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        请问一下,怎么鉴别制备的M13 DNA 是单链还是双链?感谢!

        相关实验:单链和双链 M13 噬菌体 DNA 的大规模制备

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        dxy_q3gjeo5r

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        3 个回答

        user-title

        sswei

        有帮助

        看碱基,有T为DNA.双链DNA分子中碱基必须符合A=T且C=G,只要有一项不符合就只能是单链.

        user-title

        loveliufudan

        有帮助

        要鉴别制备的M13 DNA是单链还是双链,可以通过几种常见的方法进行:

        1. 热变性:将样品加热至95°C以上,然后迅速冷却至0°C。如果M13 DNA是双链的,热变性会使其解开成两条单链。此时,如果样品中有单链DNA存在,它们可能会在0°C时重新形成双链结构。可以通过琼脂糖凝胶电泳或核酸染色来观察DNA的结构变化。

        2. DNase I敏感性:将M13 DNA与DNase I(脱氧核糖核酸酶I)一起处理。DNase I主要降解双链DNA,而对单链DNA相对不敏感。如果M13 DNA是双链的,DNase I处理后会导致DNA降解;如果是单链的,DNA会相对稳定。

        3. DNA互补杂交:通过与其互补的寡核苷酸或DNA探针进行杂交实验。如果M13 DNA是双链的,探针可以与其互补序列杂交并形成稳定的双链结构。而如果是单链的,探针与M13 DNA的互补序列杂交会出现较弱的杂交信号或无杂交。

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        灵枢天问

        有帮助

        最常用的就是紫外光谱法。单链DNA由于内部碱基暴露,所以A260处的吸收峰较高。相对的,双链DNA的碱基在双链内,A260的吸收峰明显不及单链DNA。

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