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WB求助
balalaLy
200mA 1.5小时,如果是70以下的蛋白应该没问题的。如果你的蛋白分子量大,可能就是没有转过去。另外抗体的浓度和抗体稀释液需要调一下。
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问
四甲基乙二胺缓冲溶液TEMED-HCl缓冲溶液 PH=4.7如何配置?
土井挞克树
配置步骤:准确称取1.1621克四甲基乙二胺,先配成1000毫升10mmol/L的TEMED溶液,再以1mol/L的盐酸调节PH到4.7即可.
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问
关于GBR膜屏障测试:看到有人做的把细胞接到膜上培养,染色后看细胞浸润深度,不太理解怎样接到膜上培养7天,怎样保证细胞只在表面呢?
土井挞克树
有专门的接种膜,细胞接种后只停留在表层,不会向下增长
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问
大鼠抑郁症模型中,足底电击怎么实现?
sswei
将实验组大鼠暴露于带电的穿梭箱的一侧,进行60次不可逃避的电刺激,电流0.85mA,每次电击随机5-25秒,每次电击后间隔5-25秒开始下一次电击。
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问
4t1细胞,传代后这种污染培养箱怎么处理?
此用户已注销
我们的通常处理是先用75%的酒精擦拭内壁,然后用甲醛+高锰酸钾熏蒸一个晚上,然后通风一整天(同时打开紫外线照射)。
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问
组织切片可以观察到生物发光吗?
balalaLy
生物发光一般活体可以观察,动物内部脏器或者想要观察局部细胞的情况也可以将局部组织取出或做成切片。这个跟你使用的发光材料有关。
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问
做细胞荧光实验时,底物荧光素是如何进入小鼠体内的?最低需要多少剂量?
sswei
荧光素是腹腔注射或尾部静脉注射进入小鼠体内的,约一分钟就可以扩散到小鼠全身。荧光素的浓度是150mg/kg 。20克的小鼠需要3毫克的荧光素。常用方法是腹腔注射,这种方法扩散较慢、开始发光慢、持续发光长。若进行荧光素静脉注射,这种方法扩散快、开始发光快,但发光持续时间很短。
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问
细胞培养基问题求助?
sswei
MEM培养基(Minimum Essential Medium)是动物细胞培养中的常用的培养基,主要是贴壁细胞的培养。修改配方后也可用于其他类型细胞培养,例如如无钙(Ca)MEM培养基可被用于悬浮细胞的培养,而Hank’s平衡盐的MEM培养基可被用于二倍体细胞的培养。DMEM是一种含各种氨基酸和葡萄糖的培养基,是在MEM培养基的基础上研制的。与MEM比较增加了各种成分用量,同时又分为高糖型(高于4
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问
求助:贴壁细胞的克隆形成实验,细胞总是长不起来,无法长出克隆,怎么办?
loveliufudan
如果您在进行贴壁细胞的克隆形成实验时,细胞总是长不起来,无法形成克隆,可能是以下原因之一:细胞密度太高:如果您在克隆形成实验中使用的细胞密度太高,可能会导致细胞在培养皿上太过密集,难以形成单个细胞克隆。建议尝试降低细胞密度,以便于单个细胞的分离和形成克隆。培养基成分不适宜:培养基成分对细胞的生长和分裂能力有很大影响,如果您使用的培养基成分不适宜,可能会影响细胞的克隆形成能力。建议检查培养基成分,尝
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问
做WB时,小分子转膜时间怎么控制?
是TTT
普通Western转膜液200mA,一分钟转1kd,10-30kd转10-30分钟。小分子wb没有条带可能不在于转膜没成功,关键在电泳,可以调整下层胶浓度跑小分子蛋白
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问
细胞做了si之后,还能用胰酶消化下来做其他的实验吗?求赐教
慢慢_-_
可以的,像常规的细胞表型实验和免疫荧光都可以做的。
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问
Transwell细胞迁移试验,用什么启动迁移呢?我的是人脐静脉内皮细胞
慢慢_-_
上室接种用无血清的DMEM稀释的细胞悬液,下室接种15%或者20的%FBS的DMEM,培养适当的时间后,上室细胞会趋向营养成分高的下室迁移。
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问
Thp1细胞加PMA诱导成巨噬细胞的相关问题?
dxy_mqg1dtg8
不需要一直加,一旦诱导成巨噬细胞就可以不加PMA,并在新的培养基中进行后续的药物处理。
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问
做土壤微生物的,需要定量检测土壤中某一真菌的生物量。
loveliufudan
可以通过设计特异性引物并使用qPCR技术来定量检测特定真菌的DNA含量,从而推测其生物量。具体的实验步骤大概如下:首先需要收集士土样品,将其进行粉碎和筛选,以获得较为均匀的样品。提取士土样品中的真菌DNA,可以采用商用的DNA提取试剂盒或自制方法。设计特异性引物,需要通过生物信息学方法从已知真菌的基因序列中筛选出比较保守的区域,并进行引物设计和验证。进行qPCR反应,将提取到的真菌DNA和特异性引
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问
请问一下这样的RNA还有救吗?
dxy_mqg1dtg8
不能用了吧,出现双峰说明RNA已经被污染了,而且A260/A280正常应该在2.0左右,你这个太小了,A260/A230应该在1.8-2.2之间,你这个也太小了。
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问
代谢组学数据处理求赐教
沫子大大
是的,同一个代谢物在两次检测中得到的编号不一样,m/z和RT值不一样,可能是由于两次送检的样品不完全一样导致的。质谱分析通常会受到样品制备、质量、保存和运输等因素的影响,这些因素可能会导致检测结果的差异可能会导致代谢产物的含量和组成发生变化从而影响其质谱特征此外,样品制备过程中的误差、仪器的精度和灵敏度等因素也可能会导致检测结果的差异因此,为了获得可靠的质谱分析结果,需要在制备样品和进行质谱分析前
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问
白色念珠菌培养基里出现红色小虫感觉有点像螨虫
蓝莓小布丁
如果在早期发现混入一只小虫,及时吸出来对实验不会有太大影响,注意保持培养基卫生即可。
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问
请问怎么查看th0活化成功与否?
loveliufudan
在进行包板过程时,需要注意以下几点:充分洗涤酶解过的包板:在使用新的包板之前,需要充分洗涤酶解过的包板,以去除任何可能存在的残留物质,防止对实验产生影响。确保包板浓度正确:包板浓度过高或过低都会影响细胞的激活,一般建议使用厂家推荐的浓度。在使用时,可以根据实验需要进行优化和调整。培养板质量问题:细胞培养板的质量也可能影响细胞的激活和诱导分化。建议使用无菌、无毒、无蛋白质吸附的高质量细胞培养板,并在
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问
求助,怎么做成下面的图
是TTT
image j也可以,和蛋白条带一样的
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问
磁珠(美天旎)分选后的细胞,影响后组蛋白组学等分析这个问题怎么办?
dxy_zl01okr9
美天旎磁珠直径只有50nm,不影响后续蛋白组分析的
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