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        质粒提取浓度65—99 ng/ul,浓度低吗

        相关实验:含有目的基因真核表达 pEGFP-C1 载体的构建实验

        user-title

        dxy_tphcsz00

        图片描述

        提取质粒浓度65--99ng/ul,上样量5ul,感觉跑出来的条带太浅了,是质粒浓度太低了吗。

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        5 个回答

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        申东熙老伯

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        质粒浓度不高,但是上样量够了,如果正确的话肯定是很亮的条带,你这个质粒不太正常...

        user-title

        dxy_tphcsz00user-title

        是用的pet28a这个质粒,有说它是低拷贝质粒的,我提了好多次都是低于100ng

        user-title

        土井挞克树

        有帮助

        质粒浓度不够,增加上样量再做。

        user-title

        huarenqiang5

        有帮助

        1、小提质粒:(浓度)100-200ng/ul;

        2、中提质粒:(浓度)0.7-1ug/ul;

        3、大提质粒:无内毒素(浓度)0.5-2ug/ul。


        质粒抽提按得到质粒DNA的量可分为小提,中提,大提。

        质粒小提用的菌液量很少,一般1-5ml,提出的质粒DNA量较少。

        从1ml菌液中提取质粒,用90ul洗脱液洗脱得到的质粒浓度为100-200ng/ul。

        质粒中提得到的质粒DNA的量介于小提跟大提之间,一般用30-50ml菌液提取,从50ml菌液中提取质粒可到到500ul质粒浓度为0.7-1ug/ul的质粒。

        质粒大提用于大量菌液的提取,100ml-500ml 均可,从200ml菌液中提取质粒,1000ul洗脱液洗脱后得到的质粒浓度为0.5-2ug/ul。

        user-title

        sswei

        有帮助

        降低退火温度,或者说目的基因表达亮本来就低

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        loveliufudan

        有帮助

        提取质粒后的浓度可以根据不同的提取方法、样品来源等因素而有所不同,因此不能一概而论。然而,一般来说,如果使用常见的质粒提取方法,如碱裂解法或商业化的质粒提取试剂盒等,得到的质粒浓度应该在几十到几百ng/μl之间。因此,你提取到的质粒浓度在这个范围内,理论上应该足够用于下游实验。

        如果你感觉跑出来的条带太浅了,可能是其他因素导致的,例如电泳时间不够长、电泳条件不适合等。建议你检查一下电泳条件是否正确,或者尝试增加上样量和电泳时间,以获得更明显的条带。

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