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科研学霸天团，48小时有问必答

问MDCK（MDR1转染）细胞在24孔板transwell里的100倍。问题首先是细胞形态怎么全是球状呢？且是不是有细胞叠层的现象

loveliufudan

MDCK细胞在Transwell的培养条件下呈现球状形态，可能是由于以下几个原因：细胞密度过高：如果细胞密度过高，MDCK细胞可能会聚集在一起并形成球状。培养基成分：如果培养基成分不适合MDCK细胞生长，细胞形态可能会发生改变。营养不良：如果细胞没有足够的营养和生长因子，细胞形态可能会变得不规则或球状。至于细胞叠层的现象，它可能是由于细胞密度过高、培养时间过长或培养基成分不合适等原因造成的。这种叠

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问细胞划痕实验contral组效果更好怎么办？

loveliufudan

在这种情况下，有几个可能的解释：细胞毒性：药物浓度过高可能会导致细胞毒性，从而影响细胞的生长和划痕愈合。即使您已经将药物浓度调小，可能仍然存在细胞毒性的问题。如果您怀疑这是问题的原因，可以尝试使用不同的药物浓度或不同的药物来验证。细胞状态：即使细胞是同一批铺在六孔板上的，也可能存在细胞状态的差异。有些细胞可能更健康、更活跃，而有些细胞可能处于应激状态或缺乏营养。这些差异可能会影响细胞的反应和划痕愈

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问MDCK细胞接毒后不到半天变成这种状态

loveliufudan

下面是可能的原因和建议：毒株问题：接种的病毒毒株可能存在问题，例如病毒浓度过高或存在毒性。您可以尝试使用不同的病毒毒株或不同的浓度进行接种实验，以确定是否与毒株有关。细胞状态问题：即使操作规范，MDCK细胞在接种前可能已经存在细胞状态问题，例如缺乏营养或处于应激状态，这些问题可能会影响细胞对病毒的反应。您可以尝试使用健康的细胞并保证其正常生长，以降低细胞状态对实验结果的影响。采样管污染问题：采样管

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问求助小鼠颅骨成骨细胞提取

此用户已注销

你好，请问你成功提取出来了吗。

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问Annexin-FITC/PI染色结果异常

sswei

可能存在情况:1，细胞状态不好;2，细胞收集后存放的时间太长，没有及时染色;3，细胞表面原有的PS相对较多，应选用低浓度的AnnexinV标记;4，PBMC表面往往有血小板黏附在细胞表面，造成Annexin V阳性率偏高;5，过分吹打、震荡或胰酶消化等，可能使PS暴露出来。

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问EPC细胞（鲤上皮细胞）生长缓慢

loveliufudan

以下是一些可能有助于改善细胞生长缓慢的建议：培养基的配方和条件：确保培养基配方正确，含有必需的营养物质和适当的血清浓度。此外，细胞培养的环境也很重要，例如温度、CO2浓度、湿度等。细胞密度：细胞密度不足可能会导致生长缓慢。因此，您可以尝试调整细胞密度，以使细胞数量更多，有利于细胞生长和传代。培养容器的选择：选择适合EPC细胞生长的培养容器，如25cm2培养瓶或T25组织培养瓶。检查细胞状态：定期观

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问组织块细胞原代培养，是真菌污染么

sswei

细胞被污染，微生物则会大量繁衍，培育基就会迅速变黄、变混浊。污染包含细菌污染、支原体污染等。

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问【求助】annexin V /PI双染法测试肿瘤细胞凋亡

秋秋欣欣

消化之前也要收集培养基中的细胞。

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问神经元免疫荧光

loveliufudan

有以下几种可能性：神经胶质细胞：神经胶质细胞是神经系统中的非神经元细胞，它们可以围绕和支持神经元，并参与神经递质信号传递。在海马神经元染色时，神经胶质细胞也可能被染色，因此您观察到的一圈染色可能是这些细胞。血管：海马是一个高度血管化的区域，因此在染色时可能会发现周围的血管被染色。这些血管可能会形成一圈染色。其他细胞类型：除了神经胶质细胞和血管，还有其他一些类型的细胞可能在染色时被染色。例如，免疫细

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问石蜡免疫荧光

sswei

可能存在切片上的石蜡残留，若血清质量不好，里面可能含有纤维蛋白原(正常血清是不含有纤维蛋白原的)，一旦沾到组织上，基本洗不掉了，也会增强自发荧光信号等情况。

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问外毛根鞘细胞

sswei

可以用人黑素细胞基础培养基（不含钙）必须添加钙和人黑素细胞生长添加剂（HMGS）或不含 PMA 的人黑素细胞生长添加剂-2（HMGS-2）来培养。

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问大佬们看过来，昨天铺板的PBMC，今天看是这样的

sswei

细胞聚团原因包括细胞本身有聚团倾向，细胞老化等原因。细胞没死亡，可以再吹打一下培养。

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问小鼠大脑中动脉结扎

dxy_qd2pb8s4

我也在找小鼠大脑中动脉，请问可以指导一下吗

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问样本量计算求助

loveliufudan

要比较A、B、C三种方法对同一样本的检出率，我们需要知道每种方法在多少个样本上进行了检测，并且需要将检测结果（+或-）记录下来。然后，可以使用以下公式来计算每种方法的敏感性和特异性：敏感性= TP / (TP + FN)特异性= TN / (TN + FP)其中，TP（True Positive）是指实际上阳性的样本被检测为阳性的数量，FN（False Negative）是指实际上阳性的样本被检测

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问样本量求助

sswei

计算患病率最小样本量需要考虑以下因素：1.置信水平：置信水平表示研究者对患病率的估计有多大的信心水平。常用的置信水平是95%或99%。2误差限：误差限表示研究者允许患病率的估计值和真实值之间的差异有多大。通常误差限的大小是以患病率的百分比为单位。3预期患病率：预期患病率是指研究者在进行样本量计算前已经确定的患病率。如果没有已知的患病率，则可以采用文献报道的患病率或进行先行研究获取患病率数据。根据上

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问Label free 定量蛋白质

loveliufudan

是否有必要需要视情况而定。以下是一些可能需要考虑的因素：实验目的：如果你的实验目的需要对蛋白质进行定量分析，并且需要比较样品之间的差异，那么做4D label free可能是必要的。样本类型：对于复杂的样本，如细胞或组织样本，可能需要用4D label free来克服样品中存在的复杂性。技术能力和经验：4D label free需要高级的技术能力和经验来正确分析数据。如果您或您的实验室没有相关的技

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问请教一下，A549细胞15cm皿长满细胞密度是多少呀

qzuser2TA9

长满的话，应该到了10的7左右。最好计数一下

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问HaCAT 细胞用蛋白干预之后，加入cck 8不显色

sswei

应稀释有问题，出现细胞死亡，加入cck8不显色。

4 回答914 围观

问细菌污染有可能3天后才爆发吗？

土井挞克树

有可能第三天才爆发，但是前两天也会有前期改变的。

4 回答1041 围观

问灭菌后枪头烘干时间至少多久才会保证无水蒸气

土井挞克树

至少要保证6小时才能保证无水蒸气。

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