免疫荧光实验，整个细胞片都出现荧光亮点原因？

抗体特异性太差，更换特异性高的抗体再做。

考虑以下几点：

1.一是二抗浓度过高，适当降低二抗浓度即可。

2.二是二抗发生沉淀，可以使用过滤戒者离心荧光标记二抗。

如果整个细胞片都出现荧光亮点，可能有以下几种可能的原因：

染色体非特异性染色：免疫荧光实验中，如果抗体与非特异性抗原结合，会产生非特异性荧光信号。这可能是因为细胞样品中存在许多蛋白质，染色抗体与其中的某些蛋白质结合，从而在整个细胞片中产生荧光信号。

过度固定：过度固定会导致细胞膜和细胞质蛋白凝聚，抑制抗体与其靶标的结合，从而导致荧光信号弱或者均匀分布在整个细胞中。

过度渗透化：过度渗透化可能导致细胞膜完全破裂，使抗体可以自由进入所有的细胞区域，从而产生整个细胞片的荧光信号。

抗体特异性问题：如果染色抗体与多种不同的蛋白质结合，也可能导致整个细胞片出现荧光亮点。此时需要检查抗体的特异性，或者使用其他不同的抗体或标记方式。

因此，需要排除上述可能的原因，并进行相应的优化和调整实验条件。

原因有二：一是二抗浓度过高。二是二抗发生沉淀。