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        各位大佬,胶体金半定量检测原理是啥啊

        相关实验:免疫胶体金技术

        user-title

        yuntm

        各位大佬,胶体金半定量检测原理是啥啊,机制是啥呀,具体怎么操作呀,根据啥去算的半定量呢?假如检测某细胞因子含量,组织里的细胞因子表达含量不能测吧?只能测血清里的是吗?感谢!

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        2 个回答

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        原理是基于胶体金颗粒与抗体之间的特异性反应,在检测过程中,通过检测胶体金颗粒的颜色变化来判断目标蛋白质的相对含量。

        具体操作方法如下:

        制备胶体金颗粒:制备具有一定大小和形状的胶体金颗粒,并表面修饰特定功能基团的化学物质。

        包被抗体:将特异性抗体与胶体金颗粒表面的功能基团进行反应,包被抗体。

        准备标准曲线:用已知浓度的标准样品制备一系列浓度不同的标准曲线,作为半定量测定的参照。

        加样:加入待测样品和标准曲线样品,与包被抗体结合。

        洗涤:用缓冲液洗去非特异性结合的蛋白质和其他干扰物。

        加入检测抗体:加入另一种特异性抗体,与样品中的目标蛋白质结合。

        再次洗涤:用缓冲液洗去非特异性结合的蛋白质和其他干扰物。

        加入显色剂:加入显色剂,观察胶体金颗粒颜色的变化。

        半定量分析:根据标准曲线和样品颜色的变化,半定量计算出目标蛋白质的含量。

        通常情况下,胶体金半定量检测可以用于检测生物样本中各种蛋白质的含量,包括血清、细胞培养上清、组织上清等。对于检测组织里的细胞因子表达含量,可以通过组织切片或细胞悬液等方法,将组织或细胞打碎后制备上清,再进行胶体金半定量检测。需要注意的是,在不同的样本类型和检测对象中,胶体金半定量检测的操作方法和具体实验条件可能会有所不同。

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        检测原理:胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,可聚合成一定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态,形成带负电的疏水胶溶液,由于静电作用而成为稳定的胶体状态,故称胶体金。胶体金在弱碱环境下带负电荷,可与蛋白质分子的正电荷基团形成牢固的结合,由于这种结合是静电结合,所以不影响蛋白质的生物特性。

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