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        求教 细胞免疫荧光染色顺序

        相关实验:细胞免疫荧光

        user-title

        子若倾兮

        求教细胞免疫荧光染色的顺序。

        想染粘着斑蛋白和鬼笔环肽还有DAPI

        请问应该在敷完一抗后加鬼笔环肽再加二抗,还是敷完一抗二抗再加鬼笔环肽呢

        鬼笔环肽是罗丹明标记的,二抗是山羊抗兔488

        感谢

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        4 个回答

        user-title

        balalaLy

        有帮助

        我一般是先染一抗二抗,再染phalloidin,室温1h就行,最后dapi

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        建议按照以下步骤进行:

        固定和渗透化细胞样品。

        加入第一抗体(粘着斑蛋白抗体)并孵育。

        用 PBS 冲洗样品,以去除未结合的第一抗体。

        加入第二抗体(山羊抗兔 IgG 的荧光素标记物)并孵育。

        用 PBS 冲洗样品,以去除未结合的第二抗体。

        加入鬼笔环肽荧光素标记物,并孵育。

        用 PBS 冲洗样品,以去除未结合的鬼笔环肽荧光素标记物。

        加入 DAPI 核染料,孵育。

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        应该在敷完一抗后加鬼笔环肽再加二抗

        user-title

        sswei

        有帮助

        鬼笔环肽染色可与抗体一起使用,可以添加在一抗或二抗孵育步骤时共染。

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