实验问答

22,618,931 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

全部

细胞

问关于GBR膜屏障测试:看到有人做的把细胞接到膜上培养，染色后看细胞浸润深度，不太理解怎样接到膜上培养7天，怎样保证细胞只在表面呢？

土井挞克树

有专门的接种膜，细胞接种后只停留在表层，不会向下增长

2 回答340 围观

问组织切片可以观察到生物发光吗?

balalaLy

生物发光一般活体可以观察，动物内部脏器或者想要观察局部细胞的情况也可以将局部组织取出或做成切片。这个跟你使用的发光材料有关。

3 回答452 围观

问病毒盲传1代PCR阴性，还要继续盲传吗

loveliufudan

如果病毒盲传的1代PCR结果是阴性，这通常意味着该代细胞中没有病毒存在。但是，为了排除假阴性的可能性，建议继续进行盲传并进行下一代PCR检测。如果连续3代PCR结果都是阴性，那么可以认为该细胞中不存在该病毒。但是，具体是否需要继续盲传取决于实验设计和病毒检测的灵敏度要求。

2 回答425 围观

问为什么高浓度平菇水提物喂养果蝇体内抗氧化活性要比中浓度低（中浓度喂养果蝇体内抗氧化活性最高，高浓度比中浓度低但比低浓度大）？

loveliufudan

这可能涉及到营养毒理学中的U形曲线效应，也称为J形曲线效应。在某些情况下，物质的作用效果会随着剂量的增加而先增加后减弱，形成类似于字母U的曲线。在你提到的情况下，可能是高浓度平菇水提物含有过高的活性成分，导致果蝇的抗氧化系统出现了负反馈，从而使抗氧化活性下降。而中浓度则处于抗氧化系统的最优工作范围内，因此抗氧化活性最高。需要注意的是，U形曲线效应并不适用于所有的物质和生物效应，因此具体情况需要具体

2 回答144 围观

问细胞培养基问题求助？

sswei

MEM培养基（Minimum Essential Medium）是动物细胞培养中的常用的培养基，主要是贴壁细胞的培养。修改配方后也可用于其他类型细胞培养，例如如无钙（Ca）MEM培养基可被用于悬浮细胞的培养，而Hank’s平衡盐的MEM培养基可被用于二倍体细胞的培养。DMEM是一种含各种氨基酸和葡萄糖的培养基，是在MEM培养基的基础上研制的。与MEM比较增加了各种成分用量，同时又分为高糖型（高于4

4 回答806 围观

问求助 | 质粒保存在-20℃和-80℃会断裂或者消失吗？

loveliufudan

长期反复冻融会对质粒DNA的完整性造成一定的影响，导致质粒DNA的断裂或降解。此外，即使在-80°C下保存，长期保存也可能会导致质粒DNA的降解。因此，即使质粒A和质粒B、C一样都是在-20°C下保存的，由于经历了不同程度的冻融和保存时间，质粒A的完整性可能已经受到了影响，从而导致转染效果不如以前。建议重新制备新的质粒A，避免反复冻融，并尽量缩短其保存时间，以保证质粒DNA的完整性。

4 回答9747 围观

问求助：贴壁细胞的克隆形成实验，细胞总是长不起来，无法长出克隆，怎么办？

loveliufudan

如果您在进行贴壁细胞的克隆形成实验时，细胞总是长不起来，无法形成克隆，可能是以下原因之一：细胞密度太高：如果您在克隆形成实验中使用的细胞密度太高，可能会导致细胞在培养皿上太过密集，难以形成单个细胞克隆。建议尝试降低细胞密度，以便于单个细胞的分离和形成克隆。培养基成分不适宜：培养基成分对细胞的生长和分裂能力有很大影响，如果您使用的培养基成分不适宜，可能会影响细胞的克隆形成能力。建议检查培养基成分，尝

4 回答976 围观

问求问，这个真菌污染是哪种菌呢，感染源都可能是哪里

loveliufudan

这种症状与真菌感染相符，但不能确定是哪一种真菌。真菌感染通常会导致培养基浑浊、pH变化，细胞表现出明显的异常现象，例如细胞形态异常、生长迟缓、凋亡等等。因此，建议你进行真菌检测以明确是否为真菌感染，并采取相应的措施。常用的真菌检测方法包括PCR、荧光染色和培养等。另外，建议你对细胞房进行全面的清洁和消毒，确保细胞环境的卫生和安全。

3 回答320 围观

问血管平滑肌细胞膜片钳实遇到的问题求助

loveliufudan

您遇到的问题可能是由于以下原因导致的：细胞质溶液中的Ca2+浓度过高：高浓度的Ca2+会刺激平滑肌细胞收缩，因此需要控制细胞内外液中的Ca2+浓度，确保在实验过程中细胞不会受到过多的刺激。钳制电压过大：过大的钳制电压也可能导致平滑肌细胞收缩，因此需要逐渐调整钳制电压，找到合适的电压范围。内外液渗透压差异过大：内外液渗透压差异过大也可能导致细胞收缩，因此需要逐渐调整内外液的渗透压差异，确保在实验过程

2 回答492 围观

问关于RAW264.7细胞一氧化氮检测的问题

loveliufudan

一氧化氮(NO)在细胞中的产生通常是通过一氧化氮合酶(NOS)的催化反应完成的。在RAW264.7细胞中，诱导NOS的剂量和时间是关键因素，过低或过高的剂量或时间都可能导致NO测不出来的问题。另外，如果您使用的是颜色反应法或化学发光法等方法来检测NO，需要注意的是这些方法对样品中NO的灵敏度和特异性都有一定的要求。例如，颜色反应法中，如果存在其他氧化物质或化学物质可以干扰反应体系，则可能导致NO无

1 回答2078 围观

问求助巨噬细胞提取的一些问题

loveliufudan

在进行腹腔巨噬细胞的提取时，选择雌性小鼠的原因是由于雌性小鼠在生理周期上的变化会对腹腔巨噬细胞的数量和活性产生影响，因此在一些实验中选择在同一周期的雌性小鼠进行提取可以减少实验误差。此外，由于雄性激素可能影响巨噬细胞数量和功能，因此雄性小鼠在一些实验中不常用于腹腔巨噬细胞的提取。具体来说，雌性小鼠在生理周期的不同阶段，腹腔巨噬细胞数量和活性会发生变化。例如，雌性小鼠在发情期和妊娠期时，由于激素水平

3 回答217 围观

问流式设门

loveliufudan

在没有对照的情况下，可以使用单荧光染色的细胞作为门控制。选取一个单荧光染色的细胞，比如说只标记CD4，而不标记其他细胞表面标记物的细胞，将其设为负对照门，这样可以帮助区分阳性和阴性细胞。如果你需要定量分析，可以使用流式细胞计数器进行计数。但需要注意的是，使用单荧光染色细胞作为门仅适用于仅有一个荧光通道的情况，如果有多个荧光通道需要使用时，需要针对每个通道设置不同的门。

2 回答857 围观

问组织脱水后有凹陷，部分切片镜下有发散的感觉，大小组织都有这种情况，脱水程序如下会是什么原因如何解决

loveliufudan

可能的原因：组织脱水不充分或时间不够，导致残留液体在脱水后形成凹陷和发散感。解决方法：对于脱水不充分或时间不够的情况，可以增加脱水时间和浓度，并且确保每个步骤的时间足够，同时确保脱水时组织浸润充分，以便组织内的液体充分被脱出。另外，如果组织切片时出现凹陷和发散感，可以尝试在石蜡浸润前进行压片处理，以便使组织均匀压平，并避免在脱水和包埋过程中出现空洞和气泡。同时，在包埋时，也要确保组织均匀包裹在石蜡

3 回答252 围观

问检测TERT的表达，分子量不太对，有杂带带

loveliufudan

很可能是样品的质量不佳，如受到不适当的处理、冻存和解冻等，导致蛋白质降解或变性，所以产生了杂带。

3 回答292 围观

问Thp1细胞加PMA诱导成巨噬细胞的相关问题？

dxy_mqg1dtg8

不需要一直加，一旦诱导成巨噬细胞就可以不加PMA，并在新的培养基中进行后续的药物处理。

6 回答1319 围观

问做土壤微生物的，需要定量检测土壤中某一真菌的生物量。

loveliufudan

可以通过设计特异性引物并使用qPCR技术来定量检测特定真菌的DNA含量，从而推测其生物量。具体的实验步骤大概如下：首先需要收集士土样品，将其进行粉碎和筛选，以获得较为均匀的样品。提取士土样品中的真菌DNA，可以采用商用的DNA提取试剂盒或自制方法。设计特异性引物，需要通过生物信息学方法从已知真菌的基因序列中筛选出比较保守的区域，并进行引物设计和验证。进行qPCR反应，将提取到的真菌DNA和特异性引

4 回答932 围观

问请问一下这样的RNA还有救吗？

dxy_mqg1dtg8

不能用了吧，出现双峰说明RNA已经被污染了，而且A260/A280正常应该在2.0左右，你这个太小了，A260/A230应该在1.8-2.2之间，你这个也太小了。

5 回答966 围观

问代谢组学数据处理求赐教

沫子大大

是的，同一个代谢物在两次检测中得到的编号不一样，m/z和RT值不一样，可能是由于两次送检的样品不完全一样导致的。质谱分析通常会受到样品制备、质量、保存和运输等因素的影响，这些因素可能会导致检测结果的差异可能会导致代谢产物的含量和组成发生变化从而影响其质谱特征此外，样品制备过程中的误差、仪器的精度和灵敏度等因素也可能会导致检测结果的差异因此，为了获得可靠的质谱分析结果，需要在制备样品和进行质谱分析前

4 回答251 围观

问RNA pull-down做WB结果不稳定

sswei

可能样品中的互作蛋白表达量很低或样品中存在杂蛋白。

3 回答454 围观

问磁珠（美天旎）分选后的细胞，影响后组蛋白组学等分析这个问题怎么办？

dxy_zl01okr9

美天旎磁珠直径只有50nm，不影响后续蛋白组分析的

2 回答777 围观

关于丁香通

公司信息

个人用户

企业机构

无忧采购轻松科研

提问

扫一扫

实验小助手

扫码领资料

反馈

TOP

打开小程序