WB实验做出来pERK比ERK高，且两者水平变化相一致，内参是齐的，是什么原因呢

如果作用时间不是短时间（2h以内），ERK自己的表达水平发生改变，会产生这样的结果

可能是因为pERK在某些情况下被更广泛地激活或者更稳定，从而导致其水平相对较高。同时，由于两者的水平变化相一致，可能说明它们处于同一个信号通路中，受到同样的调节作用。另外，如果内参确实齐，则排除了其它非特异性影响因素的影响。

因为pERK的抗体结合力特别高，totalERK的结合力很低。

可能会有以下几个原因：

抗体的亲和性：可能使用的PERK的抗体与目标蛋白PERK的亲和性比ERK的抗体与目标蛋白ERK的亲和性更高，导致PERK的信号强度比ERK高。

蛋白质稳定性：可能PERK的蛋白质比ERK更稳定，因此在实验处理过程中PERK的蛋白质更能保持完整，不容易降解，从而导致其信号强度更高。

实验条件：实验条件的不同可能会影响结果的稳定性和可重复性，例如膜的质量、电泳时间等因素都可能会对结果产生影响。

需要进一步分析实验结果和排除可能的干扰因素，才能确定结果是否可靠。