• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购

        为什么质粒提出来了跑胶确没有条带?

        相关实验:含有目的基因真核表达 pEGFP-C1 载体的构建实验

        user-title

        dxy_l925frqr

        提质粒,测出来浓度90多,用通用引物和本身的引物做质粒pcr也有正确的条带,但是凝胶电泳确没有条带,原因是什么呢?

        wx-share
        分享

        6 个回答

        user-title

        jupiter鑫

        有帮助

        楼主问题解决了吗? 我也遇到这个问题,希望大家多多交流

        user-title

        Gaara205

        有帮助

        我也遇到这样的问题,楼主最后解决了没?

        user-title

        小何尖尖角DIJB

        有帮助

        同学,最后你是怎样解决的呀,我最近也遇到和你一模一样的问题

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        可能是样本量太小,或者是质粒太小,胶分别不出来

        user-title

        dxy_l925frqruser-title

        质粒七千多,加了五微升

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        高质量提取的质粒 DNA 实际上不能保证在 PCR 实验中得到正确的条带。在凝胶电泳中没有条带有多种可能的原因,包括:

        1.PCR 反应条件不适宜:过高或过低的温度,不适当的添加剂,不合适的循环参数都可能影响 PCR 效果。

        2.污染:实验中的污染物,如酶,核酸等,可能干扰 PCR 反应。

        3.引物失效:如果引物设计不当或引物质量不佳,可能导致 PCR 失效。

        4.目标基因序列不纯:如果质粒中存在杂合子或其他非目标基因序列,可能干扰 PCR 反应。

        建议检查实验条件,排除污染,重新评估引物,或重新提取质粒,以确保得到正确的结果。

        user-title

        dxy_l925frqruser-title

        pcr条带是对的,但是跑质粒没有条带,也加了loading

        user-title

        申东熙老伯

        有帮助

        测出来浓度90多,不太高,凝胶电泳上样时可以加入4微升左右的质粒加适当loading看一下。

        user-title

        dxy_l925frqruser-title

        加了loading,pcr条带是对的,但是质粒跑不出来条带

        user-title

        申东熙老伯

        质粒是反复冻融了吗?还是说没有等待完全溶解就上样了?反复冻融质粒可能会降解,没完全溶解可能就直接没洗到DNA。

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序