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实验问答23,378,864 科研人在看

科研学霸天团，48小时有问必答

全部

细胞

免疫

问WB实验做出来pERK比ERK高，且两者水平变化相一致，内参是齐的，是什么原因呢

土井挞克树

因为pERK的抗体结合力特别高，totalERK的结合力很低。

4 回答833 围观

问免疫组化标本突然大量脱片

沫子大大

大量脱片问题考虑你的试剂浓度是否合适，同时你的载玻片有没有问题，普通的载玻片需要度明胶，也可以直接买黏附性的载玻片，贴的时候不要弄反。

5 回答781 围观

问请问各位前辈，请问LY294002溶液如何配置呀,是先用DMSO配成母液然后再加吐温80，PEG300和水稀释吗？

huarenqiang5

先用100%DMSO溶解，然后用的时候1000倍稀释灌流。

4 回答677 围观

问各位大佬，胫骨怎么提取rna啊。

huarenqiang5

可以借鉴以下步骤和方法：小白鼠6只，雄性，4周龄，体重20-30 g。采用脱颈法处死，迅速解剖剥离双侧胫骨组织，用生理盐水冲洗干净，放于液氮中保存。1.骨RNA提取第一组(对照组):随机称取25 g的骨组织3份，在标准条件下用传统Trizol法一步裂解，氯仿纯化、异丙醇沉淀、乙醇再纯化，干燥后得到3份RNA沉淀，每份加入10uL DEPC水溶解。第二组(改良组):随机称取25g的骨组织3份放入2m

4 回答944 围观

问做的胶体金试剂放久了会出现色浅？主要是什么原因？

huarenqiang5

主要原因有：1.被标记蛋白液中含有过高的盐离子。2.T线包被的抗体或者抗原的量过低或者提高胶体金的标记量过低。3.样垫的PH值，PH值越低，颜色越深，所以，包被液的PH值和胶体金标记的PH值也可以降低一下。4.使用胶体金颗粒的大小不合适，颗粒越大，颜色越深，但是，特异性会变弱。

4 回答1315 围观

问有哪些因子参与免疫球蛋白的类型转换？

huarenqiang5

主要有Th1细胞因子IL-2、IL-12、IFNγ；Th2细胞因子主要是IL-4、IL-5、IL-6、IL-10参与免疫球蛋白的类型转换。

4 回答649 围观

问像VH2-1具体是什么意思，重链可变区，那2-1是什么含义呢？

loveliufudan

“VH”表示重链可变区（variable region of heavy chain），“2”表示第二个可变区域，而“1”则可能表示第一个亚区（subregion）。重链可变区是免疫球蛋白分子中一个重要的区域，可以影响抗体与抗原的结合特异性和亲和力。

3 回答345 围观

问VH基因家族包括什么？其临床意义是什么

loveliufudan

VH基因家族是免疫球蛋白（Immunoglobulin，Ig）的重链可变区（VH）基因的一个家族，其中包括了多个互相关联的基因。这些基因编码重链可变区域，这是Ig分子的一部分，也是抗体的可变部分，负责与抗原结合。VH基因家族是高度多样化和可变的，以便Ig分子可以结合到各种各样的抗原上。人类VH基因家族被分为7个亚家族（VH1-VH7），每个亚家族包含了多个基因。不同的VH基因家族在其序列和结构方面

3 回答1384 围观

问细胞骨架免疫荧光染色分析细胞迁移问题

huarenqiang5

不能用这种方法比较实验组和对照组的细胞迁移能力。

3 回答370 围观

问关于IG转录的一些转录因子有哪些？作用是什么？

土井挞克树

给你分享一张图片，上面有转录因子及作用

3 回答442 围观

问IG的V（D）J模式是跟基因重排相关吗，原理是什么？

土井挞克树

3 回答545 围观

问请问在免疫组化中，如何避免或减少内源性过氧化物酶或生物素造成的非特异性染色？

晴空a

将切片移入湿盒中加入新鲜配制的3%双氧水，以去除内源性过氧化物酶封闭液，室温孵育10分钟，PBS充分淋洗。

3 回答335 围观

问提质粒时最后一步加Elution Buffer洗脱，如果没加好加到壁上导致最后的质粒少，会有什么影响吗？可以在离心前多加EB吗？

loveliufudan

如果在提取质粒时未将Elution Buffer彻底加入壁上，可能会导致一些未被溶解的DNA残留在壁上，从而导致纯化后的质粒DNA量减少。在离心前添加更多的Elution Buffer可能会有所帮助，但是需要注意的是，如果添加过多的Elution Buffer可能会导致质粒DNA的浓度过低，从而影响后续实验的结果。因此，建议在离心前仅添加足够的Elution Buffer以确保所有DNA都被溶解并

3 回答436 围观

问免疫荧光实验，ubiquitin 显现不是很明显，是什么原因呢？

dxyc42u

与抗体孵育时间有很大关系，可以尝试晚点看荧光

5 回答340 围观

问免疫荧光实验，阳性细胞数如何计数？

土井挞克树

阳性细胞计数为单位面积下阳性细胞数，你所说的是平均个数，还要计算面积（如1个高倍视野面积是多少平方），个/平方毫米，这样数据才有可比性。imagej可以计数，imagej很强大，很有用，希望大家共同学习，共同提高。

3 回答7801 围观

问如何使用细胞回收液从基质胶上提取细胞

土井挞克树

把细胞回收液收取后先分离纯化后再放到基质胶提取。

3 回答2689 围观

问免疫组化病理切片扫描后可以使用image J软件可以一次性计算整个切片光密度值吗，如何计算，有什么规范吗？

土井挞克树

免疫组化病理切片扫描后可以使用image J软件计算整个切片光密度值，但是不可以一次性，把image J扫描后进行光密度选择然后计算。

3 回答741 围观

问免疫荧光标本使用问题？

loveliufudan

理论上是可以对已经做过GOIGI-COX染色的小鼠大脑切片进行免疫荧光染色的，但需要注意以下几个问题：确保样本没有被破坏：GOIGI-COX染色可能会影响切片中的某些组织结构，因此在进行免疫荧光染色之前，需要检查该样本是否还能够进行下一步的处理。免疫荧光染色前需要进行脱染步骤：GOIGI-COX染色可能会掩盖某些特定的免疫染色信号，因此在进行免疫荧光染色之前，需要进行一定的脱染步骤，以确保免疫染色

1 回答243 围观

问未灭菌大肠杆菌倒入下水道

土井挞克树

已经到了没有办法了，但是确实容易造成污染

3 回答267 围观

问条件性敲除小鼠没有办法着床，如何确定子宫中胚胎的位置呢？

sswei

可采用3维成像技术来确定未着床子宫中胚胎位置。

2 回答337 围观

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