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细胞骨架免疫荧光染色分析细胞迁移问题

相关实验:免疫荧光技术

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krisstina

想用以下方法评估细胞迁移:用鬼笔环肽染血管平滑肌细胞显示应力纤维,DAPI染核,然后统计「整张图片鬼笔环肽荧光强度除以整张图片细胞总数」,请问可以用这种方法比较实验组和对照组细胞迁移能力吗?


也就是问用整张图鬼笔环肽荧光强度➗整张图总细胞数来得到的值来说明单个细胞应力纤维量的多少行不行?荧光强度可以这么做除法吗

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3 个回答

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huarenqiang5

有帮助

不能用这种方法比较实验组和对照组的细胞迁移能力。

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土井挞克树

有帮助

不可以,因为你可能存在非特异性染色,不全部都是细胞的染色。

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loveliufudan

有帮助

这种方法可以用来比较实验组和对照组细胞迁移能力,但需要注意到一些细节问题。

首先,鬼笔环肽是一种应力纤维标记物,其荧光信号可以用于反映细胞内应力纤维的存在量,但是鬼笔环肽染色的荧光信号并不完全等同于应力纤维的数量。这是因为鬼笔环肽标记的是应力纤维的末端,而应力纤维的长度、朝向等因素也会影响其荧光信号。因此,应该谨慎使用鬼笔环肽染色的荧光强度来比较不同细胞或不同实验条件下的应力纤维数量。

其次,将整张图片鬼笔环肽荧光强度除以整张图片细胞总数可以得到一个平均每个细胞鬼笔环肽荧光强度的值,但这个值并不能直接说明单个细胞的应力纤维数量或质量。因为细胞数量的变化可能会干扰荧光强度的比较,而单个细胞的形态、大小、荧光染色的均匀性等因素也可能会对荧光强度的解释产生影响。因此,这种方法应该结合对细胞数量、形态和荧光染色情况的具体观察和分析来进行。

最后,荧光强度可以通过除法来标准化,但需要确保在比较不同实验组或不同条件下的荧光强度时,所用的显微镜设置、图像采集和荧光信号处理等步骤尽可能一致,以减小误差。

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