实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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问请教下大神，大家用的茜素红染色液是买的配好的溶液还是粉剂呢？有推荐的吗？另外酸性/中性/碱性都有，哪一种适合染培养细胞的矿化结节？

huarenqiang5

一般是购买茜素红素粉，然后自己进行配制，茜素红S 1g 蒸馏水 90ml 1%氢氧化铵 10ml此液PH值应在6.3左右，此溶液至少可保存1个月。

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问WB实验使用的膜哪种最好啊？

huarenqiang5

Pvdf膜跟nc膜有的区别及选择：一、硝酸纤维素NC膜的优点1.使用方便，操作简单，兼容多种检测方法，与 PVDF 膜相比，不需要甲醇浸泡过程，这样使得那些需要亲水环境下的蛋白质转移。在转移前，仅需要在水中简单润湿，然后置于转移缓冲液中，不需要其他的预湿步骤了。2. 背景低：除了具有高结合力外，硝酸纤维素膜本身产生的背景非常低，膜特有的表面性质保证了优异的信噪比，在膜洗脱时不需要严格的洗脱条

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问免疫荧光实验中，如何选择最佳的探针以获得最高的灵敏度和特异性？

huarenqiang5

荧光探针的选择主要从以下几个方面考虑。（1）仪器所采用激光器的类型：应根据仪器采用激光器的类型进行探针选择。如共聚焦激光扫描显微镜采用氪/氩离子激光器，激发波长为488nm，568nm，647nm，可激发多种荧光探针。（2）荧光探针的光稳定性和光漂白性：在进行荧光定量和动态荧光监测时，要求荧光探针有较高的光稳定性，也可通过减少激光扫描次数或降低激光强度的方法，来减轻光漂白的程度。但在进行膜流动性或

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问诊断性meta阈值效应处理

sswei

理论上讲，诊断阈值不同，敏感性和特异性等是不能合并的，但是实际上大家都在合并，你完全可以随大流把敏感性和特异性合并起来。有阈值效应也可以合并，阈值效应只是为了检查异质性的来源。异质性一般分为阈值效应和非阈值效应。阈值效应没有发现异质性，并不代表非阈值效应没有异质性。因此，做阈值效应非必要。

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问有没有用临床数据库投稿过bmc medicine的大佬，有些问题想请教

loveliufudan

BMC Medicine是一个开放获取的医学期刊，它发布高质量的临床、流行病学和基础研究文章，涵盖广泛的医学领域。如果你有关于BMC Medicine投稿的具体问题，我可以尽力帮你解答。

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问水提和醇提的收率

sswei

水提醇沉法系指处方中药材加水煎煮，既提取出有效成分，如：生物碱盐、甙类、有机酸类、氨基酸、多糖类等；同时也提出一些水溶性杂质，如：淀粉、蛋白质、粘液质、鞣质、色素、无机盐等。若往水煎液中加入适量乙醇，可以改变其溶解性能而将杂质部分或全部除去。当乙醇浓度达到60%～70%时，除鞣质、树脂等外，其他杂质已基本上沉淀而除去。如果分2～3次加入乙醇，浓度又逐步提高，最终达到75%～80%，则除去杂质的效果

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问中国急救复苏杂志定稿多久啊

天一湖医者

审稿周期在【1-3个月】左右，定稿后也要一个月左右吧。

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问Brazilian Journal of Cardiovascular Surgery接收后求助

sswei

周期有点长，具体需要根据杂志社的安排决定。

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问国自然参与人账号注册

sswei

需要到所在单位取相关登录的信息进行注册。

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问中医临床研究杂志

天一湖医者

一般是投稿一个月左右初审，具体要求官网有介绍。

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问原核表达IPTG诱导问题求助

sswei

反应条件较复杂，特别是对自己设计的引物来说，选择合适的退火温度，是需要慢慢摸索的，一般根据计算的退火温度降低5~10℃来进行首次扩增，如果出现了目的条带，且有杂带时，在逐步提高退火温度，以提高反应的特异性。此外，还有反应体系，电泳条件，时间等等因素。

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问免疫荧光共定位，需要做半定量分析吗？

loveliufudan

共定位分析可以检测两个蛋白是否在同一亚细胞定位，并可以通过免疫荧光染色来直观地观察它们的共定位情况。但是，如果需要证明这两个蛋白之间的共定位程度的强度或数量关系，就需要进行定量分析了。定量分析可以使用图像处理软件或其他定量方法，比如荧光标记的蛋白质在细胞中的比例或共定位区域的面积等。虽然免疫荧光染色本身存在一定的局限性，但是通过标准化的实验流程和准确的图像分析方法，可以获得可靠的定量结果。所以，如

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问测细胞培养上清液的葡萄糖和乳酸浓度，上清液可以冷冻保存回收，之后解冻再测吗

loveliufudan

通常来说，细胞培养上清液可以冷冻保存并回收，但在解冻并重新测量之前，需要注意以下事项：冷冻保存时，应将上清液储存在低温（通常为-80℃）和无菌的环境中，以避免其被污染或失活。在重新使用之前，需要确认上清液的冷冻和解冻过程没有对其葡萄糖和乳酸浓度产生影响。这通常可以通过比较解冻后的样本和之前测量的样本进行分析。在解冻之前，建议将上清液缓慢地放置在冰箱中解冻，以避免温度变化过快对样本造成损害。重新测量

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问【求助】PHN大鼠造模用Fx1A抗体

loveliufudan

注射抗Fx1A血清时，需要将大鼠麻醉，并在15-30秒内将0.4毫升/100克体重的抗Fx1A血清注入尾静脉。产生疾病的程度与剂量有关，因此重要的是要完全注入所需剂量的抗体。推荐剂量已经过测试，能够产生如数据表所述的疾病。

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问乳腺癌细胞相关问题提问

huarenqiang5

MDA-MB-468细胞表达EPCAM。

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问家人们帮忙看看这GSEA报错什么意思

汤姆卜丽波

你看下你的矩阵表格，有芯片参数或者说命名不对

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问为什么跑蛋白，STAT3含量基本不变？

龙大人驾到

这是因为STAT3与p-STAT3的含义不同。STAT3是一种蛋白质，其含量在治疗前后基本不变。而p-STAT3是一种磷酸化修饰形式的STAT3，其含量会随着外界信号刺激而发生变化。当外界信号刺激到细胞时，激活的激酶会磷酸化STAT3，将其转化为p-STAT3，p-STAT3进入细胞核后调控相关基因的转录。因此，检测STAT3和p-STAT3可以了解到外界信号刺激是否引起了STAT3的磷酸化修饰。

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问请问污泥中的酸性磷酸酶可以提纯吗

dxy_5kz0zll2

污泥中的酸性磷酸酶可以提纯的。

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问我想问一下微球体是什么实验

龙大人驾到

微球体实验是一种实验方法，用于研究微小颗粒物质的性质和行为。该实验主要通过制备一种具有特定大小、形状和表面性质的微小球体，然后使用不同的测量技术和设备来研究其物理、化学和生物特性等方面的信息。这种实验方法可以应用于多个领域，如材料科学、生物医学、环境科学和纳米技术等。

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问HE染色失败，找原因及补救方法

dxy_5kz0zll2

低浓度开始多换几次，这样可防止组织脱水过度造成扭曲。如果时间紧凑，可从95%乙醇开始，接着行无水乙醇脱水。通常的方案是从60%～65%乙醇开始，换2次95%乙醇，2次无水乙醇。

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