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问
想请教一下各位老师,目前在做金黄色葡萄球噬菌体,有分离出一株噬菌体,但噬菌斑形态较小,滴度也很低
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问
请问血清灭活的最佳温度和时间是多少?
dxy_ud4edxd5
血清灭活通常采用56℃水浴30分钟,灭活补体成分。注意水浴锅温度要准确,血清完全解冻后混匀再放入,时间到后立即取出置于冰上降温。
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问
刺激266-6细胞炎症的cck8
dxy_tri096t8
为什么我的266细胞培养不怎么长呢,细胞很疏松还很容易飘
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问
刺激266-6细胞炎症的cck8
萧莣苼
CCK-8测的是细胞活力/增殖,测炎症不太科学呀。如果LPS只是诱导炎症(释放IL-6、TNF-α等)而没有大规模杀伤细胞,CCK-8是检测不到差异的。LPS浓度:从 0.1、0.5、1、5、10 μg/mL 开始(最大不超过10)刺激时间:3h、6h、12h、24h(炎症峰值在3–6h)血清:换液时用 无血清或1–2%低血清 培养基(避免血清中抗炎因子干扰)检测指标,改为:• qPCR测IL-6
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问
用胶质瘤细胞跑Bloom蛋白,内参一直都有没有目的怎么办
萧莣苼
BLoom蛋白理论分子量约159 kDa,你标记200 kDa可能偏高了,建议试试优化转膜条件(降甲醇、延长时间),同时加大上样量。
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问
家人们想自己配置碱裂解法质粒提取的试剂的话对采购的原料纯度要求高吗?
萧莣苼
Tris、EDTA、NaOH、SDS、乙酸钾、冰醋酸、葡萄糖、NaCl 等常规溶质 AR 级杂质含量对质粒提取的影响极小,只要没有明显的重金属或强氧化性杂质即可。SDS 买质量稳定的品牌即可,不需要特意分子生物学级。水:这是最容易被忽视但最关键的一环。必须用 Milli-Q 超纯水 或 DEPC 处理水(注意 DEPC 对 Tris 有反应,配含 Tris 的溶液时建议用焦碳酸二乙酯处理水后再高压
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问
thp-1诱导成M1加ox-ldl,可以同步加吗,同步的话M1药物浓度要降低吗?
dxy_26no3ak
可以同步加,但建议优化时序。THP-1用PMA 100nM诱导48h贴壁,再换无血清培养基静息24h。同步方案:LPS 100ng/mL + IFN-γ 20ng/mL与ox-LDL 50-100μg/mL同时加入,刺激24-48h。M1诱导剂浓度通常不需降低,但需预实验验证:设ox-LDL梯度(25/50/100μg/mL),检测CD86、iNOS、CD206表达及细胞存活率。注意:ox-LDL
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问
Mira Fl Plus
萧莣苼
MiraFLPlus是Countstar的台式全自动荧光细胞分析仪,你是要这款设备吗?
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问
想问一下加了MSX的培养基在2-8的冰箱能放多久啊
萧莣苼
MSX(甲硫氨酸亚砜亚胺)在2-8°C通常可稳定保存2-4周,10天一般没问题。过滤除菌后避光冷藏,稳定性较好,建议分装避光保存,使用前检查沉淀或变色。若用于细胞筛选,建议做对照验证抑制效果。
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问
筛选THP-1细胞极化成M0细胞后在X线照射下的最适剂量和所用药物的浓度,但是照射后M0细胞肥大OD值随照射剂量升高
413 围观
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问
补体介导的细胞毒试验 小鼠胸腺细胞 图片
589 围观
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问
原核蛋白表达不出来,IPTG条件优化
dxy_f2af9zme
有针对蛋白抗体的话可以先 WB 压一下;还可以调整诱导温度(比如25°C、30°C)、IPTG 浓度(0.5 有点高)。我们一般做表达小试,会考虑 16°C/25°C/30°C/37°C + 0.1/0.2/0.3/0.5/1 IPTG + 8/12/18 h 诱导时间,多个条件调试出最佳表达条件,实在不表达就需要考虑换载体/系统了。
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问
western blot 分离胶对应的浓度与蛋白大小(KD)的关系是怎么样的呢
周末也要努力呀
胶浓度越大跑的分子量越小,反之跑大分子得用浓度小的胶
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问
求助!小鼠腓肠肌的取材和HE染色
未来皆得如意来
从小鼠小腿从跟腱部位小心剪开皮肤,镊子拉扯皮肤直至完整暴露小腿及关节以上的肌肉组织,然后用手术剪贴着小腿骨完整剪下,内侧包含了一条与腓肠肌颜色完全不同的,颜色更深一点的肌肉(比目鱼肌),用镊子夹着比目鱼肌白色筋膜小心撕下,剩下的一大坨就是腓肠肌。
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问
小鼠肺泡灌洗液瑞氏-吉姆萨染色
dxy_91wmds88
细胞膜有不规则刺突,考虑细胞涨破影响染色效果,导致最后核的形态不是很清晰
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问
为什么软琼脂克隆形成实验的0.3%上层胶融化了
土井挞克树
考虑是上层胶浓度太低了,建议提高上层胶浓度
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问
小鼠背部皮肤HE染色结果分析
dxy_n9i5upx
请问一下哪一部分是表皮层,哪一部分是真皮层呀?
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问
rpm换算
sswei
在3cm的旋转半径下,每300xg的离心力的速度约为2990rpm。每分钟转数(RPM)和相对离心力(xg)之间的关系为:g=(1.118×10-5)RS2,其中g是相对离心力R是转子半径,单位为厘米,S是离心机每分钟的转速.
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问
为什么质粒提出来了跑胶确没有条带?
dxy_0ba42et7
解决了嘛博主,我也有相同的问题
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3450 围观
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问
小鼠心梗建模结扎位置找不到
土井挞克树
需要以心尖为参考点,偏右侧结扎。
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