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        不知道WB中这些斑块产生的原因和解决办法,求

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        dxy_dy5j1y73

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        5 个回答

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        Luckybabygirl

        有帮助

        看起来特别像加样时样本飘了的痕迹,但出现在最终的条带上,可能是有气泡正好在那个位置,那就下次记得把气泡赶走。如果是第一次跑,可以在分析下上样量以及其他问题,多试试

        user-title

        huarenqiang5

        有帮助

        常见的原因是封闭液中出现了不溶性物质。建议将封闭液充分溶解后进行过滤。

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        loveliufudan

        有帮助

        斑块的产生通常由以下原因引起:

        蛋白质样品含有杂质:这可能导致出现额外的斑点,影响目标蛋白的检测。

        溶液pH值不正确:Western Blot过程中各步骤的缓冲液pH值必须精确控制,否则会导致蛋白质聚合物不完整或者膜不均匀。

        非特异性结合:抗体结合非特异性蛋白质可能导致斑点的产生。

        要解决Western Blot中的斑点问题,可以考虑以下几个方面:

        调整SDS-PAGE电泳分离条件:电泳电流、电泳时间、电泳缓冲液等条件需要仔细优化。

        优化特异性抗体:使用更高亲和力的特异性抗体或者优化抗体的条件,如反应时间、浓度、温度等。

        减少杂质:尽可能减少样品中的杂质,或者通过提取纯化目标蛋白质来避免杂质的干扰。

        仔细控制实验条件:控制实验条件,如温度、湿度、实验仪器等,可以减少Western Blot过程中的误差和变异。

        user-title

        balalaLy

        有帮助

        如果不是杂质或者转膜时的气泡,可能就是封闭用的牛奶质量不是很好,有脂质残留,可能增加Tbst中的tween20

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        秋秋欣欣

        有帮助

        应该是你转膜的时候产生气泡了。

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