如10毫升），用移液管轻轻悬浮菌沉淀，使细菌均匀分布。

3.使用血球计数板计数，将细菌悬浮液中的细菌数目计算出来。注意，需要在血球计数板的四个角各放一滴悬浮液，以获得更精确的计数结果。

4.将细菌悬浮液中的细菌数目通过稀释到1×10^7 cfu/mL的方式进行浓度调整。例如，如果您最初在10毫升的悬浮液中计算到了1×10^8个细菌，则需要将该悬浮液稀释到100毫升（即10倍）的无菌蒸馏水中，以获得1×10^7 cfu/mL的最终浓度。

注意，制备细菌悬浮液的过程中需要保证所有的操作都在无菌条件下进行，以避免细菌污染。此外，在使用血球计数板计数时，需要注意不要将细菌悬浮液注入血球计数板的中心孔，以避免将空气泡困在孔中导致计数误差。