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        免疫印迹单组分TMB沉淀型显色液

        相关实验:免疫印迹与免疫检测实验

        user-title

        dxy_5wgdcvu8

        PVDF膜上包被了抗原,HRP酶标记了抗体,然后单组分的TMB沉淀性显色液为显色底物,但是使用配制出来的单组分TMB显色液在膜上显示的条带较浅,不知道大佬们有没有相关的经验或者具备可行的单组分TMB显色液配方,让小弟试一试

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        2 个回答

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        单组分TMB显色液是一种常用的酶标记试剂,可以用于检测Western blot和ELISA等实验中的蛋白质。使用单组分TMB显色液在膜上显示的条带较浅,可能是由于显色液的浓度不足、显色时间不够长等原因造成的。

        为了获得更深的显色效果,您可以尝试以下方法:

        增加显色液的浓度:可以尝试增加单组分TMB显色液的浓度,但需注意不要过度稀释,以避免背景杂色增加。

        延长显色时间:可以延长显色时间,但不要过度延长时间,以避免过多的背景杂色影响结果。

        检查试剂质量:如果使用的试剂已经过期或质量有问题,可能会影响显色效果。建议更换新的试剂或者尝试其他品牌的单组分TMB显色液。

        调整缓冲液的pH值:显色液的pH值对显色效果也有一定影响,可以尝试调整缓冲液的pH值,以获得更好的显色效果。

        以下是比较常用的单组分TMB显色液配方:

        10 ml 0.1 M sodium acetate缓冲液,pH 6.0

        100 μl 30% H2O2

        10 mg TMB

        将以上三种试剂混合均匀,光照保护后使用。但是需要注意的是,每个实验可能需要调整配方和显色条件以获得最佳效果。

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        可以提高TMB沉陷液的浓度,可能是浓度太低的原因

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