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        小提质粒的产物始终很低,可能是什么原因?

        相关实验:含有目的基因真核表达 pEGFP-C1 载体的构建实验

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        赶考的举子

        • 试剂盒用的一直是天根的快速小提试剂盒
        • 按说明书的要求每次准备的菌液体积还要多一些
        • 每次裂解细菌的时间按说明书来
        • 排除了低拷贝质粒的因素
        • 结果大多都只在100ng/ul左右
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        3 个回答

        user-title

        Keven轩

        有帮助

        可以试试热洗脱冷结合,最后一步离心除去乙醇之后在60度金属浴上烘干5min让乙醇充分挥发,同时减少洗脱液的量

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        天一湖医者

        有帮助

        手法是最重要的,溶液1.2.3都要温柔些,能多温柔就多温柔,另外时间的掌握也很关键。

        user-title

        未来9

        有帮助

        可能是手法不对,或者方法不当。

        提质粒过程中,动作一定要轻柔,混匀一般颠倒三五次就可以,不然会把质粒弄断,然后除蛋白的时候多离心几次,最后如果还不行可能质粒拷贝数低,可以加药刺激,或者换试剂盒

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