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实验问答

23,118,476 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

问老师们好，我想保存WB结果比较好的膜，可以之后再显影看结果那种，请问有法子吗？能保存多久呢?

土井挞克树

保存膜可以浸泡在PBS或TBS中，4度放置。一般能保存一周左右

5 回答11108 围观

问检测大鼠尿蛋白，IL-6指标

Dr_劉医生

检验科用的也是ELISA来检测，只是用的可能是全自动的生化分析仪，更高效方便；自己测IL-6的话，用的是试剂盒，方法原理是一样的，效率不同而已。

4 回答488 围观

问想请问一下在对秀丽隐杆线虫进行平均荧光强度分析时,阈值是选择默认值还是自己根据图片的实际情况设定一个固定值?非常感谢

土井挞克树

我一般是先用默认值看结果，不理想的话再调整固定值

3 回答262 围观

问求聚丙烯酰胺的胶银染有什么好办法？

土井挞克树

银染色步骤：1.固定：固定液冰醋酸： 150ml(10%)双蒸水：1350ml把经冷却的胶板置于盛有1.5L的塑料盘中，摇床震荡30min左右。2.洗胶：把经固定的胶板置于盛有1.5L双蒸水的塑料盘中清洗两次，每次2-4min。3.染色：染色液硝酸银： 1.5g(0.1%)37%甲醇：2.25ml加双蒸水至1.5L把清洗干净的胶板置于盛有染色液的塑料盘中，摇床震荡30min左右。4.洗胶：把

3 回答565 围观

问救救救WB求助，好心人帮帮我吧

土井挞克树

1.300kd大分子建议分离胶用6%，浓缩胶4%。2.选择分子量最大的预染MARKER，我用的是250kd，然后在电泳槽周围堆满冰，120ma使劲跑吧，跑两个小时换一次电泳液，一直跑到250kd的MARKER，离开胶释放到电泳液中，大概要用5个小时

3 回答437 围观

问ICSI发育率低感觉操作没什么问题这是为什么

Dr_劉医生

ICSI发育率低的原因有很多，其中包括：精子质量差、卵子质量差、体外受精操作技术不熟练、培养环境不良等。

4 回答362 围观

问7500软件不能用，这个情况该怎么处理

huarenqiang5

建议重新下载并按提示安装相应的工具包及插件才能够使用。

3 回答984 围观

问单细胞组学与传统组学比较的优势和劣势是什么？

loveliufudan

单细胞组学和传统组学是两种研究细胞和组织的方法，它们具有一些不同的优势和劣势。单细胞组学的优势：1. 细胞异质性解析：单细胞组学能够分析单个细胞的基因表达和基因组信息，揭示细胞群体内的异质性和细胞类型的多样性，从而更好地理解细胞发育、分化和功能。2. 检测罕见细胞类型：单细胞组学可以检测和分析罕见细胞类型，如干细胞、癌细胞亚克隆或少数细胞亚群，这些细胞在传统组学研究中可能被掩盖或无法检测到。3.

3 回答2388 围观

问WB条带呈现出笑脸样条带是怎么回事？

陈科比啊

胶没配好，比如胶中有颗粒或气泡，凝胶没冷却好

4 回答2513 围观

问高血压动物模型血压随时间变化统计学方法问题

loveliufudan

在对高血压动物模型的收缩压随时间变化进行统计学分析时，您可以考虑以下方法：1. 两因素方差分析（Two-way ANOVA）：这是一种适用于比较多个处理组在不同时间点的统计方法。因为您的数据包括时间因素和处理组因素，使用两因素方差分析可以同时考虑这两个因素对收缩压的影响，并评估它们之间的交互作用。2. 多重比较（Multiple comparisons）：如果在两因素方差分析中发现时间和处理组之间

2 回答960 围观

问细胞条形码，数字PCR

土井挞克树

你可以简单理解为条形码是细胞的标签，可看作一段特异序列，以此为参考设计引物做dpcr

2 回答381 围观

问质谱成像目前的科研应用与转化情况

sswei

在临床研究中，大约85%的MALDI成像与癌症研究有关，其它15%的MALDI临床研究应用包括帕金森氏症、老年痴呆症、糖尿病、非酒精性脂肪肝以及肿瘤边缘检测。

4 回答504 围观

问全分子成像和单分子成像的区别

sswei

全分子成像提供了用一个系统发现、识别和测量分子目标，对各种各样的分子类型进行无标签成像研究，从最小的样本中提取最大的信息，明确和客观地解释分子成像信息。单分子成像可以分为两类：一类是在外力作用下研究单分子活动，通常通过原子力显微镜（AFM）、光镊（OT）或磁镊（MT）将力施加到单个分子上。另一类就是用荧光显微成像观察生物系统中单分子活动。

4 回答534 围观

问质谱成像的主要临床应用有哪些？

sswei

MALDI成像在肿瘤学、神经疾病学、心脏病学和风湿病学等生物医学研究领域的应用范围。MALDI成像应用包含蛋白质表征、糖蛋白分析、质量控制应用、聚合物分析和超高通量筛选等。在临床研究中，大约85%的MALDI成像与癌症研究有关，其它15%的MALDI临床研究应用包括帕金森氏症、老年痴呆症、糖尿病、非酒精性脂肪肝以及肿瘤边缘检测。

4 回答762 围观

问请问如何对差异代谢物做进一步的筛选？

sswei

常见的差异代谢物筛选方法主要有以下三种:1.倍数变化法(FC值)2.T检验法(P值、FDR值)3.(O)PLS-DA法(VIP值)

4 回答3517 围观

问scRNA-seq对细胞形态比较敏感，由于细胞形状和仪器设计的不兼容性，许多细胞类型，如肌细胞或神经元，不能被描绘，怎么解决

土井挞克树

可以把肌细胞制备成单细胞悬液然后做空间组学+代谢组学，利用多组学研究来解决这种描绘差异

2 回答177 围观

问透射电镜的细胞样品处理

loveliufudan

对于贴壁细胞的处理方法：用PBS或其他缓冲液洗涤细胞，以去除培养基残留。用4%的草酸或0.1%的乳酸洗涤细胞，以去除细胞表面的膜结构，如细胞外基质、紧密连接等。用2.5%的缓冲醛固定细胞，以保持其形态结构不变。用PBS或其他缓冲液洗涤细胞，以去除残留的草酸或乳酸。用1%的OsO4后缀处理，以增强细胞组织的对比度和可见性。用醋酸异丙酯、丙酮等有机溶剂脱水，将细胞样品转移到透明树脂中。树脂固化后，用超

3 回答1276 围观

问cDNA 一扩跑电泳胶时留在点样空里跑不出来是什么情况呢？

huarenqiang5

可能是以下几点原因:1.条带中（目的DNA）掺有基因组DNA（因基因组DNA分子量很大，不能从上样孔中出来）。2.可能条带中（目的DNA）掺有蛋白质（因蛋白质与DNA一起，分子量很大，不能从上样孔中出来）。3.电压没加上，或你电泳缓冲液是用蒸馏水配制的，没有离子，不能导电，DNA没有泳动。

2 回答1832 围观

问请问紫外交联和化学交联哪一种更好一点

loveliufudan

如果要保留蛋白质的原始结构和功能，可以优先考虑紫外交联；如果需要稳定固定样品中的相互作用，并且样品的结构和功能不受交联剂的影响，可以选择化学交联。

3 回答879 围观

问大家有做过2周小鼠的大理石埋藏实验吗？

天冷路滑

看了jove视频，要摆放为4X5行列的

2 回答857 围观

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