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实验问答

31,763,572 科研人在看

问培养小鼠小肠类器官所用的培养基有具体的配比方案吗？

loveliufudan

基础培养基成分： 1. DMEM/F12培养基：将Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium (DMEM)和Ham’s F12培养基以1:1的比例混合。添加剂成分： 1. 胰岛素（Insulin）：5-10 μg/mL 2. 转铁蛋白（Transferrin）：5-10 μg/mL 3. 肾上腺素（Epinephrine）：1-10 μM 4. 氯化钠（NaCl）：120

3 回答1117 围观

问求助:min细胞培养遇到的问题？

小芙fu

可能培养基问题细胞密度和传代比例

4 回答783 围观

问RAW264.7诱导破骨细胞

loveliufudan

首先，对于未染色之前没有观察到典型的破骨细胞，可能是因为破骨细胞需要更长的时间来分化和形成。您在第6天进行TRAP染色，但有时需要更长的时间才能观察到明显的破骨细胞形成。您可以尝试延长培养时间，观察是否会出现破骨细胞的特征。关于染色后出现很多小细胞呈红色的情况，这可能有几种可能的解释。首先，这些小红色细胞可能是RAW264.7细胞的前体或早期破骨细胞，它们正在分化并准备形成成熟的破骨细胞。这可以解

3 回答3800 围观

问统计学小白，请教关于多因素回归的问题

loveliufudan

你的研究问题涉及到多个因变量和多个自变量，这种情况确实需要进行多元回归分析。然而，选择哪种类型的回归分析取决于你的因变量和自变量的类型，以及你的研究问题。对于连续型的因变量，你可以使用多元线性回归。如果你的因变量是有序的，比如你提到的椎间盘退变分级，你可能需要使用有序逻辑斯蒂回归（ordinal logistic regression），这是一种专门用于处理有序因变量的方法。然后，对于自变量，你可

3 回答627 围观

问WB整膜一抗怎么敷

loveliufudan

通常分为两个步骤。以下是一般的步骤： 1. 样品处理和电泳：首先，您将蛋白样品经过电泳分离，并转移到膜上。这可以通过SDS-PAGE等方法完成。在转膜之前，您可以在凝胶中加入分子量标记物以便于确定目标蛋白的位置。 2. 阻断：转膜完成后，您需要对膜进行阻断（blocking），以防止非特异性结合和减少背景信号。常用的阻断剂包括牛血清蛋白（BSA）、脱脂乳清蛋白（skim milk）等。选择合适的阻

3 回答4385 围观

问求问这个Wb是什么问题

loveliufudan

可能是由于以下原因之一： 1. 高背景信号：M型条带可能是由于非特异性结合引起的背景信号增强。这可能是由于阻断步骤不充分、一抗或二抗的过度浓度、阻断缓冲液或洗涤缓冲液中存在污染物等原因。您可以尝试优化阻断条件、减少一抗和二抗的浓度、更换阻断和洗涤缓冲液，以减少背景信号。 2. 交叉反应：M型条带可能是由于目的抗体与非特异性蛋白结合引起的。这可能是由于目的抗体与其他蛋白共有的表位结构相互作用。您可以

3 回答795 围观

问请问拿到了蛋白质TMT测序结果，如何挑选我想做的目的蛋白

loveliufudan

1. 数据分析和筛选：仔细分析TMT测序的结果，包括蛋白质的定量和鉴定信息。通常，测序结果会提供蛋白质的相对表达水平、统计学显著性和鉴定质量等信息。根据您的研究问题和兴趣，筛选出与您关注的信号通路、生物过程或疾病相关的蛋白质。 2. 生物学功能和相关文献：对所选的蛋白质进行生物学功能注释和相关文献调研。了解这些蛋白质的功能、亚细胞定位、相互作用伙伴以及已知的生物学意义，以确保选择的目的蛋白与您的

3 回答1030 围观

问WB转膜为什么一张膜有蛋白，另一张没有呢

loveliufudan

可能有以下几个原因： 1. 转膜条件不均匀：转膜时，电流密度、时间和电场的均匀分布都非常重要。如果转膜条件不均匀，可能导致蛋白在膜上的分布不均匀。这可能是由于不同区域之间的电阻差异，或电泳槽中的电流不均匀分布等原因。您可以尝试优化转膜条件，确保电流均匀分布，并且蛋白能够均匀地转移到膜上。 2. 样品加载量不均匀：如果您在转膜之前加载的样品在不同区域上有差异，那么膜上的蛋白分布也会不均匀。确保在进行

3 回答1406 围观

问wb转膜

loveliufudan

以下是一些可能的解释： 1. 技术操作：转膜是一项技术要求较高的实验步骤，操作的细节和技巧对结果影响很大。如果在转膜时对两张膜的处理方法、时间或压力有所差异，可能导致膜标记的质量差异。 2. 膜性质：不同的膜材料可能具有不同的性质，如亲疏水性、表面张力等。这些因素可能会导致某些标记更容易在膜上固定，而其他标记则可能难以固定或容易扩散。 3. 标记物的稳定性：不同的标记物可能在转膜过程中表现出不同的

3 回答1010 围观

问求助！敲基因鼠跑WB的问题

loveliufudan

可能存在基因表达水平非常低的情况，无法通过常规的基因鉴定和PCR技术检测到。但是，在免疫印迹（Western Blot）实验中，可以通过放大和检测蛋白质水平来检测到这个基因的存在。

3 回答690 围观

问诱导多能干细胞

loveliufudan

第一代iPS细胞的培养通常是在铺饲养层之前进行的。铺饲养层的目的是为了提供一个适宜的细胞附着表面，帮助iPS细胞在培养皿中附着并生长。当铺饲养层形成后，初代iPS细胞可以被转移到上面进行进一步的培养和维持。

3 回答522 围观

问过表达慢病毒感染悬浮细胞不表达

loveliufudan

这种情况下，可以尝试以下方法来改善在悬浮细胞中的慢病毒感染效率和表达： 1. 提高感染效率：悬浮细胞通常比贴壁细胞更难感染。您可以尝试以下方法来提高感染效率： • 优化感染条件：包括感染剂的浓度、感染时间和感染温度等参数。您可以尝试不同的组合来寻找最佳条件。 • 使用增效剂：某些化合物或蛋白质可以增强病毒感染效率，例如聚乙烯醇（Polybrene）或微粒（Protamine sulfate）。您可

3 回答1409 围观

问求助 | 2型糖尿病造模及代谢笼收集尿液过程中的问题

loveliufudan

对于构建二型糖尿病模型，一般会在动物中使用高脂饮食和低剂量的streptozotocin（STZ）来诱导糖尿病。在建模成功后，继续喂高脂饲料的目的是维持高血脂状态，以更好地模拟糖尿病和肾病的发展过程。高脂饲料维持高血脂状态的理由包括以下几点： 1. 模拟糖尿病肾病：高脂饮食有助于模拟糖尿病患者常见的高血脂状态，这是糖尿病肾病发展的一个特征。通过继续喂高脂饲料，可以更好地研究糖尿病肾病的发病机制和病

3 回答1019 围观

问体外受精移液针

烧伤科常医生

我建议使用25微升的微量注射器

4 回答726 围观

问做了一年WB，gpx4趋势做不出来，甚至是反的，求大神指点

loveliufudan

以下是可能导致此问题的一些原因和建议： 1. 抗体选择：确保您使用的GPX4抗体质量良好，并且已经进行了充分的验证。验证抗体的特异性和灵敏性非常重要，可以通过使用已知GPX4表达的阳性对照样本来验证抗体的有效性。 2. 样本制备：正确的样本制备对于WB实验至关重要。确保样本处理和蛋白质提取过程正确无误。使用相同的样本制备方法和条件来比较不同条件下的GPX4表达。 3. 蛋白负荷量：确认您加载的蛋白

3 回答2492 围观

问神经痛病例模型小鼠痛域范围

loveliufudan

神经痛模型中痛觉阈值的不稳定性是常见的情况，可能受到多种因素的影响。以下是一些可能需要注意的测痛事项： 1. 小鼠个体差异：小鼠个体之间可能存在天然的差异，包括基础痛觉阈值的差异。这种个体差异可能导致在同一实验条件下观察到的痛觉阈值有所不同。确保使用足够的样本量来获得可靠的统计数据，并使用适当的统计方法对数据进行分析。 2. 试验环境和操作者：确保在相同的试验环境中进行测试，并由同一操作者进行测量

3 回答1031 围观

问丙酮脱色脱脂后为什么还要用95%的酒精脱脂呢？再后面回流的目的是什么呀？

loveliufudan

丙酮和95%酒精的使用是为了脱色脱脂和去除脂质物质，而回流则是为了进一步的洗涤和去除残留物。这些步骤的目的是为了获得纯净的样品，以便进行后续的多糖和蛋白质提取。

3 回答1857 围观

问为什么核酸的纯度是以OD260/OD280的比值作为检测标准？有没有其他的检测标准呢

loveliufudan

这是因为核酸在260nm处的吸光度最大，而蛋白质则在280nm处吸光度最大。因此，OD260/OD280的比值可以用来估计样品中核酸和蛋白质的相对含量，从而评估核酸的纯度。理想情况下，DNA的OD260/OD280比值应接近1.8，而RNA的比值应接近2.0。如果比值低于这些数值，通常表示样品中蛋白质的含量较高，即核酸的纯度较低。除此之外，还有其他的一些方法可以用来评估核酸的纯度和质量，比如凝胶电

3 回答6776 围观

问电转导线性化质粒DNA酵母菌细胞

loveliufudan

有以下几个可能的解释： 1. 酵母菌DNA的相对稳定性：酵母菌细胞内的DNA相对稳定，不容易降解或受到损伤。即使未经过特殊处理，提取的酵母菌DNA仍然可以保持较高的完整性，使其能够作为PCR反应的模板。 2. 目的基因的丰度：如果您的目的基因在酵母菌细胞中的丰度较高，即使只提取少量的未经处理的酵母菌DNA，其中仍然可能含有足够多的目的基因片段，以在PCR反应中被特异性引物放大和检测到。 3. 引物

3 回答830 围观

问油菜基因怎么找到LK开头的名称呀

小芙fu

在ncbi网站上面直接搜索LK即可

3 回答599 围观

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