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Tris、EDTA、NaOH、SDS、乙酸钾、冰醋酸、葡萄糖、NaCl 等常规溶质 AR 级杂质含量对质粒提取的影响极小,只要没有明显的重金属或强氧化性杂质即可。SDS 买质量稳定的品牌即可,不需要特意分子生物学级。
水:这是最容易被忽视但最关键的一环。必须用 Milli-Q 超纯水 或 DEPC 处理水(注意 DEPC 对 Tris 有反应,配含 Tris 的溶液时建议用焦碳酸二乙酯处理水后再高压灭菌,或直接购买无核酸酶水)。普通蒸馏水/双蒸水可能含活性核酸酶,会降解你的质粒或 RNA 污染。
RNase A(如果加到溶液 I 中):市售 RNase A 必须确认是 DNase-free 的。如果是自己从牛胰脏提取或买普通生化级 RNase A,需要自行处理(如 100°C 加热 15 min 灭活 DNase)后再使用。
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