实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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问请问各位大神，做网状meta分析的联赛表时，同样的数据同样的代码做出来的数据完全不同？望指指路

loveliufudan

以下是几种可能导致问题的原因和解决方案：数据处理问题：请确保所有研究的数据格式、单位、缺失值处理等都相同。如果数据中存在异常值或离群值，请尝试进行处理或者考虑在 meta 分析中使用稳健统计方法。代码实现问题：请检查代码中的算法和统计方法，确保使用的是正确的方法。另外，不同的编程语言和软件包可能会有不同的默认参数，这也可能导致结果不同。建议在代码中明确指定所有参数的值。软件版本问题：如果使用的是特

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问HEK293T细胞培养问题求助？

简简单单的8872

看图片细胞状态比较差，可考虑更换细胞，或者提高FBS浓度。

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问求助，plko.1酶切条带很奇怪

loveliufudan

以下是一些可能的解释：酶切位点：请确保BshT1和EcoR1的酶切位点是正确的。如果酶切位点存在问题，可能导致不完整的酶切或完全没有酶切。您可以查看质粒的序列，或使用其他方法（如限制性内切酶消化或测序）来验证酶切位点是否正确。酶切反应条件：请确保使用的酶切反应缓冲液、酶的浓度和反应时间都是正确的。有时候，过高或过低的浓度、反应时间不足或过长，可能导致不完全的酶切或者不正确的酶切。质粒问题：即使来自

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问流式细胞分析药物在细胞中的摄取情况怎么设计实验？

loveliufudan

设计实验以研究流式细胞分析药物在细胞中的摄取情况，可以按照以下步骤进行：细胞选择：选择适合的细胞系，例如癌细胞系或者小鼠或人类原代细胞，根据药物的作用机制和目标细胞选择细胞系。药物浓度的确定：在选择的细胞系中，使用不同的药物浓度，例如1μM、10μM、50μM等，测定药物摄取情况，并选择能够观察到显著差异的药物浓度范围。药物作用时间的确定：在确定药物浓度后，对细胞进行不同时间的处理，例如5分钟、3

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问中药复方生药材小儿用每日1g，怎样算成人剂量？再要拿成人剂量乘以9.1为小鼠灌胃用药剂量，中间缺成人剂量，不知如何算了

loveliufudan

中药的用量剂量一般是指每一味药的成人一日量。小儿用药量通常按成人用量进行折算，有不同的方法。其中一种常用的方法是：1岁以内剂量：成人剂量0.01 (月龄+3)1岁以上剂量：成人剂量0.05 (年龄+2)假设您说的小儿是5岁，那么成人剂量大约是：成人剂量 = 小儿用每日1g / (0.05 * (5 + 2)) = 2.86g再将成人剂量乘以9.1，就是小鼠灌胃用药剂量：小鼠灌胃用药剂量 = 成人剂

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问如果提高单细胞测序样本送样时的稳定性和可用性以及避免污染等。

loveliufudan

单细胞测序样本是非常宝贵和敏感的，因此为了确保样品的稳定性和可用性，以及避免污染，需要采取以下预防措施：样本采集：在采集单细胞前，应使用无菌技术准备所需的工具和材料，避免外来微生物的污染。此外，对于某些样本类型（如血液或骨髓），需要避免凝血或者其他处理可能影响单细胞的因素。样本处理：在将样本分离出单个细胞之前，应避免使用会损伤细胞的工具和技术。一些样本处理方法可能会影响细胞的完整性和质量，因此需要

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问想要通过荧光定量pcr来检测粪便，组织中的细菌的量，可以用DNA做吗？需要内参吗？如果不需要为什么不需要？怎么做数据处理

loveliufudan

可以使用荧光定量PCR来检测粪便、组织中的细菌量，而DNA是进行PCR的重要基础。通常情况下，荧光定量PCR需要使用内参来校正PCR反应的变化，以确保可靠的定量。内参通常是一个稳定的基因，在样本中的表达量相对稳定，且与待检测的靶基因有相似的扩增效率。使用内参可以帮助纠正PCR反应的波动，使得PCR反应更加准确可靠。然而，在一些特殊情况下，如粪便等样本中可能存在许多抑制性物质，这些物质可能会干扰PC

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问请教各位前辈，斑马鱼注射时如何固定？

loveliufudan

固定斑马鱼可以采用以下几种方法：使用网格：将一个小网格放在注射板上，并将斑马鱼放在网格上，然后用注射针从网格的空隙中注射。这种方法可以防止斑马鱼在注射时移动，并且可以方便地调整注射位置。使用凝胶：将一层低浓度的琼脂糖凝胶涂在注射板上，并将斑马鱼放在凝胶上，然后用注射针从凝胶中注射。这种方法可以防止斑马鱼在注射时移动，并且可以缓解注射对斑马鱼的伤害。使用聚苯乙烯管：将一根聚苯乙烯管放在注射板上，并将

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问为什么有时候细胞冻存的时候状态可以，复苏的时候离心下来的细胞很少，状态也不行？

dxy_taqg8wb7

是不是解冻的时候快融有些问题呢？融化时候要迅速平稳，避免冻存瓶晃动，不然冰晶会刺穿细胞。

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问培养悬浮CHO-K1细胞培养过程当中，使用相同培养基、相同的培养方式，部分细胞存在大量结团？

loveliufudan

在培养悬浮CHO-K1细胞的过程中，如果使用相同的培养基和培养方式，但存在部分细胞形成大量结团，可能是以下几个原因：细胞因子和营养物质不均匀分布：在悬浮细胞培养过程中，细胞因子和营养物质的分布往往不是非常均匀的，可能会导致部分细胞生长快，形成结团，而其他细胞生长缓慢。细胞密度过高：如果在培养基中存在过多的细胞，细胞之间的接触会增加，导致部分细胞聚集形成结团。培养条件不适宜：在悬浮细胞培养中，温度、

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问如何确定碱烧伤愈合后创面质量

烧伤科常医生

观察愈合情况可以通过表观：包括愈合速度，质量，颜色，疤痕的程度。可以通过病理学HE染色观察细胞分布皮肤附件的情况。Masson染色看胶原纤维分布，免疫组化可以观察血管化情况。通过上述方法，可以确定碱烧伤创面的愈合质量。

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问氰基柱在反向系统时有什么注意事项

烧伤科常医生

1.避免中等极性溶剂，不可保存在这类溶剂中2.流动性平衡要足够时长3.氰基柱相切换使用下，要充分过渡

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问B16F10细胞培养问题？

汤姆卜丽波

你可以多加血清养一段时间，就是细胞状态不行了

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问请问【医学综述杂志】停刊了吗？

huarenqiang5

这个杂志应该不会停刊，可以再等待一下看看是什么情况。

3 回答1619 围观

问请教关于回顾性队列研究的随访时间问题

sswei

有影响。但是在回顾性队列研究中，当得到数据时，失访已经存在。虽然无法弥补失访带来的偏倚，但可以尝试利用已有的数据和收集到的数据来判断是否存在偏倚以及偏倚的方向。

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问wb中电泳上样时loading buffer和sample buffer 的区别

sswei

samplebuffer指的是双向电泳样品缓冲液，样品的特征：复杂，含盐或其他污染物，易被蛋白酶降解，动态范围宽（>X106），溶解性不均一（疏水性/亲水性），分子量、等电点的范围宽（10-500KDa，pH2-14）。loaderbuffer指的是上样缓冲液，也就是样品中加的缓冲液，是一种用于DNA电泳试验的缓冲液。因此两者不一样。

3 回答3345 围观

问盐浓度、pH对BCA蛋白浓度检测影响大么

sswei

根据BCA法原理，将copper（Ⅱ）离子还原为copper（Ⅰ）离子需要正确的pH值。同时，样品的pH值也会影响反应的效率。

3 回答2226 围观

问UBA6可以作为FAT10的底物吗？

sswei

UBA6与FAT10能形成异肽键，可以与FAT10会形成类似泛素的链。

3 回答479 围观

问WB转膜部分失败，一个夹子里的有的就成功了，有的就失败了，求各位大佬指点

balalaLy

一个夹子尽量只转一张长8cm，宽4cm的膜，太大的话边缘容易转不上，另外转膜的时候尽量不要把胶裁开，夹夹子的时候容易使膜移位。

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问提问：水痘和带疱的病原体都是水痘—带状疱疹病毒（VZV），为什水痘疫苗不能预防带疱

Eason老歌迷

虽然水痘和带状疱疹的病原体都是同一种病毒，即：水痘-带状疱疹病毒。但是它两的疫苗有差别，所以不能通用。两者疫苗主要有以下不同：主要成分不同，临床症状不同，接种人群不同。带状疱疹疫苗活性成分是用DNA重组技术，将带状疱疹病毒糖蛋白进行培养冻干后制成。水痘疫苗是用水痘病原体减毒制备而成，是目前预防水痘最安全、有效的方法。

3 回答853 围观

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