MDCK（MDR1转染）细胞在24孔板transwell里的100倍。问题首先是细胞形态怎么全是球状呢？且是不是有细胞叠层的现象

MDCK细胞在Transwell的培养条件下呈现球状形态，可能是由于以下几个原因：

细胞密度过高：如果细胞密度过高，MDCK细胞可能会聚集在一起并形成球状。

培养基成分：如果培养基成分不适合MDCK细胞生长，细胞形态可能会发生改变。

营养不良：如果细胞没有足够的营养和生长因子，细胞形态可能会变得不规则或球状。

至于细胞叠层的现象，它可能是由于细胞密度过高、培养时间过长或培养基成分不合适等原因造成的。这种叠层现象可能会影响Transwell实验结果的准确性，因此建议您在细胞接近100%收缩时进行实验，以避免细胞过度生长和聚集。

最好的解决方法是对细胞进行减数处理，将细胞密度降低到适宜的水平，优化培养基成分和营养状况，以恢复MDCK细胞正常的形态和功能。

可以加入pbs冲洗，如果可以吹打开就是细胞重叠