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        血管平滑肌细胞膜片钳实遇到的问题求助

        相关实验:血管形成实验

        user-title

        dxy_zqos6am4

        我是个做膜片钳的新手,我最近在做急性分离的血管平滑肌细胞膜片钳实验,我遇到的问题就是行成高阻封接后破膜,只要一破膜细胞就收缩,或者是破膜是细胞没有变化,过了一会细胞就开始收缩了图片描述这是我按照文献中配置的电极内外液,图片描述我想记录的是平滑肌细胞BKCa通道电流,钳制电压为-70mv,就是破膜后总是收缩,还有就是我配完了内外液测渗透压,外液渗透压显示270~280,内液渗透压250~260,这个范围我想问平滑肌细胞内外液渗透压是多少,我这个正常吗?谢谢各位大佬的指教

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        2 个回答

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        您遇到的问题可能是由于以下原因导致的:

        细胞质溶液中的Ca2+浓度过高:高浓度的Ca2+会刺激平滑肌细胞收缩,因此需要控制细胞内外液中的Ca2+浓度,确保在实验过程中细胞不会受到过多的刺激。

        钳制电压过大:过大的钳制电压也可能导致平滑肌细胞收缩,因此需要逐渐调整钳制电压,找到合适的电压范围。

        内外液渗透压差异过大:内外液渗透压差异过大也可能导致细胞收缩,因此需要逐渐调整内外液的渗透压差异,确保在实验过程中细胞不会受到过多的刺激。

        关于平滑肌细胞内外液渗透压的问题,正常情况下,平滑肌细胞内液渗透压约为280-290 mOsm/L,外液渗透压约为290-300 mOsm/L。您提供的内外液渗透压差异在正常范围内,但在进行实验时,需要根据具体实验条件和实验目的来确定合适的内外液渗透压。一般建议将内外液渗透压调整到接近等渗状态,以减少细胞在实验过程中受到的刺激。

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        一般渗透压是280-320,可以调整一下渗透压再做

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