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实验问答

31,803,111 科研人在看

问组织切片可以观察到生物发光吗?

balalaLy

生物发光一般活体可以观察，动物内部脏器或者想要观察局部细胞的情况也可以将局部组织取出或做成切片。这个跟你使用的发光材料有关。

3 回答784 围观

问已知酶怎样查找相关基因？

loveliufudan

如果您已经知道某个酶的名称或序列，可以使用以下几种方法来查找与该酶相关的基因：基因数据库搜索：可以使用各种基因数据库，如NCBI、Ensembl、UCSC Genome Browser等，来搜索与该酶相关的基因信息。在数据库中搜索时，可以输入该酶的名称或序列信息，以查找与之相关联的基因信息。基因家族搜索：如果已知该酶属于某一特定的基因家族，可以使用各种基因家族数据库，如Pfam、InterPro等

3 回答6181 围观

问各位大佬，胶体金半定量检测原理是啥啊

loveliufudan

原理是基于胶体金颗粒与抗体之间的特异性反应，在检测过程中，通过检测胶体金颗粒的颜色变化来判断目标蛋白质的相对含量。具体操作方法如下：制备胶体金颗粒：制备具有一定大小和形状的胶体金颗粒，并表面修饰特定功能基团的化学物质。包被抗体：将特异性抗体与胶体金颗粒表面的功能基团进行反应，包被抗体。准备标准曲线：用已知浓度的标准样品制备一系列浓度不同的标准曲线，作为半定量测定的参照。加样：加入待测样品和标准曲线

2 回答1577 围观

问病毒盲传1代PCR阴性，还要继续盲传吗

loveliufudan

如果病毒盲传的1代PCR结果是阴性，这通常意味着该代细胞中没有病毒存在。但是，为了排除假阴性的可能性，建议继续进行盲传并进行下一代PCR检测。如果连续3代PCR结果都是阴性，那么可以认为该细胞中不存在该病毒。但是，具体是否需要继续盲传取决于实验设计和病毒检测的灵敏度要求。

2 回答1605 围观

问为什么高浓度平菇水提物喂养果蝇体内抗氧化活性要比中浓度低（中浓度喂养果蝇体内抗氧化活性最高，高浓度比中浓度低但比低浓度大）？

loveliufudan

这可能涉及到营养毒理学中的U形曲线效应，也称为J形曲线效应。在某些情况下，物质的作用效果会随着剂量的增加而先增加后减弱，形成类似于字母U的曲线。在你提到的情况下，可能是高浓度平菇水提物含有过高的活性成分，导致果蝇的抗氧化系统出现了负反馈，从而使抗氧化活性下降。而中浓度则处于抗氧化系统的最优工作范围内，因此抗氧化活性最高。需要注意的是，U形曲线效应并不适用于所有的物质和生物效应，因此具体情况需要具体

2 回答1237 围观

问细胞培养基问题求助？

sswei

MEM培养基（Minimum Essential Medium）是动物细胞培养中的常用的培养基，主要是贴壁细胞的培养。修改配方后也可用于其他类型细胞培养，例如如无钙（Ca）MEM培养基可被用于悬浮细胞的培养，而Hank’s平衡盐的MEM培养基可被用于二倍体细胞的培养。DMEM是一种含各种氨基酸和葡萄糖的培养基，是在MEM培养基的基础上研制的。与MEM比较增加了各种成分用量，同时又分为高糖型（高于4

4 回答1305 围观

问求助 | 质粒保存在-20℃和-80℃会断裂或者消失吗？

loveliufudan

长期反复冻融会对质粒DNA的完整性造成一定的影响，导致质粒DNA的断裂或降解。此外，即使在-80°C下保存，长期保存也可能会导致质粒DNA的降解。因此，即使质粒A和质粒B、C一样都是在-20°C下保存的，由于经历了不同程度的冻融和保存时间，质粒A的完整性可能已经受到了影响，从而导致转染效果不如以前。建议重新制备新的质粒A，避免反复冻融，并尽量缩短其保存时间，以保证质粒DNA的完整性。

4 回答11922 围观

问求助：贴壁细胞的克隆形成实验，细胞总是长不起来，无法长出克隆，怎么办？

loveliufudan

如果您在进行贴壁细胞的克隆形成实验时，细胞总是长不起来，无法形成克隆，可能是以下原因之一：细胞密度太高：如果您在克隆形成实验中使用的细胞密度太高，可能会导致细胞在培养皿上太过密集，难以形成单个细胞克隆。建议尝试降低细胞密度，以便于单个细胞的分离和形成克隆。培养基成分不适宜：培养基成分对细胞的生长和分裂能力有很大影响，如果您使用的培养基成分不适宜，可能会影响细胞的克隆形成能力。建议检查培养基成分，尝

4 回答1365 围观

问求问，这个真菌污染是哪种菌呢，感染源都可能是哪里

loveliufudan

这种症状与真菌感染相符，但不能确定是哪一种真菌。真菌感染通常会导致培养基浑浊、pH变化，细胞表现出明显的异常现象，例如细胞形态异常、生长迟缓、凋亡等等。因此，建议你进行真菌检测以明确是否为真菌感染，并采取相应的措施。常用的真菌检测方法包括PCR、荧光染色和培养等。另外，建议你对细胞房进行全面的清洁和消毒，确保细胞环境的卫生和安全。

3 回答547 围观

问提pbmc做流式胞内染色，刺激5小时后贴壁细胞消化不下来

loveliufudan

可以考虑以下几个方面来解决问题：调整胰酶浓度和消化时间：尝试使用不同浓度的胰酶和不同的消化时间，以找到最佳的消化条件。尝试其他消化酶：胰酶可能不是最适合消化PBMC的酶，您可以尝试其他消化酶，例如，Trypsin-EDTA、Collagenase、DNase等。使用细胞分离液：使用细胞分离液可以更加有效地分离PBMC，并消化贴壁细胞。常用的细胞分离液有Ficoll-Paque、Histopaque

2 回答912 围观

问血管平滑肌细胞膜片钳实遇到的问题求助

loveliufudan

您遇到的问题可能是由于以下原因导致的：细胞质溶液中的Ca2+浓度过高：高浓度的Ca2+会刺激平滑肌细胞收缩，因此需要控制细胞内外液中的Ca2+浓度，确保在实验过程中细胞不会受到过多的刺激。钳制电压过大：过大的钳制电压也可能导致平滑肌细胞收缩，因此需要逐渐调整钳制电压，找到合适的电压范围。内外液渗透压差异过大：内外液渗透压差异过大也可能导致细胞收缩，因此需要逐渐调整内外液的渗透压差异，确保在实验过程

2 回答780 围观

问关于RAW264.7细胞一氧化氮检测的问题

loveliufudan

一氧化氮(NO)在细胞中的产生通常是通过一氧化氮合酶(NOS)的催化反应完成的。在RAW264.7细胞中，诱导NOS的剂量和时间是关键因素，过低或过高的剂量或时间都可能导致NO测不出来的问题。另外，如果您使用的是颜色反应法或化学发光法等方法来检测NO，需要注意的是这些方法对样品中NO的灵敏度和特异性都有一定的要求。例如，颜色反应法中，如果存在其他氧化物质或化学物质可以干扰反应体系，则可能导致NO无

1 回答2558 围观

问【求助】大鼠CCD模型

loveliufudan

制作大鼠CCD模型的L型钢棒需要以下材料和工具：钢棒（不锈钢或铝合金），直径和长度根据需要而定；电锯或手锯；手电钻或钻床；手工工具（如扳手、螺丝刀、钳子等）；螺丝和螺母。具体制作步骤如下：根据需要确定钢棒的直径和长度，并将其锯成所需长度。在钢棒两端各钻一个孔，并固定螺母。将两根钢棒交叉固定在一起，形成L型结构，使用螺丝将其固定。在L型钢棒上安装所需的夹具、传感器等部件，使用螺丝将其固定。L型钢棒的

2 回答880 围观

问求助巨噬细胞提取的一些问题

loveliufudan

在进行腹腔巨噬细胞的提取时，选择雌性小鼠的原因是由于雌性小鼠在生理周期上的变化会对腹腔巨噬细胞的数量和活性产生影响，因此在一些实验中选择在同一周期的雌性小鼠进行提取可以减少实验误差。此外，由于雄性激素可能影响巨噬细胞数量和功能，因此雄性小鼠在一些实验中不常用于腹腔巨噬细胞的提取。具体来说，雌性小鼠在生理周期的不同阶段，腹腔巨噬细胞数量和活性会发生变化。例如，雌性小鼠在发情期和妊娠期时，由于激素水平

3 回答372 围观

问流式设门

loveliufudan

在没有对照的情况下，可以使用单荧光染色的细胞作为门控制。选取一个单荧光染色的细胞，比如说只标记CD4，而不标记其他细胞表面标记物的细胞，将其设为负对照门，这样可以帮助区分阳性和阴性细胞。如果你需要定量分析，可以使用流式细胞计数器进行计数。但需要注意的是，使用单荧光染色细胞作为门仅适用于仅有一个荧光通道的情况，如果有多个荧光通道需要使用时，需要针对每个通道设置不同的门。

2 回答1103 围观

问组织脱水后有凹陷，部分切片镜下有发散的感觉，大小组织都有这种情况，脱水程序如下会是什么原因如何解决

loveliufudan

可能的原因：组织脱水不充分或时间不够，导致残留液体在脱水后形成凹陷和发散感。解决方法：对于脱水不充分或时间不够的情况，可以增加脱水时间和浓度，并且确保每个步骤的时间足够，同时确保脱水时组织浸润充分，以便组织内的液体充分被脱出。另外，如果组织切片时出现凹陷和发散感，可以尝试在石蜡浸润前进行压片处理，以便使组织均匀压平，并避免在脱水和包埋过程中出现空洞和气泡。同时，在包埋时，也要确保组织均匀包裹在石蜡

3 回答445 围观

问检测TERT的表达，分子量不太对，有杂带带

loveliufudan

很可能是样品的质量不佳，如受到不适当的处理、冻存和解冻等，导致蛋白质降解或变性，所以产生了杂带。

3 回答572 围观

问Thp1细胞加PMA诱导成巨噬细胞的相关问题？

dxy_mqg1dtg8

不需要一直加，一旦诱导成巨噬细胞就可以不加PMA，并在新的培养基中进行后续的药物处理。

6 回答1856 围观

问RNA pull-down做WB结果不稳定

sswei

可能样品中的互作蛋白表达量很低或样品中存在杂蛋白。

3 回答740 围观

问磁珠（美天旎）分选后的细胞，影响后组蛋白组学等分析这个问题怎么办？

dxy_zl01okr9

美天旎磁珠直径只有50nm，不影响后续蛋白组分析的

2 回答1061 围观

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