实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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问实时荧光定量pcr同一个引物，不同时期的四个样品，三个合适，一个有杂峰，是什么原因

loveliufudan

可能的原因有以下几个：样品制备不同：不同制备方法可能导致样品中出现不同的杂质，影响实时荧光定量的准确性。因此，应尽可能使用相同的制备方法来制备样品，以减少可能的差异。样品质量差异：如果样品质量存在差异，例如某个样品受到了污染或者存在一些异常情况，就可能导致杂峰的出现。这种情况下，需要重新制备样品或者进行进一步的处理。仪器问题：实时荧光定量是一种非常敏感的技术，如果仪器存在问题或者使用不当，就可能出

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问关于R语言计算IDI报错

sswei

数据不是可计算的numeric or interger类型。integrate不返回数字，它返回类integrate的对象，这也告诉你有关数值错误的一些细节等。

3 回答262 围观

问seer数据库使用疑问

huarenqiang5

建议按以下步骤试试：官网地址：https://seer.cancer.gov/ 数据库的使用权限1.进入官网，【SEER Data&Software】<【How to Request Data Access】2.点击【Continue to Request Form】3.机构账户点击左边，非机构账户填写好邮箱后点击右边。4.出现申请页面：信息填写好后点击【Sumbit

3 回答3140 围观

问已知四个组数据的样本量，以及平均数±标准差，怎么能够得到汇总的平均数±标准差

loveliufudan

要计算四个组数据的汇总平均数和标准差，可以使用加权平均数和加权标准差。假设有四个组数据，它们的样本量分别为$n_1, n_2, n_3, n_4$，平均数分别为$\bar{x}_1, \bar{x}_2, \bar{x}_3, \bar{x}_4$，标准差分别为$s_1, s_2, s_3, s_4$，则汇总平均数和标准差的计算公式为：汇总平均数 = $\frac{n_1\bar{x}_1 + n

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问springer添加通讯作者

loveliufudan

这个错误信息提示您输入的电子邮件地址已被系统中的另一个用户使用。这可能是因为您的导师已经在Springer系统中注册了一个账户，使用了相同的电子邮件地址。为了避免混淆，系统要求每个用户的电子邮件地址必须唯一。为了解决这个问题，您可以尝试以下几种方法：更换电子邮件地址：如果您可以使用另一个电子邮件地址注册一个新账户，那么您可以尝试这种方法。在注册过程中，确保输入一个您之前没有在Springer系统中

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问foxo1磷酸化位点怎么选？

huarenqiang5

PI3K- PKB （ Akt ）信号通路始于RTK和细胞因子受体的活化，产生磷酸化的酪氨酸残基，从而为募集PI3K向膜上转位提供锚定位点。 [1]磷脂酰肌醇-3-激酶（ PI3K ）最初是在多瘤病毒的研究中被鉴定的。PI3K既有Ser/ Thr 激酶活性，又具有磷脂酰肌醇激酶的活性。PI3K由两个亚基组成：一个p110 催化亚基，一个p85 调节亚基

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问请教大佬安捷伦流式仪做的细胞周期数据用Modfit分析应该选哪个通道？

huarenqiang5

每张图片建议都选第一个通道进行分析。

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问为什么巢式PCR失败且第二轮很多smear？

loveliufudan

可能是由以下原因造成的：模板DNA质量差：模板DNA质量对PCR反应影响较大，如果模板DNA质量差，可能会影响PCR扩增效果。建议使用高质量的模板DNA，并通过紫外光谱仪等方法检测DNA质量。反应条件不合适：PCR反应条件是影响PCR扩增效果的重要因素，如果反应条件不合适，可能会导致PCR失败。建议优化反应条件，包括温度、时间、引物浓度、MgCl2浓度等因素。引物设计不合适：引物的设计是PCR反应

3 回答892 围观

问NOTCH通路

loveliufudan

Notch1-4和jag是Notch信号通路的重要组成部分，Notch信号通路在细胞发育和分化中起着重要作用。你可以使用primer bank（Primer Bank ( harvard.edu )）来查询人类基因的PCR引物序列。例如，如果你想查询Notch1的引物序列，你可以在primer bank的搜索框中输入NCBI Gene ID为4851，并选择Human作为Species，然后点击s

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问请问我这pcr条带是拖尾了么

loveliufudan

您的PCR条带应该是出现了拖尾现象。可能有以下原因：模板不纯或降解Buffer不合适退火温度偏低酶量过多dNTP、Mg2+浓度偏高循环次数过多您可以尝试以下对策：纯化模板或更换新鲜模板更换Buffer适当提高退火温度适量用酶适当降低dNTP和镁离子的浓度减少循环次数

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问不满足HW平衡的位点处理

huarenqiang5

不足HW平衡的位点建议进行踢出。

3 回答336 围观

问细胞培养

huarenqiang5

这个情况你可以试试把培养液全部倒掉，用PBS洗2遍后，再加入新的培养液。

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问求助！求一个RAW264.7巨噬细胞极化CD86和CD206流式protocol

loveliufudan

以下是CD86和CD206流式细胞分析的基本流程和protocol：CD86和CD206的流式细胞分析基本流程：1.制备单细胞悬液2.细胞表面标记抗体染色3.流式细胞分析仪分析CD86的流式细胞分析protocol：1.用PBS洗涤细胞，离心收集；2.用离心管离心收集细胞，弃去上清液，细胞用0.5mLPBS重悬；3.加入0.5μL CD86-FITC标记抗体，室温孵育30min；4.再次用PBS洗

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问干细胞复苏后自己分化成骨了吗

huarenqiang5

你这细胞形态不太好，已经分化成骨了。

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问小鼠MCAO造模求助

huarenqiang5

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问脑卒中模型，小鼠手术期间死亡

huarenqiang5

考虑以下几点原因：1.手术不熟练是最主要的问题，或是手术操作不当，使得颈部神经坏死；2.线拴插入过深：导致大脑缺血严重。手术过程中需要检测血流，选择合适的进拴深度；3.疼痛及失血过多，手术过程中操作不当使得小鼠失血过多，小鼠因为疼痛和虚弱难以进食；4.细菌感染，在术前，术中和术后都需要做好消炎措施，注射适量的消炎药物。

3 回答503 围观

问电针固定小鼠方法求教

huarenqiang5

这个需要根据小鼠的重量来确定大小，你可以用小鼠固定器或小鼠固定筒架： 1.小鼠固定器：适用范围：15~40g；鼠桶外型尺寸：93×44×44mm；鼠桶外径：36mm，鼠桶内径：30mm，暴露部位：尾部、左右侧部、腹部、鼻部。 2.小鼠固定筒架：用于小尾鼠尾静脉注射；用于小鼠静脉取血；用于小鼠尾压痛、烫尾疼痛或电刺痛实验；用于小鼠足趾肿胀实验；用于需在清醒状态

3 回答639 围观

问跟同门师兄生信分析用了同一个公共的数据集，但是分析的内容完全不一样，会有影响吗？

huarenqiang5

如果你分析内容等方面不一样一般来说没有什么影响。最好是先进行查重看看，如果达标就没问题。

3 回答450 围观

问流式区分死活细胞

loveliufudan

DAPI和PI都是DNA染料，可以用来区分死活细胞。死细胞的质膜完整性受损，导致DNA染料可以进入细胞核并与DNA结合，发出荧光信号。活细胞的质膜完整性正常，阻止DNA染料进入细胞核，因此不会发出荧光信号。如果你想用DAP或PI区分死活细胞，你应该先进行固定再进行染色。如果你先染色再固定，会导致所有的细胞都发生渗透性增高，结果就是所有的细胞都染上色以至于无法区分死活细胞。如果你需要检测胞内抗原而不

4 回答5354 围观

问只有merge后黄色的荧光才能表示共定位吗？

huarenqiang5

这个不一定了，共定位受多种因素影响，共定位从物理角度来看，表示两种或多种颜色荧光分子发出的颜色占据图像中的相同像素。在生物学上，共定位是指两个或多个不同分子位于细胞中的同一结构。在数字成像的背景下，它可以被描述为多通道图像中的两种或更多荧光染料在空间重叠。共定位对于确定感兴趣结构的位置必不可少，当我们发现某一蛋白在细胞中其重要作用时进一步研究其在何处与何分子结

3 回答993 围观

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