实验问答

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科研学霸天团，48小时有问必答

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问小鼠MCAO模型

loveliufudan

以下是一些建议： 1. 确保手术技术正确：mcao手术的成功与否和梗死程度受到手术技术的影响。请确保您的手术操作符合标准的操作步骤，并由经验丰富的操作人员进行操作。 2. 考虑改变模型参数：mcao模型中可以根据需要调整一些参数，如缺血时间、灌注时间和血栓大小等。尝试调整这些参数可能会对梗死情况产生影响。 3. 选择适当的小鼠品系：不同品系的小鼠在对缺血应激的反应上可能存在差异。您可以尝试使用其他

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问MCAO/R模型梗死面积接近整个大脑半球

loveliufudan

对于MCAO再灌注模型梗死面积接近整个大脑半球的情况，这确实不太常见，且可能需要进一步的研究和分析来确定原因。以下是一些可能的解释和建议： 1. 再灌注效果问题：首先，需要确认再灌注操作是否成功。再灌注过程中可能存在一些技术上的问题，例如栓子位置不准确或再灌注流量不足等。确保再灌注过程准确、顺利是非常重要的。 2. 血流恢复问题：再灌注后的血流恢复可能受多种因素影响，包括颅内压力、血管反应性和微循

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问imagej油红染色定量

loveliufudan

要使用ImageJ进行准确的油红O染色定量，可以按照以下步骤进行操作： 1. 打开图像：在ImageJ中，使用”File”菜单或拖放功能打开您要进行染色定量的图像。 2. 设置阈值：根据染色特征，您需要设置适当的阈值来分割出感兴趣的区域。您可以使用”Image”菜单下的”Adjust”子菜单中的阈值功能来调整图像的阈值。 3. 创建选择区域：使用选择工具（如矩形、圆形或不规则多边形工具）在感兴趣的

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问动物行为学实验

土井挞克树

可以导入viewer，这个软件可以分析动物的行为视频

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问下丘脑取材

loveliufudan

下丘脑位于脑的底部，被大脑半球和脑干所覆盖。它是一个复杂的脑区域，对于取得准确的下丘脑样本，需要进行仔细的操作和解剖。下丘脑的解剖位置比较深处，因此从头顶打开后并不能直接看到下丘脑。下丘脑位于脑干的前部，在视交叉上方、视上束下方的位置。取得下丘脑样本的常见方法是通过顶枕切开或顶颅入路。

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问MCAO模型后脑表面一片红

loveliufudan

有几种可能的解释： 1. 组织炎症反应：脑缺血再灌注损伤可能引起炎症反应，包括炎性细胞浸润和炎症介质的释放。这些炎症反应可能导致局部血流增加和组织充血，进而导致观察到的明显红色区域。 2. 血液回流：在再灌注过程中，血液开始重新流动到缺血区域。这种血液回流可能导致局部血管扩张和血流增加，使区域变得更加充血和红色。 3. 血液污染：手术操作期间可能发生血液污染，例如，血液渗漏或血肿形成。这种血液污染

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问Icr小鼠腹腔注射PCPA后不明原因死亡

sswei

用针方法不对，可能是戳破内脏内出血了。正确用针方法是30-35°斜角插入腹腔后，有一个向上挑针的动作，沿腹腔皮层下向前进针，不能一个方向一戳到底，很容易伤到内脏器官。

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问求助高脂饲料联合STZ建立2型糖尿病模型失败怎么补救？

loveliufudan

在这种情况下，你可以考虑以下补救措施：1.检查STZ浓度和注射剂量：确保STZ的浓度和注射剂量准确无误。如果STZ的浓度或剂量不正确，可能会导致诱导效果不佳。你可以检查STZ的制备方法和使用的注射剂量是否符合操作标准。2.调整饲料成分和喂养时间：高脂饲料的成分和喂养时间可以对模型建立产生影响。你可以考虑调整高脂饲料的成分和喂养时间，以增加模型建立的成功率。咨询专业的动物饲养员或研究人员，了解合适的

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问为什么肝脏的pparα的趋势上升

loveliufudan

这可能是由于以下原因：1. 时间点选择：非酒精性脂肪肝炎的发展是一个动态的过程，不同时间点可能呈现出不同的变化。你可能需要考虑在不同时间点对PPARα进行测量，以了解其变化趋势。特定的时间点可能是PPARα下调的峰值。2. 样本处理和分析方法：确保你的样本处理和分析方法准确可靠。使用适当的技术和抗体，进行正确的蛋白质检测方法，如免疫印迹（Western blotting）。确认你的实验步骤和数据分

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问胶体金用复溶液重悬后总会出现黑色沉淀

sswei

金粒子聚集在一起，相当于粒子变大，吸收峰红移。颜色会逐渐加深变蓝，最后变成黑色。聚集到一定程度就会沉淀出来。

3 回答1123 围观

问Wb条带问题

sswei

背景比较脏，建议可以封闭时间稍微延长，然后抗体特异性不高，建议换一个特异性高

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问EAE模型三批老是失败

loveliufudan

如果连续多次失败，可能需要考虑以下因素和改进措施：1. 抗原选择：EAE模型通常使用小鼠或大鼠的脑脊髓组织或相应的蛋白质（如脱髓鞘蛋白质）作为抗原。确保你选择的抗原具有足够的免疫原性，并经过适当的处理和储存。此外，还要考虑抗原的纯度和质量。2. 免疫佐剂选择：佐剂的选择对于EAE模型的成功建立至关重要。强烈建议使用常见的佐剂，如完全弗氏佐剂（Complete Freund's Adjuvant，C

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问给小鼠吃4个月的普通饲料会有脂肪肝现象出现吗

土井挞克树

一般不会，普通饲料正常饮食很少引起脂肪肝

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问疼痛模型

sswei

如果使用完全弗氏佐剂（CFA）制备慢性疼痛模型，但模型效果不显著且小鼠没有明显的疼痛感觉，可以考虑以下几个方面：1. 佐剂浓度和注射量：检查你使用的CFA的浓度和注射量是否符合常规的实验参数。确保浓度适当且注射量足够，以产生炎症反应和疼痛感。2. 注射技术和部位：注射CFA时，确保使用正确的注射技术和注射部位。CFA通常在小鼠后爪掌部位注射。确保注射器的针头不会刺伤神经或血管，而是准确注射到皮下组

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问请问小白鼠腹股沟脂肪和肩胛骨脂肪怎么取啊，看组织脂肪细胞大小是石蜡切片和HE染色吗

土井挞克树

肩胛骨处脂肪需要先暴露出肌肉，然后去除肌肉用镊子夹取脂肪组织进行分离，后续制作石蜡切片

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问求助：大鼠或小鼠痤疮模型的建立

土井挞克树

涂抹油酸的造模法失败率高，注射造模成功率高，建议采取注射造模法

4 回答540 围观

问求助|研一新手小白做石蜡切片的免疫荧光步骤，请各位师哥师姐帮忙看看！！！

loveliufudan

1. 抗荧光淬灭液的选择：在选择抗荧光淬灭液时，了解您的目的抗原是否在细胞核内或胞外是很重要的。如果目的抗原在细胞核内，可以考虑选择带有DAPI的抗荧光淬灭液，以便进行细胞核染色。如果目的抗原在胞外，则可以选择不带DAPI的抗荧光淬灭液。 2. DAPI染色和透明化处理：如果您选择使用带有DAPI的抗荧光淬灭液进行细胞核染色，通常不需要额外的透明化处理。DAPI染色可以直接在孵育切片前进行。 3

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问LPS刺激3T3成纤维细胞，不仅不产生炎症反应，反而抑制了炎性因子的表达是什么原因

loveliufudan

在LPS刺激3T3成纤维细胞后，对照组正常而刺激组中相关炎性因子的表达降低可能有以下几个可能的原因： 1. 细胞反应的变化：LPS（脂多糖）是一种强炎症刺激剂，通常会引发炎性反应。然而，细胞反应可能会因多种因素而发生变化，包括细胞状态、刺激时间和剂量等。在某些情况下，细胞可能对LPS的刺激做出不同的反应，导致炎性因子的表达降低。 2. 调控机制的介入：细胞可以通过调控机制来控制炎性因子的表达。例如

3 回答979 围观

问这张cBioportal的图，这个F值怎么看，还有乳腺癌分期为什么有stageⅩ，不是共分四期吗

sswei

看这个图片上的F值为2.46。

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问共聚焦显微镜荧光结果如何分析

土井挞克树

结果是要按照荧光的强度和位置综合分析，基因团的位置与荧光的位置一致，表达强度与荧光强度成正比

3 回答2850 围观

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