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问
请问血清灭活的最佳温度和时间是多少?
dxy_ud4edxd5
血清灭活通常采用56℃水浴30分钟,灭活补体成分。注意水浴锅温度要准确,血清完全解冻后混匀再放入,时间到后立即取出置于冰上降温。
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问
刺激266-6细胞炎症的cck8
dxy_tri096t8
为什么我的266细胞培养不怎么长呢,细胞很疏松还很容易飘
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问
刺激266-6细胞炎症的cck8
萧莣苼
CCK-8测的是细胞活力/增殖,测炎症不太科学呀。如果LPS只是诱导炎症(释放IL-6、TNF-α等)而没有大规模杀伤细胞,CCK-8是检测不到差异的。LPS浓度:从 0.1、0.5、1、5、10 μg/mL 开始(最大不超过10)刺激时间:3h、6h、12h、24h(炎症峰值在3–6h)血清:换液时用 无血清或1–2%低血清 培养基(避免血清中抗炎因子干扰)检测指标,改为:• qPCR测IL-6
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问
用胶质瘤细胞跑Bloom蛋白,内参一直都有没有目的怎么办
萧莣苼
BLoom蛋白理论分子量约159 kDa,你标记200 kDa可能偏高了,建议试试优化转膜条件(降甲醇、延长时间),同时加大上样量。
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问
家人们想自己配置碱裂解法质粒提取的试剂的话对采购的原料纯度要求高吗?
萧莣苼
Tris、EDTA、NaOH、SDS、乙酸钾、冰醋酸、葡萄糖、NaCl 等常规溶质 AR 级杂质含量对质粒提取的影响极小,只要没有明显的重金属或强氧化性杂质即可。SDS 买质量稳定的品牌即可,不需要特意分子生物学级。水:这是最容易被忽视但最关键的一环。必须用 Milli-Q 超纯水 或 DEPC 处理水(注意 DEPC 对 Tris 有反应,配含 Tris 的溶液时建议用焦碳酸二乙酯处理水后再高压
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问
thp-1诱导成M1加ox-ldl,可以同步加吗,同步的话M1药物浓度要降低吗?
dxy_26no3ak
可以同步加,但建议优化时序。THP-1用PMA 100nM诱导48h贴壁,再换无血清培养基静息24h。同步方案:LPS 100ng/mL + IFN-γ 20ng/mL与ox-LDL 50-100μg/mL同时加入,刺激24-48h。M1诱导剂浓度通常不需降低,但需预实验验证:设ox-LDL梯度(25/50/100μg/mL),检测CD86、iNOS、CD206表达及细胞存活率。注意:ox-LDL
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问
Mira Fl Plus
萧莣苼
MiraFLPlus是Countstar的台式全自动荧光细胞分析仪,你是要这款设备吗?
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问
想问一下加了MSX的培养基在2-8的冰箱能放多久啊
萧莣苼
MSX(甲硫氨酸亚砜亚胺)在2-8°C通常可稳定保存2-4周,10天一般没问题。过滤除菌后避光冷藏,稳定性较好,建议分装避光保存,使用前检查沉淀或变色。若用于细胞筛选,建议做对照验证抑制效果。
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问
筛选THP-1细胞极化成M0细胞后在X线照射下的最适剂量和所用药物的浓度,但是照射后M0细胞肥大OD值随照射剂量升高
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问
补体介导的细胞毒试验 小鼠胸腺细胞 图片
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问
实验做了小鼠肺泡灌洗,由于后续打算提肺组织单细胞悬液上流式,想问下肺泡灌洗时需要结扎一侧肺再灌洗,留未灌洗肺提单细胞悬液!
dxy_3irtfin4
老师想问下您最后是怎么处理的!感谢
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问
western blot 分离胶对应的浓度与蛋白大小(KD)的关系是怎么样的呢
周末也要努力呀
胶浓度越大跑的分子量越小,反之跑大分子得用浓度小的胶
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问
求助!小鼠腓肠肌的取材和HE染色
未来皆得如意来
从小鼠小腿从跟腱部位小心剪开皮肤,镊子拉扯皮肤直至完整暴露小腿及关节以上的肌肉组织,然后用手术剪贴着小腿骨完整剪下,内侧包含了一条与腓肠肌颜色完全不同的,颜色更深一点的肌肉(比目鱼肌),用镊子夹着比目鱼肌白色筋膜小心撕下,剩下的一大坨就是腓肠肌。
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问
小鼠肺泡灌洗液瑞氏-吉姆萨染色
dxy_91wmds88
细胞膜有不规则刺突,考虑细胞涨破影响染色效果,导致最后核的形态不是很清晰
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问
同源重组的原理是什么呀 同源臂是什么呀?为什么同源重组的酶可以不用考虑目的片段上有没有呀
汤姆卜丽波
同源重组又称一般性重组。同源重组发生在DNA的同源序列之间,通过配对、链的断裂和再连接,而产生片段交换的过程,是最基本的重组方式,同源臂是指两个DNA片段之间的相似性,主要是因为有同源序列,所以不同考虑目的片段
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问
为什么软琼脂克隆形成实验的0.3%上层胶融化了
土井挞克树
考虑是上层胶浓度太低了,建议提高上层胶浓度
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问
求教 细胞免疫荧光染色顺序
dxy_wq08m8r2
求教我们用DAPI,鬼笔环肽,尼罗红细胞核,肌鞘,脂质有详细的实验步骤吗
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问
为什么质粒提出来了跑胶确没有条带?
dxy_0ba42et7
解决了嘛博主,我也有相同的问题
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3443 围观
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问
皮肤组织提RNA如何研磨。
dxyc42u
可以选择用超声或者组织研磨仪。
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问
小鼠心梗建模结扎位置找不到
土井挞克树
需要以心尖为参考点,偏右侧结扎。
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