请问每次复苏的细胞传代3到4次后出现分化严重，细胞与细胞之间连城片状，分化严重，还有少量细胞漂浮，不到24小时，培养基就变得很黄

主要考虑：

1.血清浓度，建议刚复苏的细胞血清浓度要高一点，然后慢慢恢复冻存前用的血清含量。

2.有可能冻存细胞的质量不太好，可以考虑复苏后的前几代用好一点的血清，然后等细胞状态好了在慢慢换回来。

3.PH值或存在细菌污染（主要是支原体污染）。

培养基容易变黄的话，除了细胞增殖太快了还有可能是污染了

传的时候尽量传的均匀点，控制一下细胞密度。

您描述的细胞分化、细胞片状连成一片、以及培养基变黄的情况可能是由于细胞培养条件或细胞品质的变化所致。以下是可能的原因：

1.细胞寿命：一些细胞株会随着传代次数的增加而发生细胞老化或细胞凋亡，导致细胞形态的改变和细胞数量的减少。

2.培养基成分：培养基成分的变化可能会导致细胞形态和生长的改变。建议检查培养基配制是否正确，以及过期和存储条件是否正确。还应注意培养基的pH值和温度，以避免影响细胞的生长和代谢。

3.污染：细胞培养污染可能会导致细胞形态和生长的改变。建议对细胞培养物进行无菌操作，并对培养器具和培养条件进行彻底的消毒和清洁。

4.细胞株的稳定性：一些细胞株可能会失去其原始性状，导致形态和生长的改变。建议在传代过程中仔细观察细胞形态和生长的变化，并及时停止使用出现问题的细胞株。

总之，为了保持细胞的稳定性和品质，建议定期对细胞进行鉴定、传代和冻存，并对培养条件进行仔细的监测和调整。